专利名称：：抑制血管生成的哒嗪胺的制作方法
技术领域：
：本发明涉及起血管生成抑制剂作用的3-(3-取代的-1,2,4-噻二唑-5-基)哒嗪胺及其制备方法；还涉及含有它们的组合物及其作为药物的用途。血管生成(即由内皮细胞形成新的血管)在各种生理和病理过程中起重要的作用。促进血管补充是正常组织生长、成熟和维持所必需的。伤口愈合也需要血管生成。然而血管生成对于固体肿瘤的生长和转移也是至关重要的，并且涉及各种其它疾病如新血管青光眼、糖尿病性视网膜病、牛皮癣和类风湿性关节炎。这些疾病以增加血管生成为特征，在此期间，正常静止的内皮细胞变活、使细胞外基体屏障退化、增殖和移行而形成新的血管。为了控制这些与疾病有关的血管生成，具有血管生成抑制剂特性的化合物将是非常有用的。现有技术中公开了一些抑制血管生成的化合物，也称作血管静止剂、血管抑制剂或血管生成拮抗剂。例如氢化可的松是公知的血管生成抑制剂(Folkman等，Science230:1375,1985“Anewclassofsteroidsinhibitsangiogenesisinthepresenceofheparinoraheparinfragment”；Folkman等，Science221:719,1983,“Angiogenesisinhibitionandtumorregressioncausedbyheparinoraheparinfragmentinthepresenceofcortisone”)。在EP0435381-A1(公开于1991,7,3)中，描述了具有抗细小核糖核酸病毒活性的哒嗪胺。本发明化合物不同于所引用的哒嗪胺，即它们的取代基总有噻二唑基，尤其令人意想不到的是这些化合物具有抑制血管生成的特性。本发明涉及下式化合物、其N-氧化物形式、可药用的酸加成盐，及其立体化学异构体形式其中X为CH或N；m为2或3并且n为1、2或3；部分CH2基团的1或2C原子也可含有一个双键，可被下列基团取代C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一或二(C1-6烷基)氯基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羟基或C1-6烷基氧基；和/或所述CH2基团的2C原子可与C2-4亚烷基桥接；R1为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一或二(C1-6烷基)氨基、Ar、ArNH、C3-6环烷基、羟基甲基或苄基氧基甲基；R2和R3为氢，或连接在一起形成式-CH=CH-CH=CH-的二价基团；X为CH时，L为基团L1、L2或L3；或X为N时，L为基团L2或L3；L1为Ar-C1-6烷氧基、Ar-氧基、Ar-硫基、Ar-羰基氨基、二-Ar-甲基氧基、N-Ar-哌嗪基、N-Ar-高哌嗪基、2-苯并咪唑啉酮基、Ar-NR4、Ar-Alk-NR4-、Ar-NR4-Alk-NR5-或Het-NR4-；L2为Ar、Ar-羰基、Ar-CH=CH-CH2-、萘基或Het；L3为由一个或两个选自Ar、Ar-氧基或Ar-硫基的基团取代的C1-6烷基，还可以进一步由氰基或羟基取代或不取代；2,2-二甲基-1,2,3,4-四氢-萘基；2,2-二甲基-1H-2,3-二氢茚基；Ar-哌啶基或Ar-NR4-Alk-；R4和R5分别独立地选自氢或C1-6烷基；各个Ar独立地选自苯基；被1,2或3个独立地选自卤素、氨基、硝基、C1-6烷基、三卤代甲基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基或羟基的取代基取代的苯基；被由C1-6烷基取代的噁二唑取代的苯基；Het为单环或二环杂环；单杂环为吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基；二环杂环为吲哚基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吡喃基、苯并噻喃基和二氢苯并噻喃基；各单环和二环杂环可在碳原子上由1或2个独立地选自卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、或三卤代甲基的取代基取代或不取代；并且Alk为C1-6亚烷基。定义Het的杂环优选通过碳原子与分子的其余部分连接。2-苯并咪唑啉酮基优选通过氮原子与分子的其余部分连接。在N-Ar-哌嗪基和N-Ar-高哌嗪基中，Ar基团位于哌嗪基或高哌嗪基部分的氮原子上。在上下文定义和使用的术语中，卤素通常为氟、氯、溴和碘；C1-4烷基为具有1-4个碳原子的直链和支链饱和的烃基，如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、2-甲基丙基等；C1-6烷基意指C1-6烷基和具有5-6个碳原子的更高同系物，如戊基、2-甲基丁基、己基、2-甲基戊基等；C2-4亚烷基为具有2-4个碳原子的二价直链和支链饱和的烃基，如1,2-亚乙基、1,3-亚丙基、1,4亚丁基等；C1-6亚烷基为具有1-6个碳原子的二价直链和支链的饱和烃基，如亚甲基、1,2-亚乙基、1,3-亚丙基、1,4-亚丁基、1,5-亚戊基、1,6-亚己基等。C3-6环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。部分的实例为本文所述的可药用酸加成盐意指式(Ⅰ)化合物可形成的无毒酸加成治疗活性盐。可通过用合适的酸处理式(Ⅰ)化合物的碱性形式方便地获得所述的盐，所述的合适的酸例如无机酸，如氢卤酸，如盐酸或氢溴酸；硫酸；硝酸；鳞酸等；或有机酸如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸(pamoicacid)等。反过来，所述盐的形式可通过用合适的碱处理而转化为游离碱的形式。上文所使用的术语“酸加成盐”也包括式(Ⅰ)化合物及其盐可能形成的溶剂化物。此溶剂化物例如水合物、醇化物等。上文所使用的术语“立体化学异构体形式”为式(Ⅰ)化合物可拥有的所有可能的异构体以及构象。除非有指示或说明，化合物的化学名称均表示所有可能的立体化学异构体形式的混合物，特别是外消旋混合物，所述混合物包括基本分子结构的所有非对映异构体和/或对映异构体。更具体地说，立体中心可具有R-或S-构型；二价环状饱和基团上的取代基可具有顺式-或反式-构型、对于具有两个立本中心的化合物来说，按theChemicalAbstract规则(ChemicalSubstanceNameSelectionManual(CA),1982版，第Ⅲ卷，第20章)使用相关的立体描述符号R*和S*。打算将单一形式或其混合形式的式(Ⅰ)化合物的所有立体化学异构体形式都包含在本发明的范围之内。式(Ⅰ)化合物的N-氧化物形式意指一个或多个氮原子被氧化而成所谓N-氧化物的式(Ⅰ)化合物，尤其是那些一个或多个哌啶一、哌秦或哒嗪基-氮原子被氧化的N-氧化物。不管什么时候，下文所使用的术语“式(Ⅰ)化合物”意味着也包括其N-氧化物形式，其可药用酸加成盐及其立体化学异构体形式。一组感兴趣的化合物，由X为CH或N且部分的CH2基团未被取代的那些式(Ⅰ)化合物组成。另一组感兴趣的化合物由R1为C1-6烷基、X为CH、且m为2和n为2的那些式(Ⅰ)化合物组成。再一组感兴趣的化合物由R1为C1-6烷基、X为N、且m为2和n为2的那些式(Ⅰ)化合物组成。一组特定的化合物是R1为氢或二(C1-6烷基)氨基的式(Ⅰ)化合物。优选的化合物是那些R1为甲基、R2和R3为氢、X为CH或N、且L为Ar-哌啶基或被分别独立地选自卤素或三氟甲基的1、2或3个取代基取代的苯基的式(Ⅰ)化合物。更特定的化合物是那些R1为氢或二(C1-6烷基)氨基、R2和R3为氢、X为CH或N、m为2、n为2的式(Ⅰ)化合物。最优选的是3-〔4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基〕-6-(3-甲基-1、2、4-噻二唑-5-基)哒嗪，或3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕哒嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌啶基〕哒嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-1-哌啶基〕哒嗪，3-(1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕哒嗪，1-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-哒嗪基〕-N-〔3-(三氟甲基)苯基〕-4-哌啶胺，和N,N-二甲基-5-〔6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-3-哒嗪基〕-1,2,4-噻二唑-3-胺，及其可药用酸加成盐、立体异构体形式，或其N-氧化物。一般来说，本发明的化合物可按照本领域已知的N-烷基化方法，通过式(Ⅱ)的哒嗪与式(Ⅲ)胺反应来制备。在前面和后面的反应方案中，W表示合适的反应性离去基团例如卤素，如氟、氯、溴、碘或者在某些情况下，W也可为磺酰氧基基团，如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基等反应性离去基团。可根据本领域已知的方法进行所述反应，例如在反应惰性溶剂(如，二甲基甲酰胺)中一起搅拌和加热反应物，优选在碱(如碳酸钠)存在下进行。另外，所述N-烷基化反应可通过使用本领域已知的相转移催化反应条件来进行。所述条件包括搅拌反应物、具有合适的碱并且可以在(或不在)惰性气体，如不含氧的氩气或氮气下、存在有合适的相转移催化剂，如三烷基苯基甲基铵、四烷基铵、四烷基鳞、四芳基鳞卤化物、氢氧化物等催化剂。有时升高温度对于增加反应速度是合适的。X为N且L为L3的式(Ⅰ)化合物(由式(Ⅰ-a)来表示所述化合物)也可通过用式(Ⅴ)中间体使式(Ⅳ)的取代哌嗪进行N-烷基化反应，遵循类似于上文式(Ⅱ)和(Ⅲ)起始制备式(Ⅰ)所述的方法。式(Ⅰ-a)化合物也可按照本领域已知的还原性N-烷基化方法，通过用式(Ⅵ)的酮或醛还原性地N-烷基化式(Ⅳ)取代的哌嗪来制备，其中0=L3’表示式H-L3衍生物，其中两成双氢原子被氧代替。所述还原性N-烷基化可在反应惰性的溶剂，如二氯甲烷、乙醇、甲苯或其混合物中，并在还原剂如氢硼化物如氢硼化钠、氰基氢硼化钠或三乙酰氧基氢硼化钠存在下进行。与合适的催化剂如披钯碳或披铂碳组合使用氢作为还原剂也是方便的。在氢用作还原剂的情况下，将脱水剂例如叔丁醇铝加入到反应混合物中是有利的。为了防止反应物和反应产物中某些功能基的进一步氢化，将合适的催化毒物如噻吩或喹啉-硫加到反应混合物中也是有利的。搅拌，在升高或不升高温度和/或压力可增加反应速度。L为Ar-O-C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物(所述化合物由式(Ⅰ-b)来表示)也可通过式(Ⅷ)酚和式(Ⅶ)中间体缩合，如使用Mitsunobu反应(Synthesis,1,1981)来制备。而且，式(Ⅰ-b)化合物也可按照本领域已知的O-烷基化反应，用式(Ⅸ)哒嗪胺衍生物使式(Ⅷ)酚烷基化来制备。所述O-烷基化反应可方便地通过混合反应物来进行，可以存在有反应惰性溶剂如水；芳香族溶剂如苯、甲苯等；C1-6链烷醇如甲醇、乙醇等；酮如2-丙酮、4-甲基-2-丙酮等；酯如乙酸乙酯、γ-丁内酯等；醚如乙醚、四氢呋喃、1,4-二噁烷等；偶极非质子传递溶剂如N,N二甲基甲酰胺、N,N二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等；或这些溶剂的混合物。加入适宜的碱如碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠等，或有机碱，例如叔胺如N,N-二乙基乙胺、N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺等，可用于吸收反应过程中形成的酸。而且，首先通过(Ⅷ)与上文定义的合适的碱反应而将式(Ⅷ)酚转化为合适的盐的形式，如碱金属或碱土金属的盐，然后在与式(Ⅸ)烷基化试剂的反应中使用所述盐形式是有利的。搅拌且有时升高温度可增加反应速度；尤其是，该反应可在反应混合物的回流温度下进行。另外，在惰性气体如不含氧的氩气或氮气下进行所述烷基化反应是有利的。另外，所述O-烷基化反应可通过采用上文所述的本领域已知的相转移催化反应条件来进行。X为CH且L为L3的式(Ⅰ)化合物(所述化合物由式(Ⅰ-c)来表示)也可按照本领域已知的Witting反应法(R6和R7为芳基或C1-6烷基)或Horner-Emmons反应法(R6为烷氧基且R7为O-)，通过酮(X)与式(Ⅺ)的内鎓盐在反应惰性溶剂中反应来制备。式(Ⅺ)，(R6)2R7P=L3’，表示式H-L3的衍生物，其中两成双氢原子被(R6)2R7P=取代。合适的溶剂例如烃，如，己烷、庚烷、环己烷等；醚，如，乙醚、四氢呋喃、1,2-二甲氧乙烷等；偶极非质子传递溶剂，如，二甲基亚砜、六甲基鳞三酰胺等。然后将不饱和的中间体(Ⅻ)可按合适的还原反应来还原，例如，通过在还原剂(例如，氢硼化物，如氢硼化钠、氰基氢硼化钠或三乙酰氧基氢硼化物)存在下，在合适的反应惰性溶剂中搅拌，和如果需要，加热不饱和的中间体。合适的溶剂是链烷醇，如，甲醇、乙醇等，和羧酸，如，乙酸等。式(Ⅺ)的中间体内鎓盐，可通过用合适的碱如叔丁醇钾、甲基锂、丁基锂、氨基钠、氢化钠、链烷醇钠等碱在惰性气体下和反应惰性溶剂如醚，如四氢呋喃、1,4-二噁烷等中处理鳞盐或磷酸盐获得。式(Ⅰ)化合物还可按本领域已知的基团转化反应将式(Ⅰ)化合物相互转化来制备。例如，带有苯基部分的式(Ⅰ)化合物，可用N-溴化琥珀酰亚胺在反应惰性溶剂中进行溴化反应而在苯基部分引入溴原子。而且，式(Ⅰ)化合物可在酸性条件下水解。式(Ⅰ)化合物也可按已知的将三价氮转化为N-氧化物形式的方法，来使其转化为相应的N-氧化物形式。所述的N-氧化反应一般可通过式(Ⅰ)的原料与合适的有机或无机过氧化物反应来进行。合适的无机过氧化物包括如，过氧化氢、碱金属或碱土金属的过氧化物，如，过氧化钠、过氧化钾；合适的有机过氧化物可包括过氧酸，如，苯甲过氧酸或卤素取代的过氧酸，如，3-氯苯甲过氧酸，过氧链烷酸，如，过氧乙酸，烷基氢过氧化物，如，叔丁基氢过氧化物。合适的溶剂为例如，水，低级链烷醇，如，乙醇等，烃，如，甲苯，酮，如，2-丁酮，卤代烃，如，二氯甲烷，和这些溶剂的混合物。起始材料和某些中间体是已知的化合物，并且可从市场购得或可按照本领域通常已知的常规反应过程来制备。在EP-0435381-A1中描述了式(Ⅲ)的某些中间体。式(Ⅱ)中间体可通过式(ⅩⅢ)化合物与式(ⅩⅣ)(可以其酸加成盐的形式加入)反应来制备，其中W为上文定义的合适的离去基团。而且，式(Ⅶ)中间体按照与式(Ⅰ)化合物类似的方式，通过式(Ⅱ)中间体(其中W是上面定义的合适离去基团)与式(ⅩⅤ)中间体在反应惰性溶剂如二甲基亚砜，优选在碱如碳酸钠存在下来制备。式(Ⅰ)化合物和某些中间体在其结构中可有一个或多个立体中心，存在R或S构型。按上文所述的制备方法制备的式(Ⅰ)化合物可合成得到对映体的外消旋混合物的形式，该对映体可按照本领域已知的拆分方法相互分离。通过与合适的手性酸反应，将式(Ⅰ)的外消旋化合物转化为相应的非对映异构体的形式。然后通过例如选择性或分级结晶分出所述非对映异构体盐的形式并用碱释出对映体。另一种分离式(Ⅰ)化合物对映体形式的方法包括使用手性固定相的液相色谱层析。所述纯的立体化学异构体形式也可由合适起始材料的相应的纯的立体化学异构体形式来衍生，条件是反应以立体特异性的方式来进行。如果需要特定的立体异构体，优选所述化合物通过立体特异的制备方法合成。采用对映纯起始原料有利于所述方式。式(Ⅰ)化合物具有有价值的药理特性，它们在体内和体外均抑制血管生成。就其药理活性而言，式(Ⅰ)化合物、其可药用酸加成盐、立体化学异构体形式或其N-氧化物形式都是血管生成抑制剂。所以，血管生成抑制剂对于控制或治疗与血管生成有关的疾病，如眼的新血管疾病、新血管青光眼、糖尿病性视网膜病、晶状体后的纤维组织形成、血管瘤、血管纤维瘤、牛皮癣和类风湿性关节炎是有用的。而且，血管生成抑制剂可用于控制固体肿瘤的生长，如，乳腺肿瘤、前列腺肿瘤、黑素瘤、肾肿瘤、结肠肿瘤、子宫癌等；和控制转移瘤。因此，本发明也涉及上文定义的式(Ⅰ)化合物作为药物的用途。由于本发明化合物对于与血管生长有关的疾病的治疗或预防是有用的，因此本发明提供一种对患有此疾病的温血动物进行治疗的方法，所述方法包括系统性地给予治疗有效量的式(Ⅰ)化合物、其N-氧化物或可药用酸加成盐。鉴于本发明化合物的药理特性，可将其配制成各种给药目的的药物形式。为了制备本发明的药物组合物，将作为活性成分的有效量的碱或与酸加成盐形式的特定化合物与可药用载体进行紧密混合，载体可根据给药所需的制剂形式而采用各种各样的形式。这些药物组合物是优选适于口服、直肠给药、经皮给药或通过非胃肠道注射给药的单位剂量形式。例如，制备口服剂量形式的组合物时，可采用任何常用的药用介质，例如，制备口服液体制剂如悬浮剂、糖浆、酏剂和溶液时，使用水、乙二醇、油、醇等；或者制备粉剂、丸剂、胶囊和片剂时，使用固体载体如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于其易于服用，片剂和胶囊是最有利的口服剂量单位形式，在这种情况下，显然使用固体药物载体。对于非胃肠道组合物来说，尽管可包括其它组分以有助于例如溶解性的改善，但载体通常会包括至少绝大部分无菌水。可注射溶液，例如在包括盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物的载体中配制。可注射的悬浮液，可使用合适的液体载体、悬浮剂等配制。在适于经皮给药的组合物中，载体可包含也可不包含渗透促进剂和/或合适的湿润剂，可以最小比例组合任何天然的合适的添加剂，该添加剂不会对皮肤有显著的有害作用。所述添加剂可促进对皮肤给药和/或可有助于制备所需组合物。这些组合物可以各种方式来给药，例如，作为透皮膏贴、作为局部点滴液(spot-on)、作为油膏。特别有利的是配制成易于给药和剂量均匀的上文所述的单位剂量形式药物组合物。在本文说明书和权利要求书中使用的剂量单位形式指适于作为单个剂量的物理分离单位，每个单位含有经计算能产生所需治疗作用的预定量的活性成分和所需药物载体。此剂量单位形式的例子是片剂(包括刻痕或包衣的片剂)、胶囊、丸剂、袋装粉剂、糯米纸囊剂、注射溶液或悬浮剂、茶勺量剂(teaspoonful)、汤勺量剂(tablespoonful)等，及其分开的多个剂量。本领域技术人员可由下文所述的试验结果容易地决定有效剂量。一般来说，有效量为1×10-5mg/kg-10mg/kg体重，特别是0.001mg/kg-1mg/kg体重。在一整天中，以合适的间隔按两次、三次、四次或更多的分剂量来给予所需剂量是合适的。所述分剂量可被配制成单位剂量形式，例如每单位剂量形式中含有0.001-500mg，特别是0.0lmg-200mg的活性组分。下列实施例的目的是说明性的，不起限定作用。实验部分下文“DMF”指N,N-二甲基甲酰胺，“DCM”指二氯甲烷，“DIPE”指二异丙基醚，而“THF”指四氢呋喃。A、中间体的制备实施例A.1在回流温度下，将3-氯-6-甲基哒嗪(12.9g)和亚硫酰氯(119g)搅拌一夜。蒸发混合物，加入200mlDCM并将混合物冷却到-5℃。分批加入盐酸1-亚氨基-乙胺(9.5g)，并将整个混合物搅拌15分钟。然后，滴加氢氧化钠(50％)(25ml)(温度低于5℃)。搅拌混合物直到室温。搅拌30分钟后，分层。干燥有机层、过滤并蒸发。残渣经柱色谱层析纯化，产生8.2g(38.6％)的3-氯-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)哒嗪；mp.180.3℃(中间体1-a)。实施例A.2a)将3-氯-6-甲基哒嗪(19.3g)和亚硫酰氯(160ml)的混合物搅拌并回流过夜。将混合物蒸发、加入甲苯(100ml)并再次蒸发，产生40g(100％)的α,α,3-三氯-6-哒嗪甲磺酰氯(中间体2-a)。b)将中间体(2-a)(79.2g)的DCM(600ml)混合物在0℃下搅拌。加入2-(苯基甲氧基)-ethanimidamide(40.1g)。在0℃下滴加NaOH(50％,60ml)。冷却混合物并在0℃下搅拌1小时。加入水(300ml)和DCM(400ml)并使混合物分层。干燥有机层、过滤并蒸发溶剂。经硅胶在玻璃滤器上纯化残渣并从2-丙醇中结晶出来。滤出沉淀物并干燥，产生28g(45％)的3-氯-6-〔3-〔(苯基甲氧基)甲基〕-1,2,4-噻二唑-5-基〕哒嗪(中间体2-b,mp:109-110℃)。表1中列出了按类似方法制备的中间体。表1*R2和R3连接形成二价基团B、制备最终化合物实施例B.1将中间体(1-a)(6.4g)、1-〔3-(三氟甲基)苯基〕哌嗪(5.3g)和碳酸钠(8.5g)的DMF(200ml)混合物在60℃搅拌过夜。将混合物倾入冰水中并过滤。沉淀物溶解在DCM中并用水洗涤。干燥有机层、过滤并蒸发。残渣经硅胶柱层析纯化(洗脱剂CHCl3/CH3OH99.5/0.5)。收集纯化部分并蒸发。将残余物从2-丙醇中结晶出来，产生2.3g(24.6％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕哒嗪；熔点173.2℃(化合物1)。实施例B.2室温下，将4-氟苯酚(1.2g)加到三苯基膦(2.9g)的THF(200ml)溶液中，并将混合物在室温下搅拌30分钟。室温下滴加少量THF中的氮杂二甲酸二乙酯(1.9g)并将混合物搅拌5分钟。室温下滴加少量THF中的1-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-哒嗪基〕-4-哌啶-甲醇(3g)，并将混合物在室温下搅拌2小时。蒸发溶剂并从2-丙醇中结晶残余物。滤出沉淀并干燥，产生1.66g(43％)的3-〔4-〔(4-氟苯氧基)甲基〕-1-哌啶基〕-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)哒嗪(化合物55)。实施例B.3搅拌3,5-二(三氟甲基)-苯甲酰氯(1.1g)和三乙胺(0.4g)的DCM(40ml)混合物。分批加入3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(1-哌嗪基)哒嗪(1.1g)。室温下搅拌混合物3小时。加入三乙胺。将混合物在室温下搅拌1小时。加入水并用DCM提取混合物3次。将合并的有机层干燥、过滤并将溶剂蒸发。用甲醇结晶残余物。滤出沉淀物并干燥，产生0.91g(45％)的1-〔3,5-二(三氟甲基)苯甲酰基〕-4-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-哒嗪基〕哌嗪(化合物131)。实施例B.4将化合物1(3g)、N-溴琥珀酰亚胺(1.3g)和3-氯过氧苯甲酸(催化有效量)的四氯化碳(100ml)混合物搅拌过夜。滤出沉淀物、干燥并溶解在N-溴琥珀酰亚胺(1.3g)和3-氯过氧苯甲酸(催化有效量)的四氯化碳(100ml)混合物中。搅拌混合物并回流48小时。滤出沉淀物。干燥并经柱色谱层析纯化(洗脱剂NH4OAc(0.5％的水溶液)/CH3OH30/70)。收集纯馏分并蒸发溶剂。用CH3OH/CH2Cl2结晶残余物，滤出沉淀物并干燥，产生0.77g(21.5％)的3-〔4-〔4-溴-3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)哒嗪(化合物88)。以类似方法，也可制备1-〔1-〔4,4-二(4-氟苯基)丁基〕-4-哌啶基〕-4-(苯基甲基)哌嗪三盐酸盐(化合物90)。实施例B.5将一份3-氯过氧苯甲酸(0.9g)加到化合物53(1.9g)的DCM(50ml)溶液中，室温下搅拌。所得反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发溶剂并将残余物溶解在2-丙醇中，并用HCl/2-丙醇转化为盐酸盐(1∶2)。滤出沉淀物并干燥，产生1.9g(90.3％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-1-哌啶基〕哒嗪，哌嗪-N1-氧化物二盐酸盐(化合物162)。实施例B.6a)在0℃和氮气流下，将过氧化氢(1.22g,30％)加到二氯马来酐(2.17g)的DCM(30ml)混合物中。在0℃下，将混合物搅拌2小时。在0℃下加入3-氯-6-甲基哒嗪(1.4g)。将混合物搅拌并回流过夜，然后用碳酸氢钠水溶液洗涤两次、Na2SO3水溶液和水各洗涤一次。将合并的有机层干燥、过滤并蒸发溶剂。残余物不用进一步纯化可用于下一步中(中间体3)。b)在60℃温度下，将中间体3(3.6g)、1-(4-哌啶基)-4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-哌嗪(5g)和Na2CO3(3.4g)的DMF(80ml)混合物搅拌过夜。冷却混合物、倾入冰水(400ml)中并搅拌1小时。滤出沉淀物、干燥并经玻璃滤器上的硅胶纯化(洗脱剂CH2Cl2/CH3OH100/0,97.5/2.5和95/5)。收集两个纯馏份并将其溶剂蒸发。第一馏分用CH3OH结晶，产生1.7g(21％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基-6-(4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1-哌嗪基)-1-哌啶基)哒嗪，2-氧化物(化合物165)。将另一馏分刮下、滤出并干燥，产生0.75g(9％)的3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-(4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1-哌嗪基)-1-哌啶基)哒嗪，1-氧化物(化合物166)。表2-11列出按上述实施例之一制备的化合物，而表12列出上文实验部分制备的化合物的碳、氢和氮的实验(表的头栏写明“exp”)和理论(表的头栏写明“theor”)元素分析值。表2(*)c.C6H11指环己基表3表4表5表6表7表8表9(*)通过在酸性条件下水解化合物167来制备。表10表11*R2和R3连接形成二价基团表12C、药理实施例实施例C.1体外使用由Nicosia,R.F.和Ottinetti在“LaboratoryInvestigation”，第63卷，第115页，(1990)中描述的大鼠主动脉环血管生成模型来测量血管生成抑制活性。化合物抑制微血管形成的能力与用载体治疗的对照环相比较。培养8天后使用由Nissanov,J.,Tuman,R.W.,Gruver,L.M.和Fortunato,J.M.在“LaboratoryInvestigation”，第73(#5)卷，第734页(1995)中描述的成像分析系统进行定量测定(微血管的面积)，所述成像分析系统由光学显微镜、CCD照相机和自动的为用户设计的成像分析程序组成。以几种浓度试验化合物来测定其抑制能力(IC50)。表13所列的一些化合物的IC50值低于1nM。表13实施例C.2使用US5382514中描述的Matrigel模型测量体内血管生成抑制活性。简要地来说，将含有鼠基底膜的提取液和血管生长因子(如VEGF、bFGF、aFGF)注射到温血动物体内，形成凝胶基质。一段时间后，从动物体中回收凝胶并定量测定血管的生成。试验化合物以0.1mg/kg的剂量口服给药。发现化合物2、30、31、47、53、54、74、75、82、88、134、138和177对血管生成的抑制作用大于70％。D、组合物实施例下列制剂例举了剂量单位形式的本发明典型的药物组合物，该组合物适于系统或局部给予温血动物。实施例中使用的“活性组分”(A.I.)涉及式(Ⅰ)化合物、其N-氧化物形式、可药用酸加成盐或立体化学异构体。实施例D.1口服溶液将9g的4-羟基苯甲酸甲酯和1g的4-羟基苯甲酸丙酯溶于4L沸腾的纯水中。先后将10g的2,3-二羟基丁二酸和20g的A.I.溶于3L前一步所获得的溶液中。所得溶液与前面所剩溶液合并并加入12L的1,2,3-丙三醇和3L山梨醇70％的溶液。将40g的糖精钠溶于0.5L的水中并加入2ml红莓和2ml鹅莓香料。所得溶液与前面溶液合并，加入适量的水使体积到20L而获得每茶勺(5ml)含有5mgA.I.的口服溶液。将所得溶液置于合适的容器中。实施例D.2胶囊将20gA.I.、6g十二烷基硫酸钠、56g淀粉、56g乳糖、0.8g胶体二氧化硅和1.2g硬脂酸镁一起剧烈搅拌。然后，将所得混合物填充在1000个合适的硬明胶胶囊中，每粒胶囊含有20mgA.I.。实施例D.3膜包衣片制备片芯将100gA.I.、570g乳糖和200g淀粉的混合物充分混合，并用5g十二烷基硫酸钠和10g聚乙烯吡咯烷酮的约200ml水溶液湿润。将湿润的粉末混合物过筛、干燥并再一次过筛，然后加入100g微晶纤维素和15g氢化植物油。将整个混合物混合好并压制成片，获得10000片，每片含有10mg的活性成分。包衣在10g甲基纤维素的75ml变性乙醇溶液中加入5g乙基纤维素的150ml二氯甲烷溶液。然后加入75ml二氯甲烷和2.5ml1,2,3-丙三醇。将10g聚乙二醇熔化并溶于75ml二氯甲烷中。所得溶液加到前面溶液中，然后加入2.5g硬脂酸镁、5g聚乙烯吡咯烷酮和30ml浓的色素悬浮液并将整个混合物混合均匀。在包衣装置中用所得混合物对片芯包衣。实施例D.4注射溶液将1.8g4-羟基苯甲酸甲酯和0.2g4-羟基苯甲酸丙酯溶于约0.5L注射用沸水中。冷却到约50℃后，搅拌下加入4g乳酸、0.05g丙二醇和4gA.I.。将所得溶液冷却到室温并补充适量注射用水使体积达到1L，获得4mg/mlA.I.的溶液。溶液过滤灭菌并填充到无菌容器中。实施例D.5栓剂将3gA.I.溶于3g2,3-二羟基丁二酸的25ml聚乙二醇400的溶液中。12g表面活性剂和300g甘油三酯熔化在一起。后一混合物与前面溶液混合均匀。在37-38℃温度下，将所得混合物倾入成型模中形成100粒分别含有30mg/mlA.I.的栓剂。权利要求1．本发明涉及下式化合物、N-氧化物形式、与可药用酸加成的盐及其立体化学异构体形式其中X为CH或N；m为2或3并且n为1、2或3；部分CH2基团的1或2C原子也可含有一个双键，可被下列基团取代C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羟基或C1-6烷基氧基；和/或所述CH2基团的2C原子可与C2-4亚烷基桥接；R1为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一或二(C1-6烷基)氨基、Ar、ArNH、C3-6环烷基、羟基甲基或苄基氧基甲基；R2和R3为氢，或连接在一起形成式-CH=CH-CH=CH-的二价基团；X为CH时，L为基团L1、L2或L3；或X为N时，L为基团L2或L3；L1为Ar-C1-6烷氧基、Ar-氧基、Ar-硫基、Ar-羰基氨基、二-Ar-甲基氧基、N-Ar-哌嗪基、N-Ar-高哌嗪基、2-苯并咪唑啉酮基、Ar-NR4、Ar-Alk-NR4-、Ar-NR4-Alk-NR5-或Het-NR4-；L2为Ar、Ar-羰基、Ar-CH=CH-CH2-、萘基或Het；L3为由一个或两个选自Ar、Ar-氧基或Ar-硫基的基团取代的C1-6烷基，还可以进一步由氰基或羟基取代或不取代；2,2-二甲基-1,2,3,4-四氢-萘基；2,2-二甲基-1H-2,3-二氢茚基；Ar-哌啶基或Ar-NR4-Alk-；R4和R5分别独立地选自氢或C1-6烷基；Ar为苯基；被1,2或3个独立地选自卤素、氨基、硝基、C1-6烷基、三卤代甲基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基或羟基的取代基取代的苯基；被由C1-6烷基取代的噁二唑取代的苯基；Het为单环或二环杂环；单杂环为吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基；二环杂环为吲哚基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吡喃基、苯并噻喃基和二氢苯并噻喃基；各单环和二环杂环可在碳原子上由1或2个独立地选自卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、或三卤代甲基的取代基取代或不取代；并且Alk为C1-6亚烷基。2、权利要求1的化合物，其中X为CH或N，且部分的CH2基团是未取代的。3、权利要求2的化合物，其中R1为C1-6烷基、X为CH，且m为2和n为2。4、权利要求2的化合物，其中R1为C1-6烷基、X为N，且m为2和n为2。5、权利要求2的化合物，其中R1为甲基、R2和R3为氢、X为CH或N，且L为被独立地选自卤素或三氟甲基的1、2或3个取代基取代的Ar-哌啶基或苯基。6、权利要求2的化合物，其中R1为氢或二(C1-6烷基)氨基、R2和R3为氢，且m为2和n为2。7、权利要求1的化合物，其中化合物为3-〔4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基〕06-(3-甲基-1、2、4-噻二唑-5-基)哒嗪3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕哒嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌啶基〕哒嗪，3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-1-哌啶基〕哒嗪，3-(1,2,4-噻二唑-5-基)-6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕哒嗪，1-〔6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3-哒嗪基〕-N-〔3-(三氟甲基)苯基〕-4-哌啶胺，和N,N-二甲基-5-〔6-〔4-〔3-(三氟甲基)苯基〕-1-哌嗪基〕-3-哒嗪基〕-1,2,4-噻二唑-3-胺，及其立体异构体形式、可药用酸加成盐或其N-氧化物。8、一种组合物，它含有可药用载体和作为活性组分的治疗有效量的权利要求1-7任一的化合物。9、一种制备权利要求8的药物组合物的方法，其中紧密混合可药用载体和权利要求1-7的化合物。10、权利要求1-7的任一化合物用作药物的用途。11、制备权利要求1的化合物的方法，其特征在于a)在反应惰性溶剂中，优选在合适的碱存在下，用式(Ⅲ)的胺使式(Ⅱ)哒嗪N-烷基化，其中R1、R2和R3、X、L、m和n定义同权利要求1,W为合适的离去基团；b)在反应惰性溶剂中，优选在合适的碱存在下，用式(Ⅴ)的中间体使式(Ⅳ)哒嗪胺N-烷基化，其中R1、R2、R3、m和n、L3定义同权利要求1,W为合适的离去基团；c)在还原剂存在下，且也可存在合适的催化剂，用代表式H-L3衍生物的式(Ⅵ)酮或醛还原性地使式(Ⅳ)中间体N-烷基化，H-L3中两成双氢原子被氧原子置换并且L3定义同权利要求1；d)在反应惰性溶剂中，式(Ⅶ)哒嗪胺与式(Ⅷ)酚缩合，其中R1、R2、R3、X、Alk、m和n、Ar定义同权利要求1；e)在反应惰性溶剂中，并优选存在合适的碱，用式(Ⅷ)酚使式(Ⅸ)哒嗪胺衍生物O-烷基化，其中R1、R2、R3、X、Alk、m和n定义同权利要求1，且W为合适的离去基团；f)式(X)的酮其中R1、R2、R3、m和n定义同权利要求1与式(Ⅺ)的内鎓盐反应其中R6和R7为芳基或C1-6烷基，或R6为烷氧基且R7为O-，且(R6)2R7P=L3’，表示式H-L3的衍生物，其中两成双氢原子被(R6)2R7P=取代，然后在合适的还原剂存在下，在反应惰性溶剂中还原所获得的中间体(Ⅻ)得到下式化合物或者，使式(Ⅰ)化合物进行相互转化；并且，如果需要，通过用酸处理将式(Ⅰ)化合物转化为治疗活性的无毒的酸加成盐，或者相反地，通过用碱处理将酸加成盐的形式转化为游离碱；并且，如果需要，制备其立体化学异构体形式或其N-氧化物形式。全文摘要本发明涉及下式化合物、其N－氧化物形式、可药用酸加成盐及其立体化学异构体形式,其中X为CH或N;m为2或3并且n为1、2或3;式(a)部分CH2基团的1或2C原子也可含有一个双键,可被下列基团取代:C1－6烷基、氨基、氨基羰基、一或二(C1－6烷基)氨基、C1－6烷氧基羰基、C1－6烷基羰基氨基、羟基或C1－6烷基氧基;和/或所述CH2基团的2C原子可与C2－4亚烷基桥接;R1为氢、C1－6烷基、C1－6烷氧基、C1－6烷硫基、氨基、一或二(C1－6烷基)氨基、Ar、ArNH－、C3－6环烷基、羟基甲基或苄基氧基甲基;R2和R3为氢,或连接在一起形成式－CH=CH－CH=CH－的二价基团;X为CH时,L为基团L1、L2或L3;或X为N时,L为基团L2或L3;L1为Ar－C1－6烷氧基、Ar－氧基、Ar－硫基、Ar－羰基氨基、二－Ar－甲基氧基、N－Ar－哌嗪基、N－Ar－高哌嗪基、2－苯并咪唑啉酮基、Ar－NR4、Ar－Alk－NR4－、Ar－NR4－Alk－NR5－或Het－NR4－;L2为Ar、Ar－羰基、Ar－CH=CH－CH2－、萘基或Het;L3为由一个或两个选自Ar、Ar－氧基或Ar－硫基的基团取代的C1－6烷基,还可以被下列基团取代或不取代:氰基或羟基;2,2－二甲基－1,2,3,4－四氢—萘基;2,2－二甲基－1H－2,3－二氢茚基;Ar－哌啶基或Ar－NR4－Alk－;R4和R5分别独立地选自氢或C1－6烷基;Alk为C1－6亚烷基。还涉及其制备方法、含有它们的组合物以及作为药物的用途。文档编号A61K31/50GK1208415SQ9719170公开日1999年2月17日申请日期1997年1月14日优先权日1996年1月15日发明者R·A·斯托克布罗伊克斯,M·J·M·范德阿,M·维勒姆斯,L·梅波伊尔,M·G·M·卢伊克斯,R·W·图曼申请人:詹森药业有限公司