包含蓝铜胜肽的活性组合物及化妆品或护肤品的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种包含蓝铜胜肽的活性组合物及化妆品或护肤品。所述包含蓝铜胜肽的活性组合物包括如下重量百分比的各组分：0.001?2％蓝铜胜肽、1?5％维生素E、0.1?10％甲壳素低聚糖、0.1?2％4?MSK、0.1?5％海藻多糖、6?30％乳化剂、0?10％助乳化剂、0.1?0.8％稳定剂和0?10％赋形剂，余量为水。本发明的活性组合物及化妆品或护肤品具有促进细胞增殖以及显著的补水保湿和抗衰老等功效。
【专利说明】
包含蓝铜胜肽的活性组合物及化妆品或护肤品
技术领域
[0001] 本发明属于化妆品领域，具体涉及一种包含蓝铜胜肽的活性组合物及化妆品或护 肤品。
【背景技术】
[0002] 衰老是机体各组织、器官功能随年龄增长而发生的退行性变化，是机体各种生化 反应的综合表现，是体内外环境污染、精神紧张等多种因素共同作用的结果。衰老是生命过 程的必然规律，是不可避免的，但延缓衰老却是可能的。
[0003] 随着人们生活水平的提高，人们在满足基本的衣食住行需求后也开始关注其他方 面尤其是形体、容貌的美观等方面的需求，其中让皮肤保持年轻更是许多人梦寐以求的事。 在科学技术不断发展的今天，实现的可能性也在提高，抗衰老化妆品也越来越受到人们的 关注。
[0004] 目前市场上的抗衰老化妆品琳琅满目、良莠不齐，因此往往存在许多问题。例如， 有些产品因含有如维生素C等不稳定物质，不易长时间存放，若未及时更换，容易产生过敏； 又例如，有些产品因含有可令皮肤变薄、伤及组织，令皮肤变红，造成化学灼伤等副作用的 果酸类物质而不能长期使用等。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明的目的是提供一种包含蓝铜胜肽的活性组合物及化妆品或护肤 品。本发明的活性组合物及化妆品或护肤品具有促进细胞增殖以及显著的补水保湿和抗衰 老等功效。
[0006] 为实现上述目的，本发明的第一方面提供一种包含蓝铜胜肽的活性组合物，其包 括如下重量百分比的各组分:0.001-2%蓝铜胜肽、1-5%维生素E、0.1-10%甲壳素低聚糖、 0.1-2%4-]\^1((4-甲氧基水杨酸钾）、0.1-5%海藻多糖、6-30%乳化剂、0-10%助乳化剂、 0.1-0.8 %稳定剂和0-10 %赋形剂，余量为水。
[0007] 优选地，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物，其包括如下重量百分比的各组分:0.5-1.5%蓝铜胜肽、2-4%维生素E、1-3%甲壳素低聚糖、0.5-1.5%4-MSK、1-3%海藻多糖、8-12 %乳化剂、1 -2.5 %助乳化剂、0.3-0.5 %稳定剂和5-7 %赋形剂，余量为水。
[0008] 优选地，所述乳化剂为十八烷酸和/或单硬脂酸甘油酯。
[0009] 优选地，所述助乳化剂为甘油。
[0010] 优选地，所述稳定剂为卵磷脂或大豆卵磷脂。
[0011]优选地，所述赋形剂为甘露糖和/或乳糖。
[0012] 本发明的第二方面提供一种前述包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾 干燥产物。
[0013] 本发明的第三方面提供一种前述包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾 干燥产物的制备方法，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物包括如下重量百分比的各组分： 0·001-2%蓝铜胜肽、l-5%维生素E、0·l-10%甲壳素低聚糖、0·l-2%4-MSK、0·l-5%海藻 多糖、6-30 %乳化剂、0-10 %助乳化剂、0.1-0.8 %稳定剂和0-10 %赋形剂，余量为水；
[0014]所述制备方法包括如下步骤：
[0015] (1)将维生素E、乳化剂、助乳化剂和稳定剂混合均匀后加热至完全溶解，得到油 相;将蓝铜胜肽、甲壳素低聚糖、4-MSK和海藻多糖混合后溶于水，得到水相；
[0016] (2)在搅拌条件下将水相滴加到油相中，得到乳液混合物；
[0017] (3)将所得乳液混合物经过均质处理，得到直径为100-300nm的亚微乳；
[0018] (4)向所得亚微乳中加入赋形剂，冷冻干燥或喷雾干燥制得冻干乳剂或喷雾干燥 产物。
[0019] 优选地，步骤（1)中所述混合均匀后加热是将脂溶性组分加热到60~80°C，更优选 在完全溶解后还将体系冷却到30~40°C，并以10000-18000r/min的搅拌速率将体系搅拌均 匀，形成油相。
[0020] 优选地，步骤(2)中所述搅拌的搅拌速率为15000-20000r/min。
[0021] 优选地，步骤(3)中所述均质处理是通过高压微射流均质机进行。
[0022] 优选地，步骤（4)中所述冷冻干燥的条件为：在冻干机中依次经_20°C预冻 120min、-80°C预冻30min、-55°C真空冷冻至干燥，得到冻干乳剂。
[0023]优选地，步骤(4)中所述喷雾干燥的条件为：在加料速率为2-5ml/min、喷嘴口径 0.5-1_条件下进行喷雾干燥，得到喷雾干燥产物。
[0024] 本发明的第四方面提供一种化妆品或护肤品，所述化妆品或护肤品包括前述包含 蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾干燥产物。
[0025] 优选地，所述化妆品或护肤品的制剂类型为水剂、霜剂、乳剂、凝胶剂或成膜剂。
[0026] 优选地，所述化妆品或护肤品中，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或 喷雾干燥产物的含量为〇. l_3〇wt%，更优选10-20wt%。
[0027] 优选地，所述化妆品或护肤品还包括醇类、油剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或 多种。
[0028] 优选地，所述醇类选自乙醇、丙三醇和1，3-丁二醇中的一种或多种。
[0029] 优选地，所述油剂选自脂肪酸、高级醇、液体石蜡和硅油中的一种或多种。
[0030] 优选地，所述pH调节剂为柠檬酸-柠檬酸钠或乳酸-乳酸钠。
[0031] 优选地，所述抗氧化剂选自烟酰胺、核黄素和烟酸中的一种或多种。
[0032] 优选地，所述化妆品或护肤品还包括可用于化妆品或护肤品的复配成分，所述复 配成分选自金属硫蛋白、左旋维他命C、甲壳素及其衍生物、壳聚糖、虾青素、水蛭肽、双香豆 素、醋硝香豆素、三七黄酮、三七皂苷和芦荟提取物中的一种或多种。
[0033]优选地，所述复配成分占所述化妆品或护肤品总质量的0.1 %_20%，更优选 0.1%-10%〇
[0034] 本发明取得了下述有益效果：
[0035] 1、本发明包含蓝铜胜肽的活性组合物制成冻干乳剂或喷雾干燥产物，直径为100-300nm，粒子分布均匀、稳定性好，较现有市售产品更易于穿透皮肤，进入细胞内发挥美白保 湿、排毒和抗衰老的作用。本发明的研发人员通过实验证实了本发明的组合物确实具有促 进细胞增殖以及显著的补水保湿和抗衰老的作用，具体表现为刺激胶原蛋白与弹力蛋白形 成、紧实肌肤及减少细纹、恢复肌肤修复能力、清除重金属等功效。
[0036] 2、本发明的组合物包含4-甲氧基水杨酸钾(4-MSK)，可激活肌肤最外层角质层，进 而增强蓝铜胜肽、维生素E等成分的作用功效，提高产品的渗透性。
[0037] 3、本发明的产品利用亚微乳的主动靶向性和被动靶向性特点，更加快速、高效地 把蓝铜胜肽等具有滋润和修复作用的有效成分输送至靶细胞，发挥靶向性效用。
[0038] 4、本发明的冻干乳剂或喷雾干燥产物，其亚微乳结构大大增加了蓝铜胜肽等易被 氧化、水解等成分的稳定性，同时本发明产品的稳定性优于以蓝铜胜肽与维生素E为主要药 效成分的普通剂型如膏霜剂、乳液剂等。
【附图说明】
[0039]图I(A)显示的是蓝铜胜肽的分子式；图I(B)显示的是蓝铜胜肽的分子结构模型。
[0040] 图2(A)-(D)是实施例6中滋润保湿功效评价Visia面部皮肤成像的结果图，其中， 图2(A)为产品使用前，图2(B)为产品使用后；图2(C)为产品使用前，图2(D)为产品使用后。
[0041] 图3是实施例7中受试者使用本发明的产品前后经皮水分流失量的结果对比图，其 中，左右脸颊柱状图自左向右均依次为使用前、使用IOcU使用20d、使用30d和使用40d的数 据。
[0042]图4为实施例7中受试者使用本发明的产品前后皮肤含水量的结果对比图，其中， 左右脸颊和左右眼角柱状图自左向右均依次为使用前、使用l〇d、使用20d、使用30d和使用 40d的数据。
[0043] 图5(A)和(B)是实施例7中美白功效评价Visia面部皮肤成像的结果图，其中，图5 (A)为产品使用前，图5(B)为产品使用后。
【具体实施方式】
[0044] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照 附图，对本发明作进一步的详细说明。
[0045] 本发明第一方面提供一种包含蓝铜胜肽的活性组合物，其包括如下重量百分比的 各组分:0.001-2%蓝铜胜肽、1-5%维生素Ε、0· 1-10%甲壳素低聚糖、0.1-2%4-MSK、0.1-5 %海藻多糖、6-30 %乳化剂、0-10 %助乳化剂、0.1-0.8 %稳定剂和0-10 %赋形剂，余量为 水。
[0046] 其中，胜肽又称多肽或肽，是比蛋白质结构简单、由2-16个氨基酸通过肽键连接的 一类小分子化合物。人体内各种生理进程几乎都是由特定的氨基酸序列组成的多肽或蛋白 质调控的，而肽在生物的生长、发育和代谢中起着重要作用。在皮肤的自然老化和护理过程 中，胜肽起着重要作用，如细胞增殖、炎症、色素形成以及蛋白合成及调控等。随着人们对自 身皮肤微观结构和机理的进一步认识，多种结构的胜肽被引入皮肤护理中进而广泛应用于 化妆品及护肤品。
[0047]所述蓝铜胜肽为现有技术术语，又称铜胜肽，简写为GHK-Cu，其分子式及其结构模 型分别如图I(A)和图I(B)所示，由于其分子中所含的铜离子溶于水中呈蓝色而得名。蓝铜 胜肽被认为是真正意义美容胜肽的始祖，最早发现其对治疗伤口和皮肤损伤非常有效。 1973年美国人Loren Pickart在人体血清中分离得到一种铜键结氨基酸GHK复合物，即GHK- Cu，其是一种由三个氨基酸(Glycyl-Histidyl-Lysine)及一个铜离子(Copper)所组成的复 合物。其后人们发现将GHK-Cu注射到伤口表面不但可以减少疤痕组织生成，还能刺激皮肤 自行愈合。此外，研究发现GHK-Cu可促使神经组织和血管生成、免疫相关细胞的生长、分裂 和分化，促使不同胞外基质组分的表达，进而能有效促进伤口愈合。随着研究的不断深入， 蓝铜胜肽开始逐渐进入人们的视野并应用于化妆品及护肤品中。
[0048]甲壳素和壳聚糖是广泛存在于甲壳动物外壳、昆虫外壳和真菌细胞壁中的一类天 然多糖，优选深海中天然的虾和蟹，是应用遗传基因工程提取的高分子纤维素。由于甲壳素 的"双向强力吸附"的独特材质特性，具有清毒、锁水、修复受损肌肤及过敏肌肤等功效而被 科学届誉为"第六生命要素"，同时也被欧美中日政府认定为机能性免疫物质。
[0049] 所述甲壳素低聚糖(chitooligosaccharidesAOS)是由甲壳素和壳聚糖经水解后 产生的一类低聚合度(η-般在2-20)可溶于水的氨基糖类化合物，是甲壳素低聚物的总称。 COS相对分子质量较小，较之大分子壳聚糖、甲壳素等更易被皮肤吸收，以此制成的膏、霜类 化妆品可通过毛孔等直接渗入皮肤内部，可有效调理肌肤，起美白滋润功效。据研究，相对 分子质量1500~3000的COS具有优良水溶性，其吸湿及保湿能力均高于壳聚糖、乳酸钠、甘 油等，且抑菌效果显著。
[0050] 4-甲氧基水杨酸钾(4-MSK)是与水杨酸结构类似的化合物，研究表明4-MSK具有纠 正角质形成细胞分化失衡的能力，且对于造成皮肤黑色素的生成和释放两方面均具有防御 效果，可有效改善色斑及雀斑的形成，为较为卓越的美白成分之一。
[0051] 本发明的发明人在研发过程中意外地发现:上述几种活性成分按照一定的比例， 通过加入其它辅料制备成多种用于皮肤修复、美白保湿的化妆品制剂，成分明确，除了显著 的抗衰老、美白保湿功效外，还具备祛皱、抗炎、抗氧化、修护、醒肤等多种功效，并且安全无 不良反应，有广阔的市场应用前景。后经研究发现，4-MSK可激活肌肤最外层角质层，进而增 强蓝铜胜肽、维生素E等成分的作用功效，提高产品的渗透性，而亚微乳具有主动靶向性和 被动靶向性的特点，可以更加快速、高效地把蓝铜胜肽等具有滋润和修复作用的有效成分 输送至靶细胞，发挥靶向性效用。
[0052] 优选地，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物，其包括如下重量百分比的各组分:0.5-1.5%蓝铜胜肽、2-4%维生素E、1-3%甲壳素低聚糖、0.5-1.5%4-MSK、1-3%海藻多糖、8-12 %乳化剂、1 -2.5 %助乳化剂、0.3-0.5 %稳定剂和5-7 %赋形剂，余量为水。
[0053]优选地，所述乳化剂为十八烷酸和/或单硬脂酸甘油酯。
[0054]优选地，所述助乳化剂为甘油。
[0055] 优选地，所述稳定剂为卵磷脂或大豆卵磷脂。
[0056] 优选地，所述赋形剂为甘露糖和/或乳糖。
[0057] 本发明的第二方面提供一种前述包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾 干燥产物。
[0058]本发明的第三方面提供一种前述包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾 干燥产物的制备方法，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物包括如下重量百分比的各组分： 0.001-2%蓝铜胜肽、1-5%维生素Ε、0· 1-10%甲壳素低聚糖、0.1-2%4-MSK、0.1-5%海藻 多糖、6-30 %乳化剂、0-10 %助乳化剂、0.1-0.8 %稳定剂和0-10 %赋形剂，余量为水；
[0059]所述制备方法包括如下步骤：
[0060] (1)将维生素E、乳化剂、助乳化剂和稳定剂混合均匀后加热至完全溶解，得到油 相;将蓝铜胜肽、甲壳素低聚糖、4-MSK和海藻多糖混合后溶于水，得到水相；
[0061 ] (2)在搅拌条件下将水相滴加到油相中，得到乳液混合物；
[0062] (3)将所得乳液混合物经过均质处理，得到直径为100-300nm的亚微乳；
[0063] (4)向所得亚微乳中加入赋形剂，冷冻干燥或喷雾干燥制得冻干乳剂或喷雾干燥 产物。
[0064] 其中，当助乳化剂含量和赋形剂含量为0时，在步骤（1)和(4)中相应省去加入助乳 化剂和赋形剂的操作。优选地，步骤(1)中所述混合均匀后加热是将脂溶性组分加热到60~ 80°C，更优选在完全溶解后还将体系冷却到30~40°C，并以10000-18000r/min的搅拌速率 将体系搅拌均匀，形成油相。
[0065] 优选地，步骤(2)中所述搅拌的搅拌速率为15000-20000r/min。
[0066]优选地，步骤(3)中所述均质处理是通过高压微射流均质机进行。
[0067]优选地，步骤（4)中所述冷冻干燥的条件为：在冻干机中依次经_20°C预冻 120min、-80°C预冻30min、-55°C真空冷冻至干燥，得到冻干乳剂。
[0068]优选地，步骤(4)中所述喷雾干燥的条件为：在加料速率为2-5ml/min、喷嘴口径 0.5-1_条件下进行喷雾干燥，得到喷雾干燥产物。
[0069] 本发明的第四方面提供一种化妆品或护肤品，所述化妆品或护肤品包括前述包含 蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾干燥产物。
[0070] 优选地，所述化妆品或护肤品的制剂类型为水剂、霜剂、乳剂、凝胶剂或成膜剂。
[0071] 优选地，所述化妆品或护肤品中，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或 喷雾干燥产物的含量为〇. l_3〇wt%，更优选10-20wt%。
[0072] 优选地，所述化妆品或护肤品还包括醇类、油剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或 多种。
[0073] 优选地，所述醇类选自乙醇、丙三醇和1，3-丁二醇中的一种或多种。
[0074] 优选地，所述油剂选自脂肪酸、高级醇、液体石蜡和硅油中的一种或多种。
[0075] 优选地，所述pH调节剂为柠檬酸-柠檬酸钠或乳酸-乳酸钠。
[0076] 优选地，所述抗氧化剂选自烟酰胺、核黄素和烟酸中的一种或多种。
[0077]优选地，所述化妆品或护肤品还包括可用于化妆品或护肤品的复配成分，所述复 配成分选自金属硫蛋白、左旋维他命C、甲壳素及其衍生物、壳聚糖、虾青素、水蛭肽、双香豆 素、醋硝香豆素、三七黄酮、三七皂苷和芦荟提取物中的一种或多种。
[0078] 优选地，所述复配成分占所述化妆品或护肤品总质量的0.1 %-20%，更优选 0.1%-10%〇
[0079] 下面是具体实施例，在各实施例中如无特别说明，所用的试剂均为市售分析纯级 别的试剂。
[0080] 实施例1 一种包含蓝铜胜肽活性组合物的冻干乳剂制备
[0081 ] 1、各组分的重量百分比如表1所示：
[0082]表1包含蓝铜胜肽活性组合物的冻干乳剂的各组分
L〇〇84」2、冻干乳剂的制备方法：
[0085] (1)将维生素E、甘油、单硬脂酸甘油酯、十八烷酸及卵磷脂等脂溶性成分混合加热 到70°C，完全溶解后冷却到35°C并在搅拌速率为10000-18000r/min条件下形成油相;将蓝 铜胜肽、甲壳素低聚糖、4-MSK和海藻多糖混合后溶于水，得到水相；（2)在15000-20000r/ min搅拌速率下将水相滴加到油相中，得到0/W型乳液混合物；
[0086] (3)将所得乳液混合物通过高压微射流均质机均质处理后，得到直径大小为100- 300nm的亚微乳；
[0087] (4)向所得亚微乳中加入甘露醇，冻干机中于-20°C预冻120min、-80°C预冻30min 后、再经-55 °C真空冷冻干燥，即得冻干乳剂。
[0088]实施例2-种包含蓝铜胜肽活性组合物的喷雾干燥产物制备 [0089] 1、各组分的重量百分比如表2所示：
[0090]表2包含蓝铜胜肽活性组合物的喷雾干燥产物的各组分
[0092] 2、喷雾干燥产物的制备方法：
[0093] (1)将维生素E、甘油、单硬脂酸甘油酯、十八烷酸及卵磷脂等脂溶性成分混合加热 到70°C，完全溶解后冷却到35°C并在搅拌速率为10000-18000r/min条件下形成油相;将蓝 铜胜肽、甲壳素低聚糖、4-MSK和海藻多糖混合后溶于水，得到水相；
[0094] (2)在15000-2000(^/11^11搅拌速率下将水相滴加到油相中，得到0/1型乳液混合 物；
[0095] (3)将所得乳液混合物通过高压微射流均质机均质处理后，得到直径大小为100-300nm的亚微乳；
[0096] (4)将所得亚微乳在加料速率为2-5ml/min、喷嘴口径0.5-lmm条件下进行喷雾干 燥，得到喷雾干燥产物。
[0097]实施例3-种包含蓝铜胜肽活性组合物的化妆水 [0098] 1、各成分的重量百分比如表3所不：
[00"]表3化妆水各成分的重量百分比
[0101] 2、制备方法：按照表3中配方量将表没食子儿茶素没食子酸酯溶于乙醇中制成乙 醇混合溶液;将实施例1所得冻干乳剂或实施例2所得喷雾干燥产物用适量双蒸水溶解后依 次加入山梨糖醇、乳酸、乳酸钠、尼泊金甲酯和甘油，混合均匀后加入上述乙醇混合溶液，搅 拌均匀，补充剩余双蒸水即得。
[0102] 实施例4 一种包含蓝铜胜肽活性组合物的润肤霜
[0103] 1、各成分的重量百分比如表4所不：
[0104]表4润肤霜各成分的重量百分比
[0107] 2、制备方法:按照表4中配方量将棕榈酸异丙酯、十八醇、二氧化钛、蜂胶、氢化聚 异丁烯、尼泊金甲酯和尼泊金乙酯加热至70°C后混合，作为油相;将实施例1所得冻干乳剂 或实施例2所得喷雾干燥产物、烟酰胺和胶原蛋白用适量双蒸水溶解，补充剩余双蒸水混合 均匀后加入油相，搅拌均匀即得。最终润肤霜产品中各成分的重量百分比见表4。
[0108] 实施例5包含蓝铜胜肽的活性组合物对促进人皮肤表皮细胞的增殖作用
[0109] 将处于对数生长期的Hacat细胞(Hacat细胞购自武汉大学中国典型培养物保藏中 心，CCTCC，）用含10 % FBS (FBS购自杭州四季青生物工程材料有限公司）的DMEM培养基(DMEM 培养基购自美国Gibco公司）常规培养至80%-90 %汇合，用0.25%胰酶消化，以I X IO5个/ ml的细胞数目接种于96孔板，培养24h后，换无血清DMEM培养基培养，24h后将培养基吸出后 分别加入浓度为100、50、25、12.5、6.25以 8/1^的实施例1及实施例2所制备的亚微乳，每个浓 度设3个复孔，空白组为六个复孔。给药后放入培养箱继续培养24h，加入10μ1 MTT (0.5mg/ ml)，培养箱中孵育4h后，吸出孔中溶液并加入150μ1 DMSO，振荡后于570nm波长下检测吸光 度OD值。
[0110] 细胞增殖率％ =(给药组OD值/空白对照组OD值-I) X 100%，结果见表5。
[0111] 表5 Hacat细胞增殖率（％ ) (η = 3,5士沒）
[0113] 注:给药组与正常对照组比较有显著性差异p〈0.05。
[0114] 由表5的结果可知，实施例1、2产品在给药浓度为6.25-100yg/mL范围内对Hacat细 胞均有明显增殖作用，且具有一定的浓度依赖性;即随着给药浓度的增加，其细胞增殖率亦 随之增加。
[0115] 实施例6包含蓝铜胜肽活性组合物的冻干乳剂的保湿功效评价
[0116]受试部位测试前2天~3天不能使用任何产品(化妆品或外用药品），Ih~3h不能接 触水。实验前，受试者需要统一用清水清洁脸部。清洁方法为用干的面巾纸擦拭干净。
[0117]受试者脸部测试区域为双侧脸颊(鼻尖和目外眦的交点）及双侧嘴角外2cm处。试 验区域面积至少3cmX3cm，正式测试前应该在符合标准的房间内静坐至少20min，不能喝水 和饮料，保持轻松状态。期间操作者会与受试者就受试者皮肤状况进行交流并填写皮肤评 测表。30min后进行实验前皮肤测试(皮肤水分含量、经皮水分流失量，获得初始基础值），测 试结束后当日按照产品要求均匀涂抹产品，并于涂抹后7、14、28天回访进行相应的皮肤测 试，并进行受试前后比较。
[0118] Visia皮肤成像显示，使用实施例1产品后皮肤脱皮掉肩的情况明显改善，皮肤发 红情况也有所改善，结果见图2(A)-(D)。
[0119] 对受试者使用前后皮肤状况进行分析(见表6)，结果显示使用冻干粉后，随着时间 的推移，肌肤的干燥、脱皮、起肩及红血丝等积分呈下降趋势，症状得到显著改善(P〈〇.01)。 滋润度、光滑度、肌肤柔软度、肌肤紧致度和肌肤透明感均有不同程度的提升，其中以滋润 度最为明显(P〈〇.〇5)。
[0120] 表6皮肤状况评价(η = 33，?±5·￡Μ)
Lm 22」 由图2(A)-U3)和表6的买验结采ρ」知，监锏脏肱烁十粉对十燥性反肤具WM者的 保湿和皮肤屏障功能修复效果，能够显著地提升皮肤的角质水分含量，降低经皮水分流失 量，使皮肤的滋润度、光泽度上升，皮肤水分的提升使得皮肤从而能够摆脱干燥、瘙痒、脱皮 的症状。
[0123] 实施例7包含蓝铜胜肽活性组合物的喷雾干燥产物的抗衰老功效评价
[0124] 符合入组条件的受试者在温度为20°C~22°C、湿度为40%~60%的测试环境中进 行实时动态监测。受试部位测试前2天~3天不能使用任何产品（化妆品或外用药品），Ih~ 3h不能接触水。实验前，受试者统一用清水清洁脸部(清洁方法为用干的面巾纸擦拭干净）， 正式测试前在符合标准的房间（温度:20°C~22°C，湿度:40 %~60 % )内静坐至少20min，不 喝水和饮料。受试者脸部测试区域为实验中面部左右脸颊、嘴角、眼角以及额头等区域。试 验区域面积至少3cmX 3cm〇
[0125] 实验开始先测量面部清洁后30min的空白值，然后按产品要求用量、使用步骤，将 实施例2产品均匀涂布于面部。于使用产品后第10(1、20(1、30(1、40(1回访并用￥1314面部图像 分析仪进行面部拍摄以及检测经皮水分流失量、皮肤弹性等指标。
[0126] 对受试者经皮水分流失量检测发现，随着时间的变化使用产品后皮肤水分流失率 呈现下降趋势，使用后第20、30天测得的总的经皮水分流失量与使用产品前相比具有统计 学意义(p〈〇.05)。经皮水分流失量的下降表明皮肤屏障功能得到一定程度恢复，锁水功能 提升，增强干燥皮肤的保湿效果，具体结果见图3。在图3中，经皮水分流失量单位为g/h/m 2 (11 = 9，^±5)，其中，与使用前相比较邮〈0.05，*吨〈0.01。实验结果表明，使用实施例2产品 前后针对皮肤能够有效提高皮肤的水分含量，具有显著的保湿功能。
[0127] 对受试者皮肤弹性检测发现:其R2值(无负压时皮肤的回弹量与有负压时的最大 拉伸量之比，比值越近于1，说明弹性越好)变化反映在测试周期内，实验区域皮肤弹性随时 间增加，其R2值亦随之增加，具体结果见图4和图5(A)-(B)。在图4中，皮肤含水量单位为U(n =9，^± 5)，其中，与使用前相比较邮〈〇.〇5，*叶〈〇.〇1。实验结果表明，使用实施例2产品前 后皮肤弹性明显增加，本发明的产品具有显著的抗衰老功能。
[0128] 需要说明的是，前述较优的实施方案中是以化妆水和润肤霜为例进行说明的，但 本发明的技术方案适用于所有常规形式的化妆品和护肤品，并不以前面所列举的具体实施 方式为限。
[0129] 另，本发明还进行了其他系列实验，如稳定性测试比较实验，实验结果表明本发明 产品的稳定性优于以蓝铜胜肽与维生素E为主要药效成分的普通剂型如膏霜剂、乳液剂等。
[0130] 以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详 细说明，应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在 本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护 范围之内。
【主权项】
1. 一种包含蓝铜胜肽的活性组合物，其特征在于，包括如下重量百分比的各组分： 0.001-2%蓝铜胜肽、1-5%维生素 Ε、0· 1-10%甲壳素低聚糖、0.1-2%4-MSK、0.1-5%海藻 多糖、6-30 %乳化剂、0-10 %助乳化剂、0.1-0.8 %稳定剂和0-10 %赋形剂，余量为水。2. 根据权利要求1所述的包含蓝铜胜肽的活性组合物，其特征在于，包括如下重量百分 比的各组分:0.5-1.5%蓝铜胜肽、2-4%维生素 E、1-3%甲壳素低聚糖、0.5-1.5%4-MSK、l-3 %海藻多糖、8-12%乳化剂、1-2.5 %助乳化剂、0.3-0.5 %稳定剂和5-7 %赋形剂，余量为 水。3. 根据权利要求1或2所述的包含蓝铜胜肽的活性组合物，其特征在于，所述乳化剂为 十八烷酸和/或单硬脂酸甘油酯;和/或， 所述助乳化剂为甘油;和/或， 所述稳定剂为卵磷脂或大豆卵磷脂;和/或， 所述赋形剂为甘露糖和/或乳糖。4. 根据权利要求1所述的包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾干燥产物。5. -种如权利要求4所述的包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾干燥产物的 制备方法，其特征在于，所述包含蓝铜胜肽的活性组合物包括如下重量百分比的各组分： 0.001-2%蓝铜胜肽、1-5%维生素 Ε、0· 1-10%甲壳素低聚糖、0.1-2%4-MSK、0.1-5%海藻 多糖、6-30 %乳化剂、0-10 %助乳化剂、0.1-0.8 %稳定剂和0-10 %赋形剂，余量为水； 所述制备方法包括如下步骤： (1) 将维生素 E、乳化剂、助乳化剂和稳定剂混合均匀后加热至完全溶解，得到油相;将 蓝铜胜肽、甲壳素低聚糖、4-MSK和海藻多糖混合后溶于水，得到水相； (2) 在搅拌条件下将水相滴加到油相中，得到乳液混合物； (3) 将所得乳液混合物经过均质处理，得到直径为100-300nm的亚微乳； (4) 向所得亚微乳中加入赋形剂，冷冻干燥或喷雾干燥制得冻干乳剂或喷雾干燥产物。6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于， 步骤（1)中所述混合均匀后加热是将脂溶性组分加热到60~80°C，更优选在完全溶解 后还将体系冷却到30~40°C，并以10000_18000r/min的搅拌速率将体系搅拌均匀，形成油 相;和/或， 步骤(2)中所述搅拌的搅拌速率为15000-20000r/min;和/或， 步骤(3)中所述均质处理是通过高压微射流均质机进行;和/或， 步骤(4)中所述冷冻干燥的条件为：在冻干机中依次经-20 °C预冻120min、-80 °C预冻 30min、-55 °C真空冷冻至干燥，得到冻干乳剂； 步骤(4)中所述喷雾干燥的条件为:在加料速率为2-5ml/min、喷嘴口径0.5-lmm条件下 进行喷雾干燥，得到喷雾干燥产物。7. -种化妆品或护肤品，其特征在于，所述化妆品或护肤品包括如权利要求4所述的包 含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾干燥产物。8. 根据权利要求7所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述化妆品或护肤品的制剂类 型为水剂、霜剂、乳剂、凝胶剂或成膜剂。9. 根据权利要求7所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述化妆品或护肤品中，所述 包含蓝铜胜肽的活性组合物的冻干乳剂或喷雾干燥产物的含量为0. l_30wt%，更优选10- 20wt% 〇10. 根据权利要求7-9任一项所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述化妆品或护肤 品还包括醇类、油剂、pH调节剂和抗氧化剂中的一种或多种。11. 根据权利要求10所述的化妆品或护肤品，其特征在于， 所述醇类选自乙醇、丙三醇和1，3_ 丁二醇中的一种或多种;和/或， 所述油剂选自脂肪酸、高级醇、液体石蜡和硅油中的一种或多种;和/或， 所述pH调节剂为柠檬酸-柠檬酸钠或乳酸-乳酸钠;和/或， 所述抗氧化剂选自烟酰胺、核黄素和烟酸中的一种或多种。12. 根据权利要求7-9任一项所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述化妆品或护肤 品还包括可用于化妆品或护肤品的复配成分，所述复配成分选自金属硫蛋白、左旋维他命 C、甲壳素及其衍生物、壳聚糖、虾青素、水蛭肽、双香豆素、醋硝香豆素、三七黄酮、三七皂苷 和芦荟提取物中的一种或多种。13. 根据权利要求12所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述复配成分占所述化妆品 或护肤品总质量的0.1 % -20 %，更优选0.1 % -10 %。
【文档编号】A61K8/368GK105963153SQ201610566190
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年7月15日
【发明人】黄亚东, 刘凌雪, 项琪, 肖巧学, 何金莲, 李德发, 钟宇
【申请人】广州瑞朗生物科技有限公司, 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心, 广州市暨源生物科技有限公司