专利名称：包含冷冻干燥的蛋白组合物、给药体积小于0.5ml的单剂量注射器的制作方法
技术领域：
本发明涉及单剂量注射器，其中包含装有冷冻干燥组合物的第一个隔室，和装有注射体积小于0．5ml的再配制水溶液的第二个隔室，所述组合物包含小于1．4mg的蛋白质、氨基酸和稳定剂，其中蛋白与氨基酸对稳定剂的重量比小于1．5，并且在第一个隔室中，干燥成分的重量与结块体积之比大于12mg／ml。
当制备装有一定治疗量蛋白质的注射器时，重要标准是-在再配制前，粉末具有可接受的稳定性。制剂的质量至少应当与市售冷冻干燥产品一样好。干燥产品应当能在隔室温保存，至少应当保存一定时间。-当用于患者时，没有任何疼痛，例如通过使用等渗溶液和小量注射体积来防止疼痛。-具有可接受的再配制时间。US4968299描述了制备易于降解的物质的注射液的装置，该装置的商品名为KabiPen。由于有了KabiPen，患者获得了相当易于操作的装置。该装置包含双-隔室安瓿Genomix，其中一个隔室包含作为冷冻干燥粉末的hGH(人生长激素)，另一个隔室包含再配制溶液。患者在使用前再配制该产品。当在2-8℃贮存时，该再配制产品能稳定地保存3周。该装置是多剂量注射器。
在市场上也有用于生长激素的单剂量装置，KabiQuick，其注射体积为0．5ml或0．5ml以上。
在专利申请WO 89／09614中，Genentech公开了一种稳定的hGh制剂，其中包含甘油、甘露糖醇和缓冲剂，在优选实施方案中，还加入了非离子表面活性剂例如吐温80。磷酸钠被建议用作缓冲剂。在冷冻干燥制剂中和再配制时，制剂的稳定性增加了。组分的最终比例是用凝胶过滤柱通过缓冲交换获得的。
没有提及对患者的注射体积，也没有提及该蛋白的量。
在专利申请WO 91／18621(GENENTECH)中，甘露糖醇被提及用作稳定GH和IGF的载体。
专利申请WO 94／03198(GENENTECH)公开了一种含水制剂，其中含有GH、缓冲剂、表面活性剂和甘露糖醇。
人们需要具有下述特征的单剂量注射器注射体积小于0．5ml，每剂中含少量蛋白，可通过冷冻干燥制得而没有制备问题。
我们注意到，当制备出含少量蛋白并且注射体积很小的单剂量注射器时，在把第一个隔室中的溶液冷冻干燥时会产生问题。
冷冻干燥结块的基层是非粘附的，并且令人惊奇地产生散裂作用。结块在隔室中破裂，因此蛋白将丢失。这不能令人接受，不仅出于制备原因，而且当制备包含昂贵蛋白的药物时还出于成本原因。因此必须找到解决该问题的方法。
当制备KabiQuick或其它冷冻干燥蛋白产品时，不会发生这种问题。我们注意到这些产品都具有高含量蛋白和氨基酸。现在对于每剂量中含有少量蛋白所产生的问题可通过本发明来解决。
发明详述我们已经发现，制备具有低含量蛋白和小注射体积的所需单剂量注射器的一种可能方法是，采用如权利要求所述的生长激素的量、干燥组分含量、和蛋白含量与其它组分的比例。
本发明因此涉及单剂量注射器，其中包含装有冷冻干燥组合物的第一个隔室，和装有注射体积小于0．5ml的再配制水溶液的第二个隔室，所述组合物包含小于1．4mg的蛋白质、氨基酸和稳定剂，其中蛋白与氨基酸对稳定剂的重量比小于1．5，并且在第一个隔室中，干燥成分的重量与结块体积之比大于12mg／ml。
本发明具有新组合物的新装置可简单地制得，并且具有良好的贮存稳定性。
蛋白和氨基酸对稳定剂的比例优选等于或小于1．3。再配制水溶液的体积优选小于0．3ml。该溶液可含有防腐剂和缓冲剂。
稳定剂是指膨胀剂、基层构建剂和／或结块形成剂例如甘露糖醇，但不是氨基酸，优选使用的氨基酸是甘氨酸，但是也可以使用其它氨基酸例如丙氨酸。
等渗剂是指使注射液达到适当渗透压的物质。
蛋白优选为重组或天然生长激素，即可以是人也可以是动物生长激素例如人生长激素(hGH)、牛生长激素(bGH)和猪生长激素(pGH)。
HGH是由具有191个氨基酸的单链构成的蛋白。该分子是通过两个二硫桥交联的，并且单体形式的分子量是22kDa。
有两类市售的治疗用重组hGH制剂真正的重组hGH制剂，例如Genotropin，Pharmacia & Upjohn AB，和在N-末端有附加蛋氨酸残基的类似物，例如Somatonorm。
hGH在患有垂体机能减退性侏儒症或特纳综合征的病人中被用于刺激线性生长，但是也提出了其它适应征。
在下述实施例中，使用重组制得的hGH(GH)。
用于填充的hGH溶液是由本体溶液纯化过程中最后的凝胶过滤步骤获得的。加入缓冲剂以调节最终的赋形剂浓度，之后用缓冲剂将溶液稀释至适当蛋白浓度。
结块体积是指冷冻干燥前的调剂体积。所用溶剂是水。
实施例F、I和K是依据本发明的。
制剂A和B导致散裂。
为了避免散裂问题，通过加入甘露糖醇来增加重量／结块调节比例，见下表。
然而，仍然存在散裂问题。制剂C、D和E都导致散裂。通过降低结块体积来增加重量／结块体积比例。
结果是，体积越小，结块外观就越好。结论是，对于小量生长激素，必须通过降低填充体积来增加重量／结块体积比例。通过增加甘露糖醇的量来增加重量／结块体积比例不成功。
在下两个实验中证实了这些结果，见下表。
结论实验证实了通过降低结块体积来增加重量／结块体积比例的观察。体积越小，结块外观就越好。因此，对于小量生长激素，必须通过降低填充体积来增加重量／结块体积比例。通过增加甘露糖醇的量来增加重量／结决体积比例不成功。
其中蛋白和氨基酸对稳定剂的比例小于1．5的制剂是有效的。
权利要求
1．单剂量注射器，其中包含ⅰ)装有冷冻干燥组合物的第一个隔室，所述组合物包含小于1．4mg的蛋白质、氨基酸和稳定剂，其中蛋白与氨基酸对稳定剂的重量比小于1．5，并且干燥成分的重量与结块体积之比大于12mg／ml；ⅱ)装有注射体积小于0．5ml的再配制水溶液的第二个隔室。
2．权利要求1的注射器，其中在第一个隔室中的干燥成分的重量与结块体积之比大于15mg／ml。
3．权利要求1或2的注射器，其中所述蛋白质是生长激素，优选为人生长激素。
4．权利要求1-3中任一项的注射器，其中所述氨基酸是甘氨酸。
5．权利要求1-4中任一项的注射器，其中所述稳定剂是甘露糖醇。
6．权利要求1-5中任一项的注射器，其中第一个隔室包含缓冲剂，例如磷酸钠。
7．权利要求1-6中任一项的注射器，其中第二个隔室包含等渗剂。
8．权利要求1-7中任一项的注射器，其中第一个隔室包含甘露糖醇和缓冲剂如磷酸钠。
全文摘要
本发明涉及单剂量注射器,其中包含装有冷冻干燥组合物的第一个隔室,和装有注射体积小于0.5ml的再配制水溶液的第二个隔室,所述组合物包含小于1.4mg的蛋白质、氨基酸和稳定剂,其中蛋白与氨基酸对稳定剂的重量比小于1.5,并且在第一个隔室中,干燥成分的重量与结块体积之比大于12mg/ml。
文档编号A61M5/19GK1280511SQ9881159
公开日2001年1月17日 申请日期1998年11月19日 优先权日1997年11月28日
发明者K·里姆莱尔, E·弗洛林－罗伯森, E·霍克比, U·尼尔森, A·斯特罗姆 申请人:法玛西雅和厄普约翰公司