本公开总体上涉及gremlin1（grem1）拮抗剂相关的癌症疗法与抗血管生成疗法和/或化学疗法和/或免疫疗法联合用于治疗癌症，尤其是表达grm1的癌症。
背景技术：
1、grem1与肾、肺、肝和视网膜的纤维化病变以及若干种肿瘤类型密切相关，所述肿瘤类型包括胰腺癌、结肠癌、肺癌、神经胶质瘤、胃癌和前列腺癌（ sneddon等人, 《美国国家科学院院刊（ pnas）》 2006年10月；103(40): 14842-14847）。例如，异常的gremlin1上调赋予干细胞生态位外的结肠细胞致瘤性。还发现肿瘤干细胞在神经胶质瘤中高度表达并分泌gremlin1以维持其干性（ yan, k.等人, 《基因与发育（genes dev）》 28, 1085-1100 (2014)）。因此，gremlin1已用作治疗gremlin相关疾病的治疗靶标。
2、尽管grem1拮抗剂对若干种表达grem1的疾病表现出一定的治疗功效，但用于治疗表达grem1的癌症的涉及grem1拮抗剂的有效联合疗法仍然罕见。因此，为了满足临床需求，迫切需要用于表达grem1的癌症的改进的组合疗法。
技术实现思路
1、除其它外，本公开提供了一种用于在有需要的对象中治疗表达grem1的癌症的方法，所述方法包括：向所述对象施用治疗有效量的grem1拮抗剂与以下各项的组合：a）抗血管生成疗法；b）化学疗法；c）免疫疗法；d）抗血管生成疗法和化学疗法；e）化学疗法和免疫疗法；f）抗血管生成疗法和免疫疗法；或g）抗血管生成疗法、化学疗法和免疫疗法。
2、在某些实施方式中，所述抗血管生成疗法包括vegfa或vegfr的拮抗剂。
3、在某些实施方式中，所述vegfa的拮抗剂是抗vefra抗体，如贝伐单抗（bevacizumab，avastin®）。
4、在某些实施方式中，所述vegfr的拮抗剂是小分子vegfr抑制剂或大分子vegfr抑制剂。
5、在某些实施方式中，所述vegfr是vegfr-1、vegfr-2或vegfr-3。
6、在某些实施方式中，所述vegfr的拮抗剂是大分子vegfr抑制剂，如抗vegfr-2抗体。在某些实施方式中，所述抗vegfr-2抗体选自由以下组成的组：雷莫芦单抗（ramucirumab）、奥伐西单抗（olinvacimab）、金妥昔单抗（gentuxima）、培戈-阿拉赛珠单抗（alacizumab pegol）、弗林西单抗（vulinacimab）、msb0254、ak109、at001、ac88、apx004、kdr-1121、vk-b8、mab-04和hlx12。
7、在某些实施方式中，所述vegfr的拮抗剂是小分子vegfr抑制剂，如西曲伐替尼（sitravatinib）、安罗替尼（anlotinib）、阿帕替尼（apatinib）、替拉替尼（telatinib）、阿替拉替尼（altiratinib）、康尼替尼（kanitinib）、甲磺酸乐伐替尼（lenvatinibmesylate）、帕唑帕尼（pazopanib）、索拉非尼（sorafenib）、舒尼替尼（sunitinib）、凡德他尼（vandetanib）、阿昔替尼（axitinib，inlyta®）、卡博替尼（cabozantinib，cabometyx®）、呋喹替尼（fruquitinib，elunate®）和/或瑞戈非尼（regorafenib，stivarga®）。
8、在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的所述grem1拮抗剂与所述抗vegfa抗体或抗vegfr-2抗体或小分子vegfr抑制剂的组合。
9、在某些实施方式中，所述癌症是结直肠癌、胃癌、肺癌、子宫内膜癌、食管癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌或胰腺癌。
10、在某些实施方式中，所述癌症对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗具有抗性或难治性，和/或被确定为在所述癌症的疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
11、在某些实施方式中，所述化学疗法包括化学治疗剂组合。
12、在某些实施方式中，所述化学治疗剂组合包括亚叶酸钙（亚叶酸）、氟尿嘧啶和盐酸伊立替康（irinotecan hydrochloride，folfiri）。
13、在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的所述grem1拮抗剂与所述化学治疗剂组合和所述抗vegfr-2抗体的组合，并且其中所述癌症是结直肠癌、胃癌、肺癌、子宫内膜癌、食管癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌或胰腺癌。
14、在某些实施方式中，所述癌症对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗具有抗性或难治性，和/或被确定为在所述癌症的疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
15、在某些实施方式中，所述免疫疗法包括pd-1/pd-l1轴抑制剂。
16、在某些实施方式中，所述pd-1/pd-l1轴抑制剂包括选自由抗体、小分子和其组合组成的组的pd-1抑制剂。
17、在某些实施方式中，所述pd-1抑制剂包括选自由以下组成的组的抗pd-1抗体：纳武单抗（nivolumab，opdivo；bms-936558）、多塔利单抗（dostarlimab，tsr-042）、派姆单抗（pembrolizumab，keytruda；mk-3475）、medi0680（amp-514）、medi4736、bi 754091、匹地利珠单抗（pidilizumab，ct-011）、西米普利单抗（cemiplimab，libtayo，regn2810）、斯巴达珠单抗（spartalizumab，pdr001）、西利单抗（cetrelimab，jnj 63723283）、特瑞普利单抗（toripalimab，js001）、pf-06801591、替雷利珠单抗（tislelizumab，bgb-a317）、amp-224（gsk-2661380）、abbv-181、兰博利珠单抗（lambrolizumab）、卡瑞利珠单抗（camrelizumab，shr-1210）、信迪利单抗（sintilimab，tyvyt，ibi308）、派安普利单抗（penpulimab，ak105）、赛帕利单抗（zimberelimab）、瑞弗利单抗（retifanlimab）、斯鲁利单抗（serplulimab）、巴替利单抗（balstilimab）、杰诺单抗（geptanolimab）、普格单抗（prolgolimab）、衣唑单抗（ezabenlimab）、萨善利单抗（sasanlimab）、皮维单抗（pimivalimab）、布格利单抗（budigalimab）、诺发利单抗（nofazinlimab）、信得利珠单抗（sindelizumab）、mga404、sym021、bat1306和hx008。
18、在某些实施方式中，所述pd-1抑制剂是纳武单抗（opdivo；bms-936558）。
19、在某些实施方式中，所述pd-1/pd-l1轴抑制剂包括选自由抗体、小分子和其组合组成的组的pd-l1抑制剂。
20、在某些实施方式中，所述pd-l1抑制剂包括选自由以下组成的组的抗pd-l1抗体：阿替利珠单抗（atezolizumab，tecentriq；r05541267；mpdl3280a；rg7446）、bms-936559、阿维单抗（avelumab，bavencio）、洛达利单抗（lodapolimab，ly3300054）、德瓦鲁单抗（durvalumab，medi4736）、cx-072（proclaim-cx-072）、faz053、恩沃利单抗（envafolimab，kn035）、mdx-1105、sti-1040、cs1001、阿得贝利单抗（adebrelimab，shr-1316）、shr-1701、tob2450、bintrafusp、lp002、sti-3031、柯希利单抗（cosibelimab）、帕克米利单抗（pacmilimab）、nm01、ldp、amp-224、格瑞利单抗（garivulimab，bgb-a333）、a167、scd-135、欧普可利单抗（opucolimab）和gr1405。
21、在某些实施中，a）所述癌症对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗具有抗性或难治性，和/或b）所述癌症被确定为在所述表达grem1的癌症的疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
22、在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象施用所述grem1拮抗剂，并且在足以增加所述对象的癌细胞中的pd-l1的表达水平的一定时间段之后，然后向所述对象施用所述pd-1/pd-l1轴抑制剂。
23、在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的所述grem1拮抗剂与所述化学治疗剂组合（例如，folfiri）和所述pd-1/pd-l1轴抑制剂（例如，pd-1抑制剂或纳武单抗）的组合，并且其中所述癌症是结直肠癌、胃癌、肺癌、子宫内膜癌、食管癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌或胰腺癌。
24、在某些实施方式中，所述癌症对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗具有抗性或难治性，和/或被确定为在所述癌症的疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
25、在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的所述grem1拮抗剂与所述抗vegfr-2抗体、所述化学治疗剂组合和所述pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合，并且其中所述癌症是结直肠癌、胃癌、肺癌、子宫内膜癌、食管癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌或胰腺癌。
26、在某些实施方式中，所述癌症对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗具有抗性或难治性，和/或被确定为在所述癌症的疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
27、在某些实施方式中，所述对象被进一步确定为在所述表达grem1的癌症的疾病组织中具有低、中等或高grem1表达。在某些实施方式中，所述对象被进一步确定为如通过ihc测量的具有10-20%的grem1阳性肿瘤细胞。
28、另一方面，本公开提供了一种改善对象对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗的应答性的方法，其中所述对象已被确定为在所述对象的疾病组织的生物样品中存在grem1，或者所述对象已被确定为在所述疾病组织的所述生物样品中的grem1的表达水平达到阈值水平，所述方法包括：
29、a）向所述对象施用治疗有效量的grem1拮抗剂，使得pd-l1在疾病组织中的表达增加，由此改善所述对象对pd-1/pd-l1轴抑制剂的应答性。
30、在某些实施方式中，a）所述对象被确定为对pd-1/pd-l1轴抑制剂具有抗性或难治性，和/或b）所述对象被确定为在疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
31、在某些实施方式中，所述对象被确定为在疾病组织中具有中等或高pd-l1表达。
32、在某些实施方式中，所述疾病组织是癌组织。
33、在某些实施方式中，所述癌症是结直肠癌、胃癌、肺癌、子宫内膜癌、食管癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌或胰腺癌。
34、在某些实施方式中，所述方法进一步包括在所述对象的所述疾病组织中的pd-l1表达增加之后，向所述对象施用治疗有效量的pd-1/pd-l1轴抑制剂。
35、另一方面，本公开提供了一种在对象中确定用grem1拮抗剂与pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合进行的治疗的资格或应答性可能性的方法，所述方法包括：
36、a）确定所述对象的所述疾病组织的生物样品中的grem1的存在或表达水平，
37、其中grem1的存在或不存在或表达水平指示所述对象是否可能有资格进行所述grem1拮抗剂与pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合的治疗或者是否可能对所述治疗有应答。
38、在某些实施方式中，在步骤a）中确定的grem1的所述存在或grem1的所述表达水平高于阈值水平指示所述对象可能有资格进行所述grem1拮抗剂与pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合的治疗或者可能对所述治疗有应答。
39、在某些实施方式中，在步骤a）中确定的grem1的所述不存在或grem1的所述表达水平不高于阈值水平指示所述对象没有资格进行所述grem1拮抗剂与pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合的治疗或者不太可能对所述治疗有应答。
40、在某些实施方式中，本文所提供的方法进一步包括在步骤a）之前的步骤i）：
41、i）在允许检测所述对象的所述疾病组织的所述生物样品中的grem1的表达水平的条件下，使所述样品与grem1诊断剂接触。
42、在某些实施方式中，a）所述对象被确定为对pd-1/pd-l1轴抑制剂具有抗性或难治性，和/或b）所述对象被确定为在疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
43、在某些实施方式中，所述对象被确定为在疾病组织中具有中等或高pd-l1表达。
44、在某些实施方式中，本文所提供的所述方法进一步包括向所述对象施用治疗有效量的所述grem1拮抗剂，持续足以增加所述对象的癌细胞中的pd-l1的表达水平的一定时间段，并且然后向所述对象施用所述pd-1/pd-l1轴抑制剂。
45、在某些实施方式中，所述grem1表达是通过包括抗grem1抗体或其抗原结合片段的grem1诊断试剂检测的。
46、在某些实施方式中，所述grem1拮抗剂包括抗grem1抗体或其抗原结合片段。
47、在某些实施方式中，所述抗grem1抗体或其抗原结合片段包括重链hcdr1、hcdr2和hcdr3，和/或轻链lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：
48、所述hcdr1包括包含tygma（seq id no: 1）的氨基酸序列或与所述氨基酸序列具有至少80%序列同一性的同源序列；
49、所述hcdr2包括包含wintlsgeptyaddfkg（seq id no: 2）的氨基酸序列或与所述氨基酸序列具有至少80%序列同一性的同源序列；
50、所述hcdr3包括包含epmdy（seq id no: 3）的氨基酸序列或与所述氨基酸序列具有至少80%序列同一性的同源序列；
51、所述lcdr1包括包含kssqslldsdgktyls（seq id no: 4）的氨基酸序列或与所述氨基酸序列具有至少80%序列同一性的同源序列；
52、所述lcdr2包括包含lvsklds（seq id no: 5）的氨基酸序列或与所述氨基酸序列具有至少80%序列同一性的同源序列；并且
53、所述lcdr3包括包含wqgahfplt（seq id no: 6）的氨基酸序列或与所述氨基酸序列具有至少80%序列同一性的同源序列。
54、在某些实施方式中，所述抗grem1抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，其中
55、所述重链可变区包括seq id no: 7的氨基酸序列，并且
56、所述轻链可变区包括seq id no: 8的氨基酸序列。
57、在某些实施方式中，所述方法进一步包括一个或多个氨基酸残基取代或修饰，但仍保留对hgrem1的特定结合特异性和/或亲和力。
58、在某些实施方式中，所述取代或修饰中的至少一个取代或修饰在所述cdr序列中的一个或多个cdr序列中和/或在所述vh或vl序列的非cdr区中的一个或多个非cdr区中。
59、在某些实施方式中，所述方法进一步包括免疫球蛋白恒定区，任选地人igg的恒定区。
60、在某些实施方式中，所述恒定区包括人igg1、igg2、igg3或igg4的恒定区，并且任选地所述恒定区包括包含seq id no: 9的序列的重链恒定区和/或包含seq id no: 10的序列的轻链恒定区。
61、在某些实施方式中，所述grem1拮抗剂或所述抗grem1诊断试剂与一个或多个缀合物部分连接。
62、在某些实施方式中，所述缀合物部分包括清除改性剂、治疗剂（例如，化学治疗剂）、毒素、放射性同位素、可检测标记（例如，镧系元素、发光标记、荧光标记、生物素/亲和素或酶-底物标记）、药代动力学修饰部分、dna烷化剂、拓扑异构酶抑制剂、微管蛋白结合剂、其它抗癌药物（如雄激素受体抑制剂）。
63、在某些实施方式中，所述对象是人。
64、在某些实施方式中，所述施用经口服、经鼻、静脉内、皮下、舌下或肌内施用进行。
65、在某些实施方式中，所述grem1拮抗剂的所述施用在抗血管生成剂、和/或所述化学治疗剂和/或免疫疗法剂的施用之前、同时或之后进行。
66、另一方面，本公开提供了grem1拮抗剂在制备用于在有需要的对象中治疗表达grem1的癌症的药物中的用途，其中所述治疗包括向所述对象施用所述药物与以下各项的组合：a）抗血管生成疗法；b）化学疗法；c）免疫疗法；d）抗血管生成疗法和化学疗法；e）化学疗法和免疫疗法；f）抗血管生成疗法和免疫疗法；或g）抗血管生成疗法、化学疗法和免疫疗法。
67、另一方面，本公开提供了grem1拮抗剂在制备用于改善对象对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗的应答性的药物中的用途，
68、其中所述对象已被确定为在所述对象的疾病组织的生物样品中存在grem1，或者所述对象已被确定为在所述疾病组织的所述生物样品中的grem1的表达水平达到阈值水平，
69、其中所述改善包括向所述对象施用治疗有效量的grem1拮抗剂，使得pd-l1在疾病组织中的表达增加，由此改善所述对象对pd-1/pd-l1轴抑制剂的应答性。
70、另一方面，本公开提供了抗grem1诊断试剂在制备用于在对象中确定用grem1拮抗剂与pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合进行的治疗的资格或应答性可能性的试剂盒中的用途，
71、其中所述抗grem1诊断试剂能够确定所述对象的所述疾病组织的生物样品中的grem1的存在或表达水平，
72、其中grem1的存在或不存在或表达水平指示所述对象是否可能有资格进行所述grem1拮抗剂与pd-1/pd-l1轴抑制剂的组合的治疗或者是否可能对所述治疗有应答。
73、在某些实施方式中，a）所述对象被确定为对pd-1/pd-l1轴抑制剂具有抗性或难治性，和/或b）所述对象被确定为在疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达。
74、在某些实施方式中，所述对象被确定为在疾病组织中具有中等或高pd-l1表达。
75、另一方面，本公开提供了一种可用于在有需要的对象中治疗表达grem1的癌症的试剂盒，所述试剂盒包括grem1拮抗剂和包装插入物，所述包装插入物包括用于使用所述grem1拮抗剂与以下各项的组合的说明书：a）抗血管生成疗法；b）化学疗法；c）免疫疗法；d）抗血管生成疗法和化学疗法；e）化学疗法和免疫疗法；f）抗血管生成疗法和免疫疗法；或g）抗血管生成疗法、化学疗法和免疫疗法。
76、在某些实施方式中，所述表达grem1的癌症的特征在于：a）对用pd-1/pd-l1轴抑制剂进行的治疗具有抗性或难治性，和/或b）在所述疾病组织中具有低pd-l1表达或无pd-l1表达，和/或c）在疾病组织中具有grem1表达。
77、另一方面，本公开提供了一种在患有实体瘤的对象中改善肿瘤浸润性淋巴细胞的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的本公开所定义的grem1拮抗剂。
78、在某些实施方式中，所述实体瘤是冷肿瘤。
79、在某些实施方式中，所述对象对抗癌疗法，如免疫疗法，例如免疫检查点抑制剂具有抗性或难治性。
80、另一方面，本公开提供了一种在患有实体瘤的对象中促进冷肿瘤向热肿瘤转化的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的本公开所定义的grem1拮抗剂。
81、另一方面，本公开提供了一种在患有冷肿瘤的对象中治疗癌症的方法，所述方法包括：向所述对象施用治疗有效量的本公开所定义的grem1拮抗剂。
82、在某些实施方式中，所述对象对抗癌疗法，如免疫疗法，例如免疫检查点抑制剂具有抗性或难治性。
83、在某些实施方式中，本文所提供的方法进一步包括向所述对象施用一种或多种疗法。
84、在某些实施方式中，所述一种或多种疗法能够促进t细胞增殖、激活和/或肿瘤浸润。
85、在某些实施方式中，所述t细胞是cd3+ t细胞或cd8+ t细胞。
86、在某些实施方式中，所述一种或多种疗法是本公开所定义的抗血管生成疗法、免疫疗法和/或化学疗法。
87、在某些实施方式中，所述对象被确定为在疾病组织中具有中等或高pd-l1表达。应理解，以上一般描述和以下详细描述两者仅是示例性和解释性的并且并不限制本发明。进一步地，并入本说明书中并构成本说明书的一部分的附图展示了本发明的实施方式并且与描述一起用于解释本发明的原理。