脑脊液采集方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物领域，特别是涉及脑脊液的采集方法。
【背景技术】
[0002]脑脊液采集或鞘内注射是临床上常用的操作技术，但目前科研中食蟹猴脑脊液采集或鞘内注射一般通过蛛网硬膜下腔插管的手术方法进行，该方法技术难度大，对技术人员和材料的要求都比较高，术后动物维护难，很多设施无法达到要求的条件。同时，研究表明，椎管内置管会对实验结果造成一定的影响。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种脑脊液采集方法，它操作简单，成本低。
[0004]为解决上述技术问题，本发明的脑脊液采集方法，步骤包括:
[0005]1)动物麻醉；
[0006]2)对动物背部腰椎区域进行剃毛和消毒；
[0007]3)在动物穿刺部位覆以创巾；
[0008]4)在动物背部腰椎区域进行穿刺；
[0009]5)当针头刺穿动物的蛛网膜下腔，出现落空感时，停止进针；
[0010]6)连上注射器，采集动物脑脊液；
[0011]7)操作结束，拔出针头，用干棉球按压穿刺部位，将动物放回笼内，监视至麻醉清醒并行动正常。
[0012]上述步骤1)，麻醉前，动物宜禁食6h以上。
[0013]上述步骤1)，根据动物的体重，较佳的麻醉剂量为10-15mg/kg氯胺酮或4.4mg/kg舒泰50。
[0014]上述步骤2)，在对动物剃毛和消毒后，将动物侧卧，背部脊柱与操作台面边缘平行，腰椎区域向外弯曲。
[0015]较佳的，在上述步骤3)和4)之间，还可以包括如下步骤:在动物腰骶部肌肉注射0.5-1.0mL利多卡因。
[0016]上述步骤4)，选择L4-L7椎间隙进行穿刺较佳，穿刺时注射器针头沿前一腰椎前缘棘突垂直刺入。
[0017]本发明采用腰椎穿刺的方法采集食蟹猴脑脊液，相比现有采集方法，具有以下优点和有益效果:
[0018]1.操作简单，不需要对动物进行手术，因此不需要特殊的设备或材料，也不需要特殊的操作场地，如手术室等；
[0019]2.由于没有对动物进行手术，因此没有动物术后恢复时间，从而可以大幅节约研发时间；
[0020]3.对动物创伤小，可以多次重复采集。
【具体实施方式】
[0021]为对本发明的技术内容、特点与功效有更具体的了解，现结合具体实施例，详述如下:
[0022]实施例1
[0023]本实施例的脑脊液采集方法，采集的对象是重3_5kg的食蟹猴(由海南金港生物技术股份有限公司提供)的脑脊液。
[0024]需要的实验材料有:麻醉药(氯胺酮或舒泰50，利多卡因)、碘伏、75%酒精棉球、干棉球、无菌手套、无菌纱布、1.0mL?2.0mL的注射器、22G注射器针头等。
[0025]食蟹猴脑脊液采集的操作步骤为:
[0026]步骤1，食蟹猴按10-15mg/kg氯胺酮(IM)或4.4mg/kg舒泰50 (SC)麻醉。操作过程中注意监控动物麻醉状态。麻醉前动物应禁食至少6h，以避免操作过程中食物返流造成窒息死亡。
[0027]步骤2，按照无菌手术要求，对动物背部腰椎区域进行剃毛，用碘伏和75%酒精棉球消毒。
[0028]步骤3，动物取左侧卧姿势，背部脊柱与操作台面边缘平行，腰椎区域向外尽量弯曲以充分暴露穿刺部位，使椎间距扩大。
[0029]步骤4，在动物穿刺部位覆以创巾。
[0030]步骤5，穿刺前可在腰骶部肌肉注射0.5-1.0mL利多卡因。
[0031]步骤6，选择L4-L7椎间隙进行穿刺。穿刺时，将22G注射器针头沿前一腰椎前缘棘突垂直刺入，并缓慢前进。
[0032]步骤7，当针头出现落空感时(针头刺穿蛛网膜下腔时，会有明显的落空感)，停止进针，如果有清亮的脑脊液从针头流出，证明穿刺成功。如果未见脑脊液流出，可轻轻旋转针头或调整角度。
[0033]步骤8，连上注射器，进行脑脊液采集或行鞘内注射给药。
[0034]步骤9，操作结束后，迅速拔出针头，并用干棉球按压。
[0035]步骤10，将动物放回笼内，并密切监视，直至麻醉清醒并行动正常。
【主权项】
1.脑脊液采集方法，其特征在于，步骤包括: 1)动物麻醉； 2)对动物背部腰椎区域进行剃毛和消毒； 3)在动物穿刺部位覆以创巾； 4)在动物背部腰椎区域进行穿刺； 5)当针头刺穿动物的蛛网膜下腔，出现落空感时，停止进针； 6)连上注射器，采集动物脑脊液； 7)操作结束，拔出针头，用干棉球按压穿刺部位，将动物放回笼内，监视至麻醉清醒并行动正常。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)，麻醉前，动物禁食6h以上。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)，根据动物体重，麻醉剂量为10-15mg/kg 氯胺酮或 4.4mg/kg 舒泰 50。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)，剃毛和消毒后，将动物侧卧，背部脊柱与操作台面边缘平行，腰椎区域向外弯曲。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)和4)之间，还包括步骤:在动物腰骶部肌肉注射0.5-1.0mL利多卡因。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)，选择L4-L7椎间隙进行穿刺。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤4)，穿刺时，注射器针头沿前一腰椎前缘棘突垂直刺入。
【专利摘要】本发明公开了一种脑脊液采集方法，步骤包括：1)动物麻醉；2)对动物背部腰椎区域进行剃毛和消毒；3)在动物穿刺部位覆以创巾；4)在动物背部腰椎区域进行穿刺；5)当针头刺穿动物的蛛网膜下腔，出现落空感时，停止进针；6)连上注射器，采集动物脑脊液；7)操作结束，拔出针头，用干棉球按压穿刺部位，将动物放回笼内，监视至麻醉清醒并行动正常。本发明通过腰椎穿刺的方法采集动物脑脊液，不仅对动物创伤小，而且操作简单快捷，对设备、材料、场地要求低。
【IPC分类】A61D7/00, A61B10/00
【公开号】CN105342645
【申请号】CN201510932612
【发明人】薛彬, 金毅, 周聪颖, 王福强, 张伟军, 胡璇, 毕玲玲, 谢瑞东, 王新峰, 赵莹
【申请人】苏州药明康德新药开发股份有限公司, 无锡药明康德生物技术股份有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年12月15日