一种壳聚糖-铂(iv)前体药物偶联物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于高分子药物技术领域，具体涉及一种壳聚糖-铂（IV)前体药物偶联物 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 癌症是威胁人类生命与健康的重大疾病，当前，癌症患者的主要治疗方法是手术、 放疗和化疗，化疗是一种重要的治疗方法，在各种化疗药物中，铂类抗癌药物占有非常重要 的地位，每年的使用量约占一半以上，而临床用量相对较多的铂类抗癌药物是顺铂。顺铂， 铂（II)配合物，是一种非细胞周期特异性的抗癌药物，能与DNA结合形成加合物，破坏DNA 复制功能，导致细胞的凋亡。并且具有较强的广谱抗癌作用，可与其它多种抗肿瘤药协同作 用，被广泛用于如卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、恶性淋巴瘤、乳腺癌等 实体肿瘤治疗。但是，顺铂的水溶性较低，消化道反应严重，并有骨髓抑制、听神经毒性及对 肾脏的损伤等副作用和抗药性问题，严重限制了它的临床应用。为了克服铂（II)抗癌药 的这些缺点，科学家们努力寻求结构新颖的具有抗癌活性的铂类配合物，而具有八面体构 型的铂（IV)配合物引起了科学家的重视和青睐，这一构型具有取代动力学惰性，使其反应 活性降低，不易与细胞内的谷胱甘肽，蛋白等生物分子发生取代反应，使其能够完整的到达 癌细胞。而且，Pt(IV)配合物具有较高的亲脂性容易被癌细胞吸收。另外，通过化学修饰， 对Pt(IV)配合物轴向配体进行功能分子的引入，增加 Pt(IV)药物对癌细胞的选择性、改善 Pt(IV)药物的药理学性质，因此，有目的的修饰Pt(IV)配合物的轴向配体，可以达到靶向、 协同增敏等作用。所以，具有抗癌活性的Pt(IV)配合物可以克服传统Pt(II)抗癌药毒副作 用、耐药性等问题，而且具有抗癌活性的Pt (IV)配合物可以口服给药，克服了传统Pt (II) 药物静脉注射给药的不便。
[0003] 传统小分子药物包括金属铂类药物，在体内扩散分布后，容易被代谢清除掉，造 成体内药物浓度波动，以及带来相应的毒副作用。近年来，人们提出高分子-药物偶联物 (polymer-drug conjugate)，能显著改善抗癌药物于体内的药代动力学。由于高分子药物 可以在药物到达靶部位之前保护药物，并能提高药物的理化稳定性，同时一定程度上减小 药物对正常组织的破坏作用而得到了广泛关注。高分子药物偶联物（Polymer conjugate drug)或高分子前体药物（Polymer-prodrug)，即是用高分子作为基本骨架，将小分子药物 通过共价键偶连到高分子上。偶联物或前体药物，到达肿瘤部位后，受到靶部位环境的刺激 后，药物与高分子分离、释放原来活性组分而发挥疗效。
[0004] 壳聚糖是天然存在的生物多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解性。此外，壳 聚糖所带的正电荷对肿瘤细胞表面具有选择性吸附和电中和作用，对制肿瘤细胞具有直接 抑制作用，并可通过活化免疫系统促进人体抗肿瘤作用，从而与抗肿瘤药物发挥协同作用。 壳聚糖-药物偶联物形成的纳米粒子能够粘附于黏膜上皮，增加药物与上皮组织的接触时 间，减少药物清除，从而提高药物的生物利用度。近年来有许多药物，特别是一些抗肿瘤和 抗炎药物，与壳聚糖偶连形成微球，显示出良好的控释作用，尤其是对半衰期短、性质不太 稳定的药物，展现出很好的应用前景。壳聚糖分子中带有许多羟基和氨基活性基团，其中氨 基活性较大，化学改性通常在此位进行。本发明采取壳聚糖为高分子骨架，利用毒性较弱的 Pt(IV)配合物轴向功能基团与壳聚糖氨基的改性基团发生"点击化学"反应，共价键接小 分子Pt (IV)前体药物，该偶联物在血液循环中十分稳定，大大增加药物到达靶部位的可能 性，进入肿瘤细胞内，在还原性物质的作用下（具体机理复杂），Pt(IV)配合物转变为毒性 较强的Pt(II)配合物，发挥杀灭肿瘤细胞作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的一个目的是提供一种壳聚糖-铂（IV)前体药物偶联物。
[0006] 本发明的另一个目的是提供所述偶联物的制备方法。
[0007] 本发明的目的通过以下技术方案来予以实现：
[0008] 提供一种壳聚糖-铂（IV)前体药物偶联物，其结构通式：
[0009]
【主权项】
1. 一种壳聚糖-销（IV)前体药物偶联物，其特征在于其结构通式：
2. 根据权利要求1所述一种壳聚糖-销（IV)前体药物偶联物，其特征在于所述结构通 式中的壳聚糖（C巧的分子量为化?SOOkDa，脱己酷度m = 0. 7?0.90,式中y = 1?5。
3. 权利要求1或2所述一种壳聚糖-销（IV)前体药物偶联物的制备方法，其特征在于 包括W下步骤： (1) 将壳聚糖与4-戊诀酸在组合催化剂MS/EDC作用下，壳聚糖的氨基与诀基酸的駿 基发生酷胺化学反应，得到诀基功能化的壳聚糖； (2) c，C，t-[Pt-(NH3)2Cl2(〇H)2]与叠氮酸酢反应生成叠氮功能化的轴向一个駿基配体 的Pt (IV)配合物； (3) 将步骤（1)得到的诀基功能化的壳聚糖与步骤（2)得到的叠氮功能化的Pt (IV)配 合物，在催化剂化(I)和配体作用下发生"点击化学"反应，生成壳聚糖与Pt (IV)前药偶连 物。
4. 在步骤（1)中，在0. 1M磯酸缓冲溶液（PBS，pH = 3?6)溶液中，采用畑S/EDC组 合催化剂，壳聚糖CS用量为0. 5?3. Og、4-戊诀酸的用量为0. 2?2. Og，室温下揽拌反应 5?24小时。
5. 在步骤（2)中，在二甲基甲酷胺值M巧中，加入C，C，t-[Pt-(NH3)2Cl2(〇H)2]和叠氮 酸酢，它们的摩尔用量为1 : 0.5?1 : 2.0,反应温度为0?50°C，揽拌反应5?24小时。
6. 在步骤（2)中，所述的叠氮酸酢选自2-叠氮己酸酢、3-叠氮丙酸酢、4-叠氮了酸酢、 5-叠氮戊酸酢、6-叠氮己酸酢中的一种。
7. 在步骤（3)中，首先将步骤（1)所得的诀基壳聚糖溶解在0. 1M的PBS (抑=3?6) 中，步骤（2)所得的叠氮功能化的Pt(IV)配合物溶解在DMF中，然后将两种溶液混合、脱 气，在通氮条件下，加入催化剂化(I)和配体，反应温度为0?50°C，避光揽拌反应5?24 小时。
8. 在步骤（3)中，所述催化剂化（I)为化C1、化化、化I中的一种。
9. 在步骤（3)中，所用配体为2,2-联邮時、四甲基己二胺、五甲基-二己基S胺、六甲 基-S己基四胺、二异丙基己胺、S己胺、4-二甲氨基化晚中的一种。
【专利摘要】本发明属于高分子药物技术领域，具体涉及一种壳聚糖-铂(IV)前体药物偶联物及其制备方法。首先将壳聚糖与4-戊炔酸在组合催化剂NHS/EDC作用下发生酰胺化学反应，得到炔基功能化的壳聚糖，然后与叠氮修饰的Pt(IV)配合物发生“点击化学”反应，获得一种壳聚糖-铂(IV)前体药物偶联物。本发明制备方法具有反应条件温和、选择性好、高效、可控，可减少反应不完全导致的药物泄漏。所得的偶联物进入肿瘤细胞后，经细胞内还原性物质作用转变为Pt(II)配合物，从而更好地作用于DNA杀灭肿瘤细胞；同时本发明为制备靶向可控光响应高分子药物偶联物提供了一种简单而有效的途径。
【IPC分类】A61K47-48, A61K31-282, A61P35-00
【公开号】CN104587486
【申请号】CN201410840356
【发明人】张怀红, 孙柏旺, 孙玉, 仓辉, 蔡照胜
【申请人】盐城工学院
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2014年12月20日