一种杀菌组合物及其在制备防治水产养殖疾病药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于水产养殖动物疾病防治技术领域，具体涉及一种杀菌组合物及其在水 产养殖动物疾病防治中的应用，该组合物主要用于水产养殖动物水霉等真菌性疾病及车轮 虫等寄生原生动物疾病的防治。
【背景技术】
[0002] 2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE):中文通用名称为2, 2-二溴-2-硝基乙醇，英文 通用名称为DBNE，CAS登录号为69094-18-4。纯品为无色透明粘稠液体，稍有气味，pH为 3. 5 - 5. 5。是一种防腐杀菌剂，广泛应用于工业循环水、工业冷却水、电力、油田、污水处理 等行业的杀菌灭藻。
[0003] 2-硫氰基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB):是一种有机硫杀生剂，其毒性小，抑菌广 谱，对各种细菌、酵母菌，特别是霉菌很有效。广泛应用于棉花、玉米、大麦、水稻、小麦、高 梁和甜菜等的种子处理及造纸、木材、皮革、涂料等的防霉杀菌，近来，国外将TCMTB用于工 业循环冷却水系统中作杀生剂使用。
[0004] 水霉病：又叫肤霉病、白毛病，是由多种水生真菌引起的一种常见继发性疾病，对 水产动物的种类没有严格的选择，是一种世界性分布且对养殖鱼类危害较大的疾病。
[0005] 车轮虫：属于原生动物门、纤毛亚门、寡膜纤毛纲、缘毛目、壶形科的一属。主要寄 生于我国淡水鱼类。由车轮虫寄生引起的疾病一直是水产养殖中最为常见的疾病，此病主 要在每年4一 7月流行，且流行广、传播快、危害也较深。
[0006] 长期以来，水霉病的防治是鱼类病害防治中最棘手的一个难题，养殖鱼类患了真 菌性疾病很难治愈。过去较为有效的防治药物为孔雀石绿，然而，因孔雀石绿对动物细胞具 有致畸变作用，为此2002年5月中国已将孔雀石绿列入水产养殖（食用动物）禁用药物。 但自孔雀石绿开始禁用以来，水霉病的有效防治药物一直没有较大突破，从而在养殖生产 实践上对该病的防治遇到了极大的困难，这也导致孔雀石绿屡禁不止，给水产食品安全带 来了极大的隐患。因此，无论是从水产养殖病害防治的实际需要，还是从维护公共卫生安全 来说，开发出安全、高效，能够在防治水霉病方面替代"孔雀石绿"的药物是十分迫切的。为 此，我们通过五年的试验研宄，发现由2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)和2-硫氰基甲基硫 代苯并噻唑（TCMTB)的杀菌组合物对水霉菌具有很好的抑制和杀灭作用；同时，在试验过 程中发现该杀菌组合物对水产动物车轮虫等寄生原生动物疾病也有较好的防治效果。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是在于提供一种具有增效作用的杀菌组合物，该组合物由2, 2-二 溴-2-硝基乙醇（DBNE)和2-硫氰基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB)为主要成分，该组合物具有 提高药效、减少污染、降低成本的效果，能有效解决困扰多年水霉病难以有效防控的问题。
[0008] 本发明的另一个目的在于提供一种杀菌组合物在制备水产养殖动物疾病防治药 物中的应用，该组合物主要用于水产养殖动物水霉等真菌性疾病及车轮虫等寄生原生动物 疾病的防治。为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：
[0009] -种杀菌组合物，其主效成分为2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰基甲基 硫代苯并噻唑（TCMTB)按照重量份20 : 1?1 : 8配制而成。
[0010] 以上方案中，优选方案为2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰基甲基硫代苯 并噻唑（TCMTB)的重量份配比为10 :1?1 :1。
[0011] 以上方案中，主效成分2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰基甲基硫代苯并 噻唑（TCMTB)的最佳重量份配比为4 :1。
[0012] 以上方案中，所述的组合物为：
[0013] 组分 重量份 DBNE 20 TCMTB 5 二乙二醇单甲醚 20 OP-IO 6 无水乙醇 49。
[0014] 利用以上所述的组合物，配以本领域内技术人员公知的助剂，以本领域内技术人 员公知的方法，即可制成本发明所述的防治水产养殖动物疾病的药物，该药物剂型可制备 为乳油或可湿性粉剂，或其他水产药物领域的常规剂型。
[0015] 本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：
[0016] ①杀菌作用强，对水产养殖动物真菌性病害有很好的防治效果；同时，还可防治养 殖动物细菌性疾病及由寄生原生动物引起的疾病；
[0017] ②两种成分无明显的交互抗性，复配制剂具有明显的增效作用，有效降低了使用 成本；
[0018] ③毒副作用小，对环境友好，对养殖动物安全。
【具体实施方式】
[0019] 以下通过具体实施例进一步详细说明本发明，但本发明绝非仅仅限于以下这些实 施例。本发明实施例所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案。所述试剂或方 案，如未特别说明，均来源于商业渠道。配方中的配比如无特别说明均为重量份。
[0020] 实施例1 :
[0021] 为确定2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB) 两种有效成分复配的增效作用，申请人首先使用这两种成分进行了室内生测试验，试验方 法以及结果如下：
[0022] 1、本发明实施例采用的水霉为常规水霉菌，按照本领域的常规方式进行培养。
[0023] 2、试验方法：
[0024] 2. 1试验浓度设计：先对不同杀菌剂进行预试，预试浓度设计参考该杀菌剂有关 杀菌效力资料，然后按等10倍关系稀释成不同浓度梯度，根据预试结果然后从各药剂对病 菌菌丝生长抑制率达10%?90%范围内设计5个浓度梯度，进行精确试验。
[0025] 2. 2抑菌试验方法：采用菌丝生长速率法测定药剂对水霉菌丝生长的抑制作用。
[0026] 先对各药剂母液用定量无菌水稀释至10倍于各试验浓度，然后与PDA培养基按 1+9比例加入到已冷至50°C?60°C的PDA培养基中，充分搅匀，倒皿，制成含不同浓度药剂 的含药培养皿，每质量浓度3皿；同时，以加入等体积无菌水的PDA平板为对照组；待培养 基凝固后，用灭菌打孔器（?5mm)制取已培养好的菌饼，菌丝面朝下，接种于含药培养基中 央，置于25°C恒温培养箱内培养72h后，用十字交叉法测量供试病菌在含不同药剂浓度的 培养基上菌落直径与对照比较，计算各药剂处理对菌落扩展的生长抑制率，并以质量浓度 的对数值X及平均抑菌率的机率值（y)求毒力回归方程，计算相关系数（r)、中浓度EC 5(i。
[0027] 抑菌率％ =[(对照菌落直径-菌碟直径）-(处理菌落直径-菌碟直径）]X 100/ (对照菌落直径-菌碟直径）
[0028] 2. 3混配制剂共毒系数的计算
[0029] 混配制剂的联合毒力采用孙云沛的共毒系数方法表示。
[0030] 根据上述方法测出各单剂及混剂对水霉菌菌丝的EC5tl，并按照下述公式计算毒力 指数，将A的毒力指数（TIa)设为100,然后按下述公式分别求出B的毒力指数（TIb)、混剂 的实际毒力指数（ATI)和理论毒力指数（TTI)，再计算共毒系数（CTC)。
[0031] B 的毒力指数（TIb) = A 的 EC5Q/B 的 EC5tlX 100
[0032] 混配制剂的实测毒力指数ATI =标准药剂A的EC5tl/供试药剂EC5tlX 100
[0033] 混配制剂的理论毒力指数TTI = Σ (某药的毒力指数ATIX在混剂中该药有效成 分的百分率）。
[0034] 混配制剂的共毒系数CTC =混配制剂实际毒力指数ATI/混配制剂的理论毒力指 数 TTIX100
[0035] 共毒系数CTC大于120时为增效作用，小于80时为拮抗作用，介于80?120之间 时为加和作用。
[0036] 室内生测试验数据见下表：
[0037] 表12, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)、2-硫氰基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB)及不同 配比对水霉菌丝抑制作用共毒系数的测定结果
[0038]
【主权项】
1. 一种杀菌组合物，该组合物的主效成分为2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)和2-硫 氰基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB)。
2. 根据权利要求1所述的组合物，所述的2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰 基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB)的重量份配比为20 : 1?1 : 8。
3. 根据权利要求1所述的组合物，所述的2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰 基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB)的重量份配比为10 :1?1 :1。
4. 根据权利要求1所述的组合物，所述的2, 2-二溴-2-硝基乙醇（DBNE)与2-硫氰 基甲基硫代苯并噻唑（TCMTB)的重量份配比为4:1。
5. 根据权利要求1所述的组合物，该组合物为： 组分 重量份 DBNE 20 TCMTB 5 二乙二醇单甲醚 20 OP-IO 6 无水乙醇 49。
6. 权利要求1或2或3或4所述的组合物在制备防治水产养殖疾病药物中的应用。
7. 权利要求1或2或3或4所述的组合物在制备防治水霉真菌性疾病药物中的应用。
8. 权利要求1或2或3或4所述的组合物在制备防治车轮虫寄生原生动物疾病药物中 的应用。
9. 权利要求1或2或3或4所述的组合物在制备同时防治水霉真菌性疾病和车轮虫寄 生原生动物疾病药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种杀菌组合物及其在制备防治水产养殖疾病药物中的应用，本发明的杀菌组合物的主效成分为2,2-二溴-2-硝基乙醇(DBNE)和2-硫氰基甲基硫代苯并噻唑(TCMTB)。该组合物主效成分的重量份配比为4:1时，可取得最大效果。该组合物杀菌作用强，对水产养殖动物真菌性病害有很好的防治效果；同时，还可防治养殖动物细菌性疾病及由寄生原生动物引起的疾病；两种主效成分无明显的交互抗性，复配制剂具有明显的增效作用，有效降低了使用成本；毒副作用小，对环境友好，对养殖动物安全。
【IPC分类】A61K31-045, A61P31-04, A61P31-10, A61P33-02, A61K31-42
【公开号】CN104606188
【申请号】CN201510063084
【发明人】喻运珍, 艾桃山, 高祥林, 邓平, 张生元, 郑程鹏, 周伟东, 张立强, 李波
【申请人】武汉中博水产生物技术有限公司
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年2月6日