用于治疗癌症的曲美替尼、帕尼单抗和达拉菲尼组合的制作方法
【专利摘要】一种新型组合，其包含：B?Raf抑制剂，尤其是N?{3?[5?(2?氨基?4?嘧啶基)?2?(1,1?二甲基乙基)?1,3?噻唑?4?基]?2?氟苯基}?2,6?二氟苯磺酰胺或其药学上可接受盐，和/或MEK抑制剂N?{3?[3?环丙基?5?(2?氟?4?碘?苯基氨基)6,8?二甲基?2,4,7?三氧代?3,4,6,7?四氢?2H?吡啶并[4,3?d]嘧啶?1?基]苯基}乙酰胺或其药学上可接受盐或溶剂化物，和帕尼单抗(维克替比)；含有其的药物组合物以及使用这类组合和组合物治疗受益于抑制MEK和/或B?Raf和/或EGFR的病症，例如癌。
【专利说明】
用于治疗癌症的曲美替尼、帕尼单抗和达拉菲尼组合
技术领域
[0001]本发明设及治疗哺乳动物癌症的方法和用于所述治疗的组合。特别地，所述方法 设及一种新型组合，其包含:B-Ra巧Φ制剂，尤其是N-{ 3-[ 5-( 2-氨基-4-喀晚基)-2-( 1，1-二 甲基乙基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺或其药学上可接受盐，和/或 MEK抑制剂N- {3- [ 3-环丙基-5-( 2-氣-4-舰-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-Ξ氧代-3，4，6， 7-四氨-2H-化晚并[4,3-d]喀晚-1-基]苯基}乙酷胺或其药学上可接受盐或溶剂化物，和帕 尼单抗(维克替比）；含有其的药物组合物W及使用运类组合和组合物治疗受益于抑制MEK 和/或B-Raf和/或EGFR的病症，例如癌。
[醒]发明背景
[0003] 有效治疗包括癌在内的过度增殖性疾病一直是肿瘤学领域的目标。一般，癌是由 控制细胞分裂、分化和调亡性细胞死亡的正常过程失调引起，表征为具有无限生长、局部扩 增和全身转移潜能的恶性细胞增殖。正常过程失调包括信号转导通路异常和响应不同于正 常细胞所见的因子。
[0004] -个重要的大的酶家族是蛋白激酶家族。目前，有约500种不同的已知蛋白激酶。 通过转移ATP-Mgh复合体的丫 -憐酸到各种蛋白质中氨基酸侧链，蛋白激酶用于催化所述氨 基酸侧链的憐酸化。运些酶通过蛋白质中丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的径基可逆憐酸化 来控制细胞内的大部分信号传导过程，从而控制细胞功能、生长、分化和破坏(细胞调亡）。 研究显示蛋白激酶是许多细胞功能的关键调节因子，包括信号转导、转录调控、细胞运动和 细胞分裂。数种癌基因还显示编码蛋白激酶，表明激酶在肿瘤发生中起作用。运些过程受到 高度调节，通常由复杂的交错通路调节，其中各激酶自身被一种或多种激酶调节。因此，异 常或不合适的蛋白激酶活性能可能引起与运类异常激酶活性相关的疾病状态(包括良性和 恶性增殖性疾病）的发生，W及免疫和神经系统不恰当激活导致的疾病的发生。由于其生理 相关性、多样性和普遍性，蛋白激酶已成为生化和医学研究中最重要和广泛研究的酶家族 之一。
[0005] 蛋白激酶家族通常根据其憐酸化的氨基酸残基分成2个主要亚家族:蛋白酪氨酸 激酶和蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶。蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶(PSTK)包括环AMP-和环GMP-依赖 性蛋白激酶、巧和憐脂依赖性蛋白激酶、巧-和巧调蛋白-依赖性蛋白激酶、酪蛋白激酶、细 胞分裂周期蛋白激酶等。运些激酶通常是胞质的或可能通过错定蛋白与细胞颗粒部分相关 联。异常蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性参与或疑似参与许多病理现象，如类风湿性关节炎、 牛皮癖、败血性休克、骨质流失、多种癌症和其他增殖性疾病。因此，丝氨酸/苏氨酸激酶和 其作为一部分的信号转导通路是药物设计的重要祀标。酪氨酸激酶使酪氨酸残基憐酸化。 酪氨酸激酶在细胞调节中发挥着同样重要的作用。运些激酶包括针对诸如生长因子和激素 的分子的数种受体，包括表皮生长因子受体、膜岛素受体、血小板衍生生长因子受体等。研 究表明许多酪氨酸激酶是跨膜蛋白，其受体结构域位于细胞外且其激酶结构域在细胞内。 鉴定酪氨酸激酶调节物的许多工作也在进行中。
[0006] 受体酪氨酸激酶(RTK)催化多种蛋白中某些酪氨酷氨基酸残基的憐酸化，包括其 本身，运控制细胞生长、增殖和分化。
[0007] 数种RTK的下游具有一些信号通路中，其中包括Ras-Raf-MEK-E服激酶通路。目前 已知Ras GTP酶蛋白响应生长因子、激素、细胞因子等的活化可刺激Raf激酶的憐酸化和活 化。然后，运些激酶憐酸化和激活胞内蛋白激酶MEK1及MEK2，进而憐酸化和激活其它蛋白激 酶邸K1及2。此信号通路也称为丝裂原活化蛋白激酶(MPK)通路或胞质级联，其介导细胞对 生长信号的反应。其最终功能是连接细胞膜处的受体活性与控制细胞增殖、分化和生存的 胞质或核祀标修饰。
[0008] 此通路的组成型活化足W诱导细胞转化。异常受体酪氨酸激酶活化、Ras突变或 Raf突变导致的MAP激酶通路失调活化在人类癌症中常见，且代表决定异常生长控制的主要 因素。在人恶性肿瘤中，Ras突变常见，已在约30%癌症中得到鉴定。GTP酶蛋白（使鸟巧Ξ憐 酸转化成鸟巧二憐酸的蛋白）的Ras家族从活化的生长因子受体传递信号到下游胞内伴侣。 活性膜结合Ras所募集的祀标中主要是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的Raf家族。Raf家族由巧中 用作Ras下游效应物的相关激酶(A-、B-和C-Raf)组成。Ras介导的Raf活化进而引起MEK1和 MEK2活化(MAP/E服激酶巧日2)，随之在酪氨酸-185和酪氨酸-183上憐酸化E服巧蛇服2(胞外 信号调节激酶1和2)。活化的ERK1和ERK2易位并在核中积聚，在该处它们能憐酸化多种底 物，包括控制细胞生长和生存的转录因子。鉴于Ras/Raf/Mffi/E服通路在人类癌症发展中的 重要性，所述信号级联的激酶组分合并作为癌和其它增殖性疾病中调节疾病进展的潜在重 要祀标。
[0009] MEK1和MEK2是使多种MAP激酶的苏氨酸和酪氨酸残基憐酸化的双重特异性激酶 (MEK1-7)的更大家族成员。MEK1和MEK2由不同基因编码，但其在C末端催化激酶结构域和大 部分N末端调节区共有高同源性(80 % )。MEK1和MEK2的致瘤形式在人类癌症中未见，但MEK 的组成型活化显示引起细胞转化。除了 Raf, 1邸还能由其它癌基因激活。迄今唯一已知的 MEK1和MEK2底物是E服1和E服2。除了同时使酪氨酸和苏氨酸残基憐酸化的独特能力，此不 寻常的底物特异性使得MEK1和MEK2在信号转导级联中处于关键点，运允许将许多胞外信号 整合入MPK通路。
[0010] 因此，已认识到MAPK激酶通路的蛋白（如MEK)抑制剂应同时具有抗增殖、促调亡和 抗侵入剂的价值W用于抑制和/或治疗增殖性或侵入性疾病。
[00川此外，还已知具有MEK抑制活性的化合物有效诱导邸K1/2活性抑制和阻遏细胞增 殖（The Journal of Biological 化emistiT,276卷，第4期2686-2692页，2001)，预期所述 化合物对由不需要的细胞增殖导致的疾病(如肿瘤发生和/或癌)产生影响。
[001^ 已鉴定多种Ras GTP酶和B-Raf激酶中的突变，所述突变能导致MAPK通路持续和组 成型活化，最终引起细胞分裂和生存增加。由此，运些突变与广泛的人类癌症的建立、发展 和进展密切相关。Raf激酶且特别是B-Raf在信号转导中的生物学作用参见化vies, H.等.， 化 1:ure(2002)9:1-6;Garnett,M.J.&Marais,R.,化ncer Cel1(2004)6:313-319;Zebisch, A.&Troppmair,J.,Cell.Mol.Life Sci.(2006)63:1314-1330；Midgley,R.S.&Kerr,D.J., Grit.Rev.Onc/Hematol.(2002)44:109-120;Smith,R.A.,等，Curr.Top.Med. Qiem.(2006) 6:1071-1089;和Downward,J. ,Nat.Rev.&nce;r(2003)3:11-22。
[OOU]激活MAPK通路信号传递的B-Raf激酶天然产生的突变已在大部分人黑素瘤 (Davies(2002)同上）和甲状腺癌（Cohen等J.化t.Cancer Inst. (2003)95(8)625-627和 Kimura等Cancer Res. (2003)63(7) 1454-1457)中发现，W及在W下疾病中虽频率较低但仍 显著地发现该突变：
[0014] Barrett腺癌（Garnett等.，(Mincer Cell(2004)6 313-319和Sommerer等Oncogene (2004)23(2)554-558)、胆道癌（Zebisch 等，Cell.Mol 丄ife Sci. (2006)631314-1330)、乳 腺癌化 avies( 2002)同上）、宫颈癌(Moreno-Bueno 等 Cl in. (Mincer Res. (2006) 12(12)3865- 3866)、胆管癌(Tannapfe 1等Gut (2003) 52 (5) 706-712)、中枢神经系统肿瘤，包括原发性CNS 肿瘤如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤和室管膜瘤化no化e等Acta Neuropathol. (Berl.) (2004) 108(6)467-470，Davies(2002)同上，和Garnett等，Cancer Cell(2004)同上）W及继 发性CNS肿瘤（即起始于中枢神经系统外的肿瘤转移到于中枢神经系统）、包括大肠结肠癌 在内的结直肠癌（Yuen 等 Cancer Res. (2002 )62(22)6451-6455, Davies (2002)同上和 Zebisch 等，Cell.Mol 丄ife Sci. (2006)、胃癌化 ee 等 0ncogene(2003)22(44)6942-6945)、 包括头部颈部鱗状细胞癌在内的头部颈部癌（Cohen等J.化t .Cancer Inst. (2003)95(8) 625-627和Weber等011。〇旨日11日（2003)22(30)4757-4759)、血液癌，包括白血病（6日則日《等， Cancer Cell(2004)同上），尤其是急性成淋己细胞性白血病（Garnett等，Cancer Cell (2004)同上和 Gustafsson 等 Le 址 emia(2005) 19(2)310-312)、急性骨髓性白血病(MLKLee 等 Le 址 emia(2004) 18(1 )170-172 和化 ristiansen 等 Le 址 emia(2005) 19(12)2232-2240)、骨 髓增生异常综合征（Christiansen等Leukemia( 2005 )同上）和慢性髓细胞性白血病 (Mizuchi等Biochem.Biophys.Res.Commun. (2005)326(3)645-651);霍奇金淋己瘤(Figl等 Arch.Dermatol. (2007)143(4)495-499)、非霍奇金淋己瘤化ee等化.J.Cancer(2003)89 (10) 1958-1960)、巨核母细胞白血病化 ychene 等 0ncogene( 1995) 10(6) 1159-1165)和多发 性骨髓瘤（Ng等化.J.Haematol. (2003) 123(4)637-645)、肝细胞癌（Garnett等，Cancer Cell (2004)、肺癌（Brose等Cancer Res . (2002)62(23)6997-7000,Cohen等J.化t .Cancer Inst. (2003)同上和Davies(2002)同上），包括小细胞肺癌（Pardo等EMBO J. (2006)25(13) 3078-3088)和非小细胞肺癌（Davies (2002)同上）、卵巢癌（Russel l&McCluggage J.化 thol. (2004)203(2)617-619 和 Davies(2002)同上）、子宫内膜癌（Garnett 等，Cancer Cel 1 (2004)同上和Moreno-Bueno等Cl in. Cancer Res . (2006)同上）、膜腺癌（I shimura等 Cancer Lett. (2003) 199(2) 169-173)、垂体瘤（De Martino等J. lindocrinol. Invest. (2007)30( l)RCl-3)、前列腺癌（化o 等 Int.J. Cancer(2006) 119(8) 1858-1862)、肾癌（化 gy 等Int.J. Cancer (2003 )106 (6 )980-981 )、肉瘤（Davies (2002)同上）W及皮肤癌 (Ro 化 iguez-Viciana 等 Science(2006)311(5765)1287-1290和Davies(2002)同上）。c-Raf 过表达与 AML(Zebisch 等，Cancer Res. (2006)66(7)3401-3408 和 ZebiscKCell.Mol 丄ife Sci . (2006))和红白血病(Zebisch等，Cell .Mol 丄ife Sci . (2006))相关。
[0015] 通过Raf家族激酶在运些癌症中发挥的作用W及采用一系列临床前和治疗剂的探 索性研究，包括一种选择性祀向抑制B-Raf激酶活性的药剂化ing A. J.，等，（2006)Cancer Res. 66:11100-11105 )，通常认为一种或多种Raf家族激酶的抑制剂会对治疗运类癌症或其 它Raf激酶相关病症有用。
[0016] B-Raf突变还参与其它病症，包括屯、-面-皮综合征(Ro化iguez-Viciana等Science (2006)311(5765)1287-1290)和多囊性肾病(Nagao等Kidn巧 Int. (2003)63(2)427-437)。
[0017] 表皮生长因子受体化GFR)是表皮生长因子家族成员的细胞表面受体，通过结合包 括表皮生长因子在内的特异性配体而活化。活化后，EGFR经历从无活性单体形式到活性同 源二聚体的转换(Yarden等BiochemistiT, 26(5) 1443-1451)。所述同源二聚体刺激胞内蛋 白酪氨酸激酶活性。由此，EGFR中C末端结构域的数种酪氨酸残基被憐酸化(Downward等， 化ture 311(5985)483-485)。此憐酸化引发下游活化并起始数个信号转导级联，主要是 MAPK、Akt和JNK通路，最终引起DNA合成和细胞增殖(Oda等Mol. Syst. Biol. 1 (1))。
[0018]表皮生长因子受体化GFR)过表达与一些癌相关，包括肺癌、肛口癌和成胶质细胞 瘤(Walker等，Hum.化thol.40(ll)1517-1527)。抑制EGFR显示有效抵御癌症，然而许多患者 发展出抗性（Jackman 等 Clin. Cancer. Res. 15(16)5267-5273)。
[0019] 帕尼单抗(Panitumumab，维克替比(VecUbix))是全人单克隆抗体，特异性结合肿 瘤细胞上的EGFR。帕尼单抗(维克替比）结合EGFR可阻断憐酸化并活化受体相关激酶，导致 细胞生长抑制、诱导细胞调亡和减少基质金属蛋白酶及血管内皮生长因子生成。
[0020] 帕尼单抗经美国食品和药品管理局批准用于对抗癌症。其W商标名Vect化ix也由 安进公司(Amgen)销售。
[0021] 尽管近期癌症治疗取得许多进展，但仍需要更有效和/或提高的患癌个体治疗。本 发明针对此需求。
【发明内容】
[0022] 本发明设及B-Ra巧Φ制剂和/或Μ邸抑制剂与EGFR抑制剂的组合，所述组合用于治 疗癌症。
[0023] 本发明设及相比单独给予各试剂有优势W及相比ffiK抑制剂与B-RA巧审制剂组合 治疗有优势的治疗剂组合。特别地，描述了所述药物组合，其包含:抑制剂N-{3-[3-环丙 基-5-(2-氣-4-舰-苯基氨基)6,8-二甲基-2,4,7-Ξ氧代-3,4,6,7-四氨-2H-化晚并[4,3- d]喀晚-1-基]苯基}乙酷胺或其药学上可接受盐或溶剂化物，可选的B-Ra巧审制剂N-{3-[5- (2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷 胺或其药学上可接受盐，和帕尼单抗(维克替比）。
[0024] 本发明的MEK抑制剂由结构（I)表示：
[0025]
[0026] 或其药学上可接受盐或溶剂化物(本文统称为"化合物A")，
[0027] 本发明的B-Ra巧审制剂由结构（II)表示：
[002引
[0029] 或其药学上可接受盐(本文统称为"化合物护）。
[0030] 帕尼单抗(维克替比）是特异性结合人EGFR的重组人IgG2单克隆抗体。其包含一个 重链可变区和轻链可变区，且能根据美国专利6,235,883所述过程制备。美国专利号6,235， 883中所记载的帕尼单抗的重链序列和其匹配轻链的序列如下所示：
[0031] 重链 8
[0032] vsggsvssgd yywtwirqsp gkglewighi yysgntnynp slksrltisi dtsktqfslk Issvtaadta iyycvrdrvt gafdiwgqgt mvtss(SEQ ID NO：15)
[0033] 轻链 8
[0034] titcqasqdi snylnwyqqk pgkapklliy dasnletgvp srfsgsgsgt dftftisslq pedi曰tyfcq hfdhlpl曰fg ggtkveikrt v曰曰psvfifp psdeq(SEQ ID NO:16)
[0035] 上述重链8和轻链8对应于美国专利号6,235,833的序列37和38。
[0036] 在本发明的第一方面，提供一种组合，其包含：
[0037] (i)结构（II)的化合物
[00；3 引
[0039] 或其药学上可接受盐;和/或
[0040] (ii)结构（I)的化合物：
[0041]
[0042] 或其药学上可接受盐或溶剂化物;和
[0043] (iii)帕尼单抗(维克替比）。
[0044] 在本发明的另一方面，提供一种组合，其包含：
[0045] n-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基）-2-(1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯 基}-2,6-二氣苯横酷胺甲横酸盐，和/或N-{3-[3-环丙基-5-(2-氣-4-舰-苯基氨基)6,8-二 甲基-2,4,7-Ξ氧代-3,4,6,7-四氨-2H-化晚并[4,3-d]喀晚-1-基]苯基}乙酷胺二甲亚讽 (溶剂化物），和帕尼单抗(维克替比）。
[0046] 在本发明的另一方面，提供一种组合，其包含：
[0047] (i)结构（II)的化合物：
[004引
[0049] 或其药学上可接受盐;和/或
[0050] (ii)结构（I)的化合物：
[0化1 ]
[0052] 或其药学上可接受盐或溶剂化物;和
[0053] (iii)帕尼单抗(维克替比），
[0化4] 所述组合用于治疗。
[0055] 在本发明的另一方面，提供一种组合，其包含：
[0056] (i)结构（II)的化合物：
[0化7]
[005引或其药学上可接受盐;和/或
[0059] (ii)结构（I)的化合物：
[0060]
[0061 ]或其药学上可接受盐或溶剂化物;和
[0062] (iii)帕尼单抗(维克替比），
[0063] 所述组合用于治疗癌症。
[0064] 在本发明的另一方面，提供一种药物组合物，其包含：
[0065] (i)结构（II)的化合物：
[0066]
[0067] 或其药学上可接受盐;和/或
[0068] (ii)结构（I)的化合物：
[0069]
[0070] 或其药学上可接受盐或溶剂化物;和
[0071] (iii)帕尼单抗(维克替比），
[0072] W及药学上可接受稀释剂或载体。
[0073] 另一方面，提供组合在生产用于联用W治疗癌症的药物中的应用，所述组合包含：
[0074] (i)结构（II)的化合物：
[0075]
[0076] 或其药学上可接受盐;和/或
[0077] (ii)结构（I)的化合物：
[007引
[0079] 或其药学上可接受盐或溶剂化物;和
[0080] (iii)帕尼单抗(维克替比）。
[0081] 另一方面，提供治疗哺乳动物癌症的方法，所述方法包括向所述哺乳动物给予：
[0082] (i)结构（II)的化合物：
[0083]
[0084] 或其药学上可接受盐;和/或
[0085] (i i)治疗有效量的结构（I)的化合物：
[0086]
[0087]或其药学上可接受盐或溶剂化物;和 [008引（iii)帕尼单抗(维克替比）。
[0089] 另一方面，提供在有需要的人中治疗癌症的方法，所述方法包括给予治疗有效量 的W下组合:N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯 基}-2,6-二氣苯横酷胺或其药学上可接受盐;和/或N-{3-[3-环丙基-5-(2-氣-4-舰-苯基 氨基)6，8-二甲基-2，4，7-Ξ氧代-3，4，6，7-四氨-2H-化晚并[4，3-d ]喀晚-1-基]苯基}乙酷 胺或其药学上可接受盐或溶剂化物;和帕尼单抗(维克替比）。
[0090] 另一方面，提供在有需要的人中治疗癌症的方法，所述方法包括给予治疗有效量 的W下组合:N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯 基}-2,6-二氣苯横酷胺甲横酸盐;和/或N-{3-[3-环丙基-5-(2-氣-4-舰-苯基氨基)6,8-二 甲基-2，4，7-Ξ氧代-3，4，6，7-四氨-2H-化晚并[4，3-d]喀晚-1-基]苯基}乙酷胺二甲亚讽 溶剂化物;和帕尼单抗(维克替比）。
[0091 ]在本发明的另一方面，提供一种组合，其包含：
[0092] n-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基）-2-(1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯 基}-2,6-二氣苯横酷胺甲横酸盐，和帕尼单抗(维克替比）。
[0093] 另一方面，提供在有需要的人中治疗癌症的方法，所述方法包括给予治疗有效量 的的W下组合:N- {3- [ 5- (2-氨基-4-喀晚基)-2- (1，1 -二甲基乙基)-1，3-嚷挫-4-基]-2-氣 苯基}-2,6-二氣苯横酷胺甲横酸盐;和帕尼单抗(维克替比）。
[0094] 在本发明的另一方面，提供在有需要的哺乳动物中治疗癌症的方法，所述方法包 括给予治疗有效量的本发明组合，其中所述组合在特定阶段内给予且持续一段时间。
[00巧]附图简要说明
[0096] 图-1图1，描述化合物A、化合物B和其与帕尼单抗的组合在人肿瘤细胞系中对细胞 生长的抑制。
[0097] 图-2图2描述用化合物A、化合物B和帕尼单抗处理的HT29细胞中MAPK和PI3K信号 传递及细胞调亡的蛋白质印迹分析。
[009引图-3图3描述Co-012和CO-018PDX中的遗传背景和基线蛋白。
[0099] 图-4图4描述帕尼单抗与达拉菲尼(化合物B)W及达拉菲尼加曲美替尼(化合物A) 的组合在Co-012PDX模型中的抗肿瘤功效。
[0100] 图-5图5描述帕尼单抗与达拉菲尼(化合物B)加曲美替尼(化合物A)的组合在Co- 018PDX模型中的抗肿瘤功效。
[0101] 发明详述
[0102] 如本文所用，所述MEK抑制剂N-{3-[3-环丙基-5-(2-氣-4-舰-苯基氨基)6,8-二甲 基-2,4,7-Ξ氧代-3,4,6,7-四氨-2H-化晚并[4,3-d]喀晚-1-基]苯基}乙酷胺或其药学上 可接受盐或溶剂化物由结构（I)的化合物：
[0103]
[0104] 或其药学上可接受盐或溶剂化物表示。为了方便起见，可能的化合物和盐或溶剂 化物的组统称为化合物A，意味着提及化合物A可替代地指任何所述化合物或其药学上可接 受盐或溶剂化物。
[010引根据命名惯例，结构（I)的化合物还可适当称为N-{3-[3-环丙基-5-(2-氣-4-舰苯 基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-S氧代-3,4,6,7-四氨化晚并[4,3-d]喀晚-U2H)-基]苯基} 乙酷胺。
[0106] 如本文所用，所述BRa巧φ制剂N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基）-2-(l，l-二甲基乙 基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺或其药学上可接受盐由结构（II)的化 合物：
[0107]
[0108] 或其药学上可接受盐表示。为了方便起见，可能的化合物和盐的组统称为化合物 B，意味着提及化合物B可替代地指任何所述化合物或其药学上可接受盐。
[0109] 帕尼单抗(维克替比）是特异性结合人EGFR的重组人IgG2单克隆抗体。其包含一个 重链可变区和轻链可变区，且能根据美国专利6，235，883所述过程制备。
[0110] 本文所用的术语"本发明组合"指含BRA巧审制剂和/或MEK抑制剂和EGFR抑制剂的 组合，适宜为化合物A、化合物B和帕尼单抗。在本发明的一个替代性实施方式中，"本发明组 合'指含BRA巧Φ制剂和EGFR抑制剂的组合，适宜为化合物B和帕尼单抗。
[0111] 本文所用的术语"寶生物"指细胞或组织的异常生长，且应理解为包括良性（即非 癌性生长）W及恶性（即癌性生长）。术语"寶生的"指或设及寶生物。
[0112] 本文所用的术语"试剂/剂"应理解为指在组织、系统、动物、哺乳动物、人或其它对 象中产生所需效果的物质。因此，术语"抗肿瘤剂"应理解为指在组织、系统、动物、哺乳动 物、人或其它对象中产生抗肿瘤效果的物质。还应理解"试剂/剂"可W是单一化合物或者2 种或更多种化合物的组合或组合物。
[0113] 本文所用的术语"治疗"和其派生词指治疗性疗法。设及具体病症时，治疗指：（1) 改善病症或者一种或多种病症的生物学表现，（2)干扰(a)-个或多个导致或引起病症的生 物级联中的点或(b)-种或多种病症的生物学表现，（3)缓解一种或多种与病症相关的症 状、影响或副作用，或者一种或多种与病症或其治疗相关的症状、影响或副作用，或(4)减缓 病症或者一种或多种病症的生物学表现发展。
[0114] 如本文所用，术语"防止/预防"应理解为指预防性给予药物W大幅减少病症或其 生物学表现的可能性或严重度，或者延迟运种病症或其生物学表现发生。技术人员会理解 "防止/预防"不是绝对性术语。预防性疗法是合适的，例如当对象被认为有发展癌症的高风 险，如当对象具有明显癌症家族史，当对象曾暴露于高水平福射或对象曾暴露于致癌物质 时。
[0115] 本文所用的术语"有效量"指会引起组织、系统、动物或人中（例如)研究人员或临 床医生所寻求的生物或医学反应的药物或药剂的量。此外，术语"治疗有效量"指与未接受 所述量的相应对象相比，引起治疗、治愈、预防或缓解疾病、素乱或副作用的改善，或者疾病 或素乱发展速率减少的任何量。所述术语范围还包括有效提高正常生理功能的量。
[0116] 给予治疗有效量的本发明组合相比个体组分化合物的优势在于该组合相较单独 给予治疗有效量的组分化合物可提供一个或多个下列改善性质：i)抗癌效果高于具有最大 活性的单一试剂，ii)协同或高度协同的抗癌活性，iii)提供更高抗癌活性而副作用降低的 给药操作，iv)毒性作用减少，V)治疗窗口增加，或Vi)组分化合物中的一种或多种的生物利 用度提高。
[0117] 化合物A和/或B可包含一个或多个手性原子，或另外能作为对映体存在。因此，本 发明化合物包括对映体混合物W及纯化的对映体或对映体富集的混合物。还应理解化合物 A和化合物B的范围包括所有互变异构体和互变异构体混合物。
[0118] 还应理解化合物A和B可单独或都作为溶剂化物存在。本文所用的术语"溶剂化物" 指具有可变化学计量学的复合体，由溶质(本发明中，式(I)或（II)的化合物或其盐)和溶剂 形成。用于本发明目的的运类溶剂可不干扰溶质的生物活性。合适溶剂的示例包括但不限 于水、甲醇、二甲亚讽、乙醇和乙酸。在一个实施方式中，所用溶剂是药学上可接受溶剂。合 适的药学上可接受溶剂示例包括但不限于水、乙醇和乙酸。在另一个实施方式中，所用溶剂 是水。
[0119] 化合物A和B可具有W多于一种形式结晶的能力，所述特征称为多态性，应理解运 类多态型（"多晶型物"）在化合物A和B范围内。多态性一般能作为对溫度或压力或两者变化 的反应而出现且还能由结晶过程的变化导致。多晶型物可通过本领域已知的多种物理特性 区分，如X射线衍射图谱、溶解度和烙点。
[0120] 在国际申请号PCT/肝2005/011082(国际申请日为2005年6月10日；国际公开号W0 2005/121142,国际【公开日】为2005年12月22日）中，化合物A与其药学上可接受盐和溶剂化物 一起被公开和要求权利，其用作MEK活性抑制剂，尤其用于治疗癌症，所述专利申请的完整 公开内容通过引用纳入本文，化合物B是实施例4-1的化合物。化合物B能如国际申请号PCT/ JP2005/011082所述制备。化合物B能如2006年1月19日公开的美国专利公开号US 2006/ 0014768所述制备，所述专利申请的完整公开内容通过引用纳入本文。
[0121] 化合物A宜采用二甲亚讽溶剂化物形式。化合物B宜采用钢盐形式。化合物B宜采用 选自W下的溶剂化物形式:水合物、乙酸、乙醇、硝基甲烧、氯苯、1-戊醇（1-pen化nci)、异丙 醇、乙二醇和3-甲基-1-下醇。运些溶剂化物和盐形式可由本领域技术人员根据国际申请号 PCT/JP2005/011082或美国专利公开号US2006/0014768描述来制备。
[0122] 在PCT专利申请PCT/US09/42682中，化合物B与其药学上可接受盐一起被公开和要 求权利，其用作BRaf活性抑制剂，尤其用于治疗癌症。化合物B由该申请的实施例58a到58e 呈现。所述PCT申请在2009年11月12日W公开号W02009/137391公开，并通过引用纳入本文。
[0123] 更特别地，化合物B可根据W下方法制备：
[0124] 方法1:化合物B(第一晶形)-N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基)- 1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺
[0125]
[0126] 将溶于甲醇7M(8ml，56.0mmol)的N-{3-[5-(2-氯-4-喀晚基）-2-(l，l-二甲基乙 基)-1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺（196mg，0.364mmol)和氨的悬液在密 封管中加热到90°C，持续2地。所述反应用DCM稀释，加入硅胶并浓缩。粗产物在硅胶上进行 色谱分离，用100%0〔1-1:1[0〔1:(9:化*04(3:16(^)]洗脱。浓缩干净部分^产生粗产物。粗 产物通过反相HPLC(乙腊:水梯度，两者都带0.1%TFA)再纯化。浓缩合并的干净部分且随后 在DCM和饱和化肥化之间分配。分离DCM层并用化2S化干燥。获得标题化合物N- {3-[ 5-( 2-氨 基-4-喀晚基）-2-( 1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2,6-二氣苯横酷胺 (94111邑，47%产率）。1!1醒1?(4001化，0150-(16)59911110.83(3，^)，7.93((1，1 = 5.2化，^)， 7.55-7.70(m，lH)，7.35-7.43(m，lH)，7.31(t，J=6.3Hz，lH)，7.14-7.27(m，3H)，6.70(s， 2扣，5.79((1，1 = 5.13化，1扣，1.35(3，抓）.]\15化51):519.9[]\1+扣 + .
[0127] 方法2:化合物B(替代晶形)-N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基)- 1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺将19.6mg N- {3- [ 5- (2-氨基-4-喀晚基)- 2- (1，1-二甲基乙基)-1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺(可根据实施例58a 制备)与50化乙酸乙醋在2-mL瓶中室溫合并。浆液在0-40°C溫度循环48小时。使所得浆液冷 却至室溫，并通过真空过滤收集固体。所述固体用Raman、PXRD、DSC/TGA分析，指示晶形不同 于上面实施例58a所得晶形。
[012引方法3:化合物B(替代晶形，大批)-N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基 乙基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2,6-二氣苯横酷胺
[0129]
[0130] 步骤A: 3- {[ (2，6-二氣苯基)横酷基]氨基} -2-氣苯甲酸甲醋
[0131]
[0132] 将3-氨基-2-氣苯甲酸甲醋（（50g，leq)装入反应器，然后加入二氯甲烧（250mL, 5vol)。揽拌内容物并冷却至~15°C，加入[I比晚(26.2mL, 1. leq)。加入R比晚后，将反应器内容 物调至~15°C，开始经加料漏斗添加2，6-二氣苯横酷氯(39.7mL，1. Oeq)。加入期间的溫度 保持<25°C。完成添加后，将反应器内容物溫热至20-25°C并保持过夜。加入乙酸乙醋 (150mL)且通过蒸馈移出二氯甲烧。一旦完成蒸馈，反应混合物随之用乙酸乙醋(5vol)再稀 释一次并浓缩。反应混合物用乙酸乙醋（lOvol)和水(4vol)稀释，所述内容物在揽拌下加热 至50-55Γ，直到所有固体溶解。使层沉淀并分离。有机层用水(4vol)稀释，并将内容物加热 至50-55°C，持续20-30分钟。使层沉淀并随之分离，将乙酸乙醋层减压蒸发到~3体积。加入 乙酸乙醋(5vo 1 )，再次减压蒸发到~3体积。然后，向反应器加入环己烧(9 VO1 )，使内容物回 流加热30分钟，接着冷却至0 °C。过滤固体并用环己烧(2x 1 OOmL)冲洗。固体用空气干燥过 夜获得3-{[(2,6-二氣苯基)横酷基]氨基}-2-氣苯甲酸甲醋(94.1g，91%)。
[0133 ] 步骤B: N- {3-[ (2-氯-4-喀晚基）乙酷基]-2-氣苯基} -2,6-二氣苯横酷胺
[0134]
[0135] 将总体上根据上面步骤A制备的3-{[(2,6-二氣苯基)横酷基]氨基}-2-氣苯甲酸 甲醋(490g，1当量)溶于THF(2.4化，5体积），揽拌并冷却至0-3°C。向反应混合物加入含1M双 (^甲基娃基）氨基裡（1;[1:11111111313(化;[11161:11713；[171)日1111(16)的1'邸(5.2化,3.7当量）溶液， 然后加入含2-氯-4-甲基喀晚（238g，1.3当量）的THF(2.4化，5体积）。反应随后揽拌1小时。 用4.5M HC1 (3.9化，8体积)泽灭反应。移出水层(底层)并弃去。将有机层减压浓缩到~化。 向反应混合物加入IPAC(乙酸异丙醋）（2.45L)，并将所述混合物随之浓缩到~化。加入IPAC (0.5L)和MT肥（2.4化），化下揽拌过夜。过滤固体。将固体和过滤母液一起加回，揽拌数小 时。过滤固体并用MTBE(~5体积)洗涂。将固体置于5(TC真空烘箱过夜。固体在真空烘箱中 30 °C干燥整个周末W获得N- {3- [(2-氯-4-喀晚基）乙酷基]-2-氣苯基} -2,6-二氣苯横酷胺 (479g,72%)〇
[0136] 步骤 C:N-{3-[5-(2-氯-4-喀晚基）-2-(1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣 苯基}-2,6-二氣苯横酷胺
[0137]
[0138] 向反应容器加入N-{3-[(2-氯-4-喀晚基）乙酷基]-2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺 (30g，leq)，然后是二氯甲烧（300mL)。使反应浆液冷却至~10°C，且N-漠代班巧酷亚胺 ("NBS")(12.09g，leq)W3个大致相等部分加入，每次添加间揽拌10-15分钟。最后一次加入 NBS后，将反应混合物溫热至~20°C并揽拌45分钟。然后，向反应容器加入水(5vol)并揽拌 混合物，随之分层。再次向二氯甲烧层加入水(5vol)并揽拌混合物，分层。将二氯甲烧层浓 缩至~120mL。向反应混合物加入乙酸乙醋（7vol)并浓缩到~120mL。随后向反应混合物加 入二甲基乙酷胺(270血)并冷却至~10°C。将2，2-二甲基硫代丙酷胺（1.3g，0.5eq) W2个相 等部分加入反应内容物，每次添加间揽拌~5分钟。将反应溫热至20-25°Cd45分钟后，将容 器内容物加热至75 °C，保持1.75小时。将反应混合物随之冷却至5 °C，缓慢加入水(270ml)， 保持溫度低于30°C。然后加入乙酸乙醋(4vol)，揽拌混合物并分层。再次向水层加入乙酸乙 醋(7vol)，揽拌内容物并分离。再向水层加入乙酸乙醋（7vol)，揽拌内容物并分离。合并有 机层且用水（4vol)洗4次，20-25°C揽拌过夜。然后，在加热和真空情况下浓缩有机层至 120mL。容器内容物随之加热至50°C，缓慢加入庚烧（120mL)。加入庚烧后，将容器内容物回 流加热，接着冷却至〇°C并保持~2小时。过滤固体并用庚烧(2x 2vol)冲洗。随后，固体产物 在30°C真空干燥获得N-{3-[5-(2-氯-4-喀晚基)-2-α，l-二甲基乙基)-l，3-嚷挫-4-基]- 2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺(28.8g，80%)。
[0139] 步骤 d:N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基）-2-(1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2- 氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺
[0140] 在Igal压力反应器中，使根据上面步骤C制备的N-{3-[5-(2-氯-4-喀晚基)-2-(1, 1 -二甲基乙基)-1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺（120g)和氨氧化锭（28- 30%，2.4L，20vol)的混合物在密封压力反应器中加热至98-103°C，在此溫度揽拌2小时。使 所述反应缓慢冷却至室溫(20°C)并揽拌过夜。过滤固体且用最小量的母液洗，真空干燥。向 化0Ac(15vol)/水(2vol)混合物加入固体，在60-70°C加热至完全溶解，移出水层并弃去。向 化0AC层加入水（Ivol)且用HC1溶液中和至~抑5.4-5.5，加入水（1￥〇1)。在60-70°(：移出水 层并弃去。有机层在60-70°C用水（Ivol)洗，移出水层并弃去。有机层在60°C过滤，浓缩到3 体积。将化〇Ac(6vol)加入混合物，加热并在72°C揽拌10分钟，然后冷却至20°C并揽拌过夜。 化OAc通过真空蒸馈移出W浓缩反应混合物至~3体积。反应混合物在~65-70 °C维持~30 分钟。加入溶于庚烧浆液的产物晶体，所述晶体的晶型与上面实施例58b所制备的相同（且 可由实施例58b的过程制备）。庚烧(9vol)在65-70°C缓慢加入。浆液在65-70°C揽拌2-3小 时，接着缓慢冷却至0-5 °C。过滤产物，用化OAc/庚烧(3/1 v/v，4vol)洗并在45 °C真空干燥W 获得N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基}-2， 6-二氣苯横酷胺（102.3g，88 % )。
[0141] 方法4:化合物B(甲横酸盐)-N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基)- 1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺甲横酸盐
[0142]
[0143] 向溶于异丙醇（2mL)的N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1,1-二甲基乙基）-1,3- 嚷挫-4-基]-2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺(204mg，0.393mmol)溶液加入甲横酸(0.131血， 0.393mmol)，使溶液室溫揽拌3小时。形成白色沉淀，过滤浆液，用二乙酸冲洗产生作为白色 结晶固体的标题产物（210111旨，83%产率）。1!1匪1?(4001化，0150-(16)8邮11110.85(3，班） 7.92-8.05(m,lH)7.56-7.72(m,lH)6.91-7.50(m,7H)5.83-5.98(m,lH)2.18-2.32(m,3H) 1.36(3，抓）.]?5化51):520.0[]\1+扣 + .
[0144] 方法5:化合物B(替代的甲横酸盐实施方式)-N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-(1, 1 -二甲基乙基)-1，3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基} -2，6-二氣苯横酷胺甲横酸盐
[0145] 将N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基）-2-( 1,1-二甲基乙基）-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯 基}-2,6-二氣苯横酷胺（可根据实施例58a制备）（2.37旨，4.56111111〇1)与预过滤乙腊 (5.25vol, 12.4mL)合并。溶于出0(0.75eq. , 1.78mL)的预过滤甲基横酸(mesicacid)溶液 (1. leq.，5.02mmol，0.48g)在20°C加入。将所得混合物的溫度提升至50-60°C，同时保持低 揽拌速度。一旦混合物溫度达到50-60°C，加入N-{3-[5-(2-氨基-4-喀晚基)-2-( 1，1-二甲 基乙基)-1,3-嚷挫-4-基]-2-氣苯基}-2,6-二氣苯横酷胺甲横酸盐种子浆液（1.0%w/V混 合于0.2VO1预过滤乙腊），使混合物老化，同时揽拌速度快到足W防止固体沉淀，在50-60°C 持续2小时。然后，将混合物在0.25°C/min下冷却至0-5°C，0-5°C保持6小时。过滤混合物，湿 饼用预过滤乙腊洗2次。第一次洗涂由14.2ml (6vol)预过滤乙腊组成且第二次洗涂由9.5ml (4vol)预过滤乙腊组成。湿固体在50°C真空干燥，产生2.39g(85.1%产率)产品。
[0146] 通常，本发明的盐是药学上可接受盐。术语"药学上可接受盐"涵盖的盐指本发明 化合物的无毒盐。本发明化合物的盐可包括从本发明化合物的取代基上的氮衍生的酸加成 盐。代表性盐包括W下盐：乙酸盐、苯横酸盐、苯甲酸盐、碳酸氨盐、硫酸氨盐、酒石酸氨盐、 棚酸盐、漠化物、依地酸巧、精脑横酸盐、碳酸盐、氯化物、棒酸盐、巧樣酸盐、二盐酸盐、依地 酸盐、乙二横酸盐、依托酸盐(estolate)、乙横酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、 谷氨酸盐、对径乙酷氨基苯肿酸盐（glycol lylarsani late)、己基间苯二酪盐 化e巧Iresorcinate)、哈胺化y化abamine)、氨漠酸盐、盐酸盐、径基糞甲酸盐、舰化物、径乙 基横酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲横酸盐、甲漠化 物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、马来酸一钟、粘液酸盐、糞横酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺盐、 草酸盐、扑酸盐(双径糞酸盐）、栋桐酸盐、泛酸盐、憐酸盐/二憐酸盐、聚半乳糖醒酸盐、钟、 水杨酸盐、钢、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、班巧酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐、甲苯横 酸盐、Ξ乙舰化物、Ξ甲锭和戊酸盐。非药学上可接受的其它盐可用于制备本发明化合物且 运些形成发明的另一方面。盐可由本领域技术人员容易制备。
[0147] 尽管就治疗应用而言化合物A和B可作为原料化学品给予，可使活性成分呈现为药 物组合物。因此，本发明还提供药物组合物，所述组合物包括化合物A和/或化合物BW及一 种或多种药学上可接受载体、稀释剂或赋形剂。化合物A和B如上所述。载体、稀释剂或赋形 剂必须在W下意义上可接受:与其它制剂成分相容，能形成药物制剂，对其接受者无害。根 据发明的另一方面，还提供制备药物组合物的工艺，包括混合化合物A和/或化合物B与一种 或多种药学上可接受载体、稀释剂或赋形剂。所用药物组合物的运类要素可W单独药物组 合呈现或W共同配制于一种药物组合物中。因此，本发明还提供药物组合物的组合，其中的 一种药物组合物含有化合物A和一种或多种药学上可接受载体、稀释剂或赋形剂，W及含有 化合物B和一种或多种药学上可接受载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
[0148] 化合物B和/或化合物A和帕尼单抗可用于本文所述任何组合物。
[0149] 药物组合物可W每单位剂量含预定量活性成分的单位剂型呈现。如本领域技术人 员已知，每剂量的活性成分的量取决于所治疗病症、给药途径W及患者的年龄、体重和状 况。优选的单位剂量组合物是含日剂量或亚剂量活性成分或其合适部分的那些。此外，此类 药物组合物可通过制药领域熟知的任何方法制备。
[0150] 化合物A和B可通过任何合适途径给药。合适的途径包括口服、直肠、鼻、局部(包括 颊粘膜和舌下粘膜）、阴道和胃肠外(包括皮下、肌肉内、静脉内、真皮内、銷内和硬脑膜外）。 应理解优选途径可随着例如所述组合接受者的状况和待治疗癌症而变化。还应理解给予的 各试剂可经相同或不同途径给药，且化合物A和B能配合在一起或处于分开的药物组合物 中。帕尼单抗(维克替比)通过缓慢注射给药进入静脉。
[0151 ]适合口服给药的药物组合物可作为独立单元，如胶囊剂或片剂;粉末剂或颗粒剂； 溶于水性或非水性液体的溶液剂或混悬剂;可食用泡沫或打发泡沫(whips);或水包油液体 乳剂或油包水液体乳剂。
[0152] 例如，对于片剂或胶囊剂形式的口服给药，活性药物组分能与口服、无毒的药学上 可接受惰性载体如乙醇、甘油、水等组合。粉末如下制备:粉碎化合物至合适细粒度，混合类 似粉碎的药物载体如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露醇。增味剂、防腐剂、分散剂和着 色剂也能存在。
[0153] 胶囊如下制备:如上所述制备粉末混合物，填充成形的明胶护套。助流剂和润滑剂 如胶体二氧化娃、滑石、硬脂酸儀、硬脂酸巧或固体聚乙二醇可于填充操作前加入粉末混合 物。还可加入崩解剂或增溶剂如琼脂-琼脂、碳酸巧或碳酸钢W改善吞咽胶囊的药物利用 度。
[0154] 此外，需要或必要时，合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂也能造粒，粉末混合 物可经过压片机，结果是未完全形成的预压片碎成颗粒。颗粒能润滑纳入混合物。合适的粘 合剂包括淀粉、明胶、天然糖如葡萄糖或e-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶如阿拉伯胶、 黄巧胶或海藻酸钢、簇甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。用于运些剂型的润滑剂包括油酸钢、硬 脂酸钢、硬脂酸儀、苯甲酸钢、乙酸钢、氯化纳等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼 月旨、皂±、黄原胶等。配制片剂，例如通过制备粉末混合物，造粒或冲压，加入润滑剂和崩解 剂并压成片剂。粉末混合物如下制备:如上所述混合适当粉碎的化合物与稀释剂或基质，任 选用粘合剂如簇甲基纤维素、海藻酸盐、明胶或聚乙締化咯烧酬，溶液阻滞剂如石蜡，再吸 收促进剂如季盐和/或吸收剂如皂上、高岭上或憐酸氨巧。粉末混合物能如下成粒：用粘合 剂如糖浆、淀粉糊、阿拉伯胶粘液(acadia mucilage)或者纤维素或聚合材料溶液湿润，受 压通过筛子。防止粘住压片模的替代方式是加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油。然后，润 滑的混合物压成片剂。本发明化合物还能与自由流动的惰性载体组合并直接压成片剂，而 不需经历造粒或冲压步骤。可提供由虫胶密封涂层组成的澄清或不透明的保护包衣、糖衣 或聚合材料涂层和蜡的抛光涂层。能向运些包衣加入染料W区分不同单位剂量。
[0155] 口服液体如溶液、糖浆和馳剂能W单位剂型制备，从而给定量包含预定量的化合 物。通过将化合物溶于适当调味的水溶液可制备糖浆，而使用无毒醇载剂制备馳剂。通过将 化合物分散于无毒载剂可配制混悬剂。还能加入增溶剂和乳化剂如乙氧基化异硬脂醇及聚 氧乙締山梨醇酸、防腐剂、香味添加剂如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其它人造甜味剂等。
[0156] 适当时，口服给药的组合物能装入微胶囊。所述组合物还能制备成延长或维持释 放，例如通过包衣或包埋颗粒材料于聚合物、蜡等。
[0157] 根据本发明使用的试剂还可W脂质体递送系统形式施用，如小单层囊泡、大单层 囊泡和多层囊泡。脂质体能形成自多种憐脂，如胆固醇、硬脂酷胺或憐脂酷胆碱。
[0158] 根据本发明使用的试剂还可用单克隆抗体作为单独载体递送，化合物分子与所述 载体偶联。所述化合物还能偶联作为可祀向药物载体的可溶聚合物。运类聚合物可包括聚 乙締化咯烧酬、化喃共聚物、聚径丙基甲基丙締酷胺-苯酪、聚径乙基天冬酷胺苯酪、或聚环 氧乙烧聚赖氨酸(经栋桐酷残基取代）。此外，所述化合物可偶联至一类用于实现药物受控 释放的生物可降解聚合物，例如聚乳酸、聚-ε-己内醋、聚径基下酸、聚原酸醋、聚缩醒、聚二 氨化喃、聚氯基丙締酸醋及水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。
[0159] 适合经皮给药的药物组合物可作为独立贴片，用于维持更长时间的与受体表皮密 切接触。例如，活性成分可通过离子导入法从贴片递送，一般如化armaceutical Research, 3(6) ,318(1986)所述。
[0160] 适合局部给药的药物组合物可配制成软膏剂（ointment)、乳膏剂（cream)、混悬 剂、洗剂、粉末剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。
[0161] 对于眼或其它外部组织如口腔和皮肤的治疗，所述组合物优选作为局部软膏剂或 乳膏剂施用。配制成软膏剂时，活性成分可与石蜡或水可混溶性软膏基质一起使用。或者， 该活性成分可与水包油乳膏基质或油包水基质配制成乳膏。
[0162] 适合眼部局部给药的药物组合物包括滴眼液，其中活性成分溶解或混悬于合适的 载体中，特别是水性溶剂。
[0163] 适合口腔局部给药的药物组合物包括锭剂（lozenges)、软锭剂(pastille)和漱口 剂。
[0164] 适合直肠给药的药物组合物可W为栓剂或灌肠剂。
[0165] 适合经鼻给药的药物组合物(其中载体是固体)包括粒度范围为例如20-500微米 的粗粉，可W将粉末W鼻吸药的方式给药，即，从将靠近鼻子的粉末容器中经鼻道迅速吸 入。用于作为鼻喷雾剂或滴鼻剂施用的合适组合物(其中载体是液体)包括活性成分的水性 或油溶液。
[0166] 适合经吸入给药的药物组合物包括细粒粉剂或薄雾，其可通过不同类型的定量压 力气雾剂、喷雾器或吸入器产生。
[0167] 适合阴道给药的药物组合物可W为阴道栓剂、棉塞剂(tampons)、乳膏剂、凝胶剂、 糊剂、泡沫剂或喷雾剂组合物。
[0168] 适合胃肠外给药的药物组合物包括水性和非水性无菌注射溶液，其可含有抗氧化 剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期受体的血液等渗的溶质；水性和非水性无菌混悬液，其 可包括混悬剂和增稠剂。所述组合物可存在于单剂量或多剂量容器中，例如密封的安飯和 小瓶，并且可胆存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅要求在临用前添加无菌液状载体例如注射 用水。临时注射溶液和混悬液可W从无菌粉末、颗粒和片剂配制。
[0169] 应理解除了上面具体提及的成分，所述组合可包括设及所研究制剂类型的领域中 常规的其它试剂，例如适合口服给药的那些可包括增味剂。
[0170] 通过在含化合物A和B的单一药物组合物中同时给药，运两种化合物可根据本发明 联用。或者，所述组合可在各自包含化合物A和B之一的单独药物组合物中依序分开给药，其 中例如化合物A或化合物B首先给药且另一个第二给药。运种依序给药可在时间上接近(如 同时）或相隔时间较长。此外，无所谓化合物是否W同一剂型给药，如一种化合物可局部给 药而另一化合物可口服给药。适宜的是巧巾化合物都口服给药。
[0171] 因此，在一个实施方式中，一个或多个剂量的化合物A与一个或多个剂量的化合物 B和一个或多个剂量的帕尼单抗(维克替比）同时或分开给药。
[0172] 在一个实施方式中，一个或多个剂量的化合物A与一个或多个剂量的帕尼单抗(维 克替比）同时或分开给药。
[0173] 在一个实施方式中，一个或多个剂量的化合物B与一个或多个剂量的帕尼单抗(维 克替比）同时或分开给药。
[0174] 在一个实施方式中，多个剂量的化合物A与多个剂量的化合物B和多个剂量的帕尼 单抗(维克替比）同时或分开给药。
[0175] 在一个实施方式中，多个剂量的化合物A与一个剂量的化合物B和一个剂量的帕尼 单抗(维克替比）同时或分开给药。
[0176] 在一个实施方式中，一个剂量的化合物A与多剂量化合物B和一个剂量的帕尼单抗 (维克替比）同时或分开给药。
[0177] 在一个实施方式中，一个或多个剂量的化合物A与一个剂量的帕尼单抗（维克替 比）同时或分开给药。
[0178] 在上面所有实施方式中，化合物A可首先给药或化合物B可首先给药或帕尼单抗 (维克替比）可首先给药。
[0179] 所述组合可作为组合药盒。本文所用的术语"组合药盒"或"成套药盒"指一种或多 种药物组合物用于根据本发明给予化合物A、化合物B和帕尼单抗(维克替比）。化合物A和化 合物B同时给药时，所述组合药盒能包含处于单一药物组合物或单独药物组合物如片剂中 的化合物A和化合物B，W及小瓶中的帕尼单抗(维克替比）。化合物A和巧自同时给药时，所述 组合药盒会包含单独药物组合物中的化合物A、化合物B，W及帕尼单抗(维克替比），其中化 合物A和化合物B在单一包装中或化合物A和化合物B在分开包装的单独药物组合物中。
[0180] -方面，提供包括W下组分的成套药盒：
[0181 ]化合物A，其与药学上可接受稀释剂和载体联合;化合物B，其与药学上可接受稀释 剂和载体联合;和帕尼单抗(维克替比）。
[0182] 在本发明的一个实施方式中，所述成套药盒包括W下组分：
[0183] 化合物A，其与药学上可接受稀释剂或载体联合；
[0184] 化合物B，若存在时，其与药学上可接受稀释剂或载体联合；
[0185] 和帕尼单抗(维克替比），其中所述组分W适合依序、分开和/或同时给药的形式提 供。
[0186] 在一个实施方式中，所述成套药盒包括：
[0187] 含化合物A与药学上可接受稀释剂或载体的第一容器;含化合物B与药学上可接受 稀释剂或载体的第二容器(若存在）；和含帕尼单抗(维克替比）的第Ξ容器。
[0188] 所述组合药盒还能提供说明，如剂量和给药说明。运种剂量和给药说明可W是提 供给医生的类型例如药品标签，或可W是由医生提供的类型，如给患者的用法说明。
[0189] 本文所用的术语"负荷剂量"应理解成指单一剂量或短期方案的化合物A或化合物 B或帕尼单抗(维克替比），该剂量高于给予对象的维持剂量，W例如迅速增加药物的血液浓 度水平。合适地，本文所用的短期方案为：1-14天;适宜1-7天;适宜1-3天;适宜3天;适宜2 天;适宜1天。在一些实施方式中，"负荷剂量"能增加药物血液浓度到治疗有效水平。在一些 实施方式中，"负荷剂量"结合药物维持剂量能增加药物血液浓度到治疗有效水平。"负荷剂 量"可每天给予一次，或大于每天一次(如多至每天4次）。"负荷剂量"宜每天给予一次。合适 地，负荷剂量为维持剂量的2-100倍;适宜2-10倍;适宜2-5倍;适宜2倍;适宜3倍;适宜4倍； 适宜5倍。合适地，负荷剂量给予1-7天;适宜1-5天;适宜1-3天;适宜1天;适宜2天;适宜3天， 然后是维持剂量操作。
[0190] 本文所用的术语"维持剂量"应理解成指连续给药(例如至少2次）的剂量，其用于 缓慢提升化合物血液浓度到治疗有效水平，或维持该治疗有效水平。维持剂量一般每天给 予一次且维持剂量的日剂量低于负荷剂量的总日剂量。
[0191 ] 本发明组合宜在"指定时段(specified period)"内给药。
[0192] 本文所用的术语"指定时段"和其派生词指所述组合第一化合物给药与该组合的 最后一种化合物给药之间的时间间隔。例如，如果首先给予化合物A，第二给予化合物B且第 Ξ给予帕尼单抗(维克替比），则化合物A与帕尼单抗(维克替比）给药之间的时间间隔是指 定时段。当本发明一种组分每天给予大于一次时，指定时段在特定日首次给予各组分的基 础上计算。计算指定时段时，不考虑特定日中首次给药之后的所有本发明化合物给药。
[0193] 合适地，如果化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗(维克替比）在"指定时段"内给 药且非同时给予，其都在彼此约24小时内给药-此情况中，指定时段会是约24小时；其宜在 彼此约12小时内给药-此情况中，指定时段会是约12小时;其宜在彼此约11小时内给药-此 情况中，指定时段会是约11小时;其宜在彼此约10小时内给药-此情况中，指定时段会是约 10小时;其宜在彼此约9小时内给药-此情况中，指定时段会是约9小时;其宜在彼此约8小时 内给药-此情况中，指定时段会是约8小时;其宜在彼此约7小时内给药-此情况中，指定时段 会是约7小时;其宜在彼此约6小时内给药-此情况中，指定时段会是约6小时;其宜在彼此约 5小时内给药-此情况中，指定时段会是约5小时;其宜在彼此约4小时内给药-此情况中，指 定时段会是约4小时;其宜在彼此约3小时内给药-此情况中，指定时段会是约3小时;其宜在 彼此约2小时内给药-此情况中，指定时段会是约2小时;其宜在彼此约1小时内给药-此情况 中，指定时段会是约1小时，且视作同时给药。
[0194] 合适地，指定时段"给予本发明组合时，所述化合物会共给药一段"持续时间 (duration of time)"。
[0195] 本文所用的术语"持续时间"和其派生词在设及化合物A和化合物B时，指化合物A 和可选的化合物B连续给予指定天数，可选之后的连续数天内仅给予其中一种组分化合物。
[0196] 本文所用的术语"持续时间"和其派生词设及帕尼单抗(维克替比）时，指帕尼单抗 (维克替比)每周给予约1次，或适宜每2周给予约1次，连续给予指定周数。
[0197] 关于"指定时段"给药：
[0198] 合适地，化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗(维克替比)在指定时段内给予至少1 天-此情况中，持续时间会是至少1天;合适地，在治疗进程中，化合物A、可选的化合物B和帕 尼单抗(维克替比）在指定时段内连续给予至少3天-此情况中，持续时间会是至少3天;合适 地，在治疗进程中，化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗(维克替比）在指定时段内连续给予 至少5天-此情况中，持续时间会是至少5天;合适地，在治疗进程中，化合物A、可选的化合物 B和帕尼单抗(维克替比）在指定时段内连续给予至少7天-此情况中，持续时间会是至少7 天;合适地，在治疗进程中，化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗(维克替比）在指定时段内 连续给予至少14天-此情况中，持续时间会是至少14天;合适地，在治疗进程中，化合物A、可 选的化合物B和帕尼单抗(维克替比)在指定时段内连续给予至少30天-此情况中，持续时间 会是至少30天。在所有上述指定时段中，帕尼单抗(维克替比)适宜每14天给予约1次。
[0199] 合适地，如果所述组分不在"指定时段"内给予，则其依序给药。本文所用的术语 "依序给药"和其派生词指组合中的化合物A、可选的化合物B或帕尼单抗(维克替比）作为第 一组分连续给予一天或多天，接着该组合的第二组分连续给予一天或多天，然后该组合的 最后一种组分连续给予一天或多天。同样，本文考虑依序给予化合物A、可选的化合物B或帕 尼单抗(维克替比）之间采用的休药期。如本文所用，休药期是依序给予一种或多种化合物 A、化合物B和帕尼单抗(维克替比）之后W及给予本发明其它组分之前的一段时间。休药期 宜是选自W下的一段时间：1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13 天和14天。
[0200] 关于依序给药：
[0201] 合适地，化合物BW第一顺序给予，接着是可选的休药期，然后给予化合物A，之后 给予帕尼单抗(维克替比）。合适地，化合物B连续给药1-30天，接着是可选的休药期，然后化 合物A连续给药1-30天，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持 续2-10周。合适地，化合物B连续给药1-21天，接着是可选的休药期，然后化合物A连续给药 1-21天，接着是可选的休药期，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比)每2周给予1 次，持续2-10周。合适地，化合物B连续给药1-14天，接着是可选的休药期，然后化合物A连续 给药1-14天，接着是可选的休药期，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比）每2周 给予1次，持续2-10周。合适地，化合物B连续给药14天，接着是可选的休药期，然后化合物A 连续给药7天，接着是可选的休药期，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比)每2周 给予1次，持续2-10周。合适地，化合物B连续给药7天，接着是可选的休药期，然后化合物A连 续给药7天，接着是可选的休药期，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比)每2周给 予1次，持续2-10周。
[0202] 合适地，化合物AW第一顺序给予，接着是可选的休药期，然后可选给予化合物B， 之后给予帕尼单抗(维克替比）。合适地，化合物A连续给药1-30天，接着是可选的休药期，然 后化合物B可选连续给药1-30天，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比）每2周给 予1次，持续2-10周。合适地，化合物A连续给药1-21天，接着是可选的休药期，然后化合物B 可选连续给药1-21天，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续 2-10周。合适地，化合物A连续给药1-14天，接着是可选的休药期，然后化合物B可选连续给 药1-14天，接着是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周。合 适地，化合物A连续给药14天，接着是可选的休药期，然后化合物B可选连续给药14天，接着 是可选的休药期，之后帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周。合适地，化合物A连 续给药7天，接着是可选的休药期，然后化合物B连续给药7天，接着是可选的休药期，之后帕 尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周。
[0203] 合适地，帕尼单抗(维克替比）W第一顺序给予，接着是可选的休药期，然后可选给 予化合物B，接着是可选的休药期，之后给予化合物A。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给 予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，然后化合物B连续给药1-30天，接着是可选的休 药期，之后化合物A连续给药1-30天。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10 周，接着是可选的休药期，然后化合物B可选连续给药1-21天，接着是可选的休药期，之后化 合物A连续给药1-21天。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周，接着是可 选的休药期，然后化合物B可选连续给药1-14天，接着是可选的休药期，之后化合物A连续给 药1-14天。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期， 然后化合物B可选连续给药14天，接着是可选的休药期，之后化合物A连续给药14天。合适 地，帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，然后化合物B可 选连续给药7天，接着是可选的休药期，之后化合物A连续给药7天。
[0204] 合适地，帕尼单抗(维克替比）W第一顺序给予，接着是可选的休药期，然后给予化 合物A，接着是可选的休药期，之后可选给予化合物B。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给 予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，然后化合物A连续给药1-30天，接着是可选的休 药期，之后化合物B可选连续给药1-30天。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续 2-10周，接着是可选的休药期，然后化合物A连续给药1-21天，接着是可选的休药期，之后化 合物B可选连续给药1-21天。合适地，帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周，接着 是可选的休药期，然后化合物A连续给药1-14天，接着是可选的休药期，之后化合物B可选连 续给药1-14天。合适地，帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休 药期，然后化合物A连续给药14天，接着是可选的休药期，之后化合物B可选连续给药14天。 合适地，帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，然后化合 物A连续给药7天，接着是可选的休药期，之后化合物B可选连续给药7天。
[0205] 合适地，化合物AW第一顺序给予，接着是可选的休药期，然后给予帕尼单抗(维克 替比），之后可选给予化合物B。合适地，化合物A连续给药1-30天，接着是可选的休药期，然 后帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物B可 选连续给药1-30天。合适地，化合物A连续给药1-21天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗 (维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物B可选连续给药 1-21天。合适地，化合物A连续给药1-14天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗(维克替比） 每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物B可选连续给药1-14天。合适 地，化合物A连续给药14天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次， 持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物B可选连续给药14天。合适地，化合物A连续 给药7天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗(维克替比)每2周给予1次，持续2-10周，接着 是可选的休药期，之后化合物B可选连续给药7天。
[0206] 合适地，化合物BW第一顺序给予，接着是可选的休药期，然后给予帕尼单抗(维克 替比），之后给予化合物A。合适地，化合物B连续给药1-30天，接着是可选的休药期，然后帕 尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物A连续给 药1-30天。合适地，化合物B连续给药1-21天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗(维克替 比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物A连续给药1-21天。合适 地，化合物B连续给药1-14天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗(维克替比）每2周给予1 次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之后化合物A连续给药1-14天。合适地，化合物B连续 给药14天，接着是可选的休药期，然后帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接 着是可选的休药期，之后化合物A连续给药14天。合适地，化合物B连续给药7天，接着是可选 的休药期，然后帕尼单抗(维克替比）每2周给予1次，持续2-10周，接着是可选的休药期，之 后化合物A连续给药7天。
[0207] 在上述剂量给药操作中，应理解在本发明的一个实施方式中，化合物B联合帕尼单 抗(维克替比)且所述操作也应用于化合物B与帕尼单抗(维克替比）的组合。
[0208] 应理解"指定时段"给药和"依序"给药之后可W是重复给药或替代性给药操作，重 复给药或替代性给药操作之前可W是休药期。
[0209] 合适地，作为本发明所述组合一部分给予的化合物A含量(基于未成盐/未溶剂化 的量)选自约0.125mg-约lOmg;所述量宜选自约0.25mg-约9mg;所述量宜选自约0.25mg-约 8mg;所述量宜选自约0.5mg-约8mg;所述量宜选自约0.5mg-约7mg;所述量宜选自约Img-约 7mg;所述量宜为约5mg。因此，作为本发明所述组合一部分给予的化合物A含量选自约 0.125mg-约1 Omg。例如，作为本发明所述组合一部分给予的化合物A含量可W是0.125mg， 0.25mg,0.5mg,0.7 5mg,Img,1.5mg,2mg,2.5mg,3mg,3.5mg,4mg,4.5mg,5mg,5.5mg,6mg, 6.5mg,7mg,7.5mg,8mg,8.5mg,9mg,9.5mg,lOmg。
[0210] 选定量的化合物A宜一天给予1-4次。选定量的化合物A宜一天给予2次。选定量的 化合物A宜一天给予1次。合适地，化合物A给药W负荷剂量开始。合适地，负荷剂量是维持剂 量的2-100倍;适宜2-10倍;适宜2-5倍;适宜2倍;适宜3倍;适宜4倍;适宜5倍。合适地，负荷 剂量给予1-7天;适宜1-5天;适宜1-3天;适宜1天;适宜2天;适宜3天，然后是维持剂量操作。
[0211] 合适地，作为本发明所述组合一部分给予的化合物B含量(基于未成盐/未溶剂化 的量）选自约lOmg-约600mg。所述量宜选自约30mg-约300mg;所述量宜选自约30mg-约 280mg;所述量宜选自约40mg-约260mg;所述量宜选自约60mg-约240mg;所述量宜选自约 80mg-约220mg;所述量宜选自约90mg-约21 Omg;所述量宜选自约1 OOmg-约200mg;所述量宜 选自约1 lOmg-约190mg;所述量宜选自约120mg-约180mg;所述量宜选自约130mg-约170mg; 所述量宜选自约140mg-约160mg;所述量宜为150mg。因此，作为本发明所述组合一部分给予 的化合物B含量选自约lOmg-约300mg。例如，作为本发明所述组合一部分给予的化合物B含 量适宜选自 lOmg, 20mg, 30mg, 40mg, 50mg, 60mg, 70mg, 80mg, 85mg, 90mg, 95mg, lOOmg, 105mg, 1lOmg,115mg,120mg,125mg,130mg,135mg,140mg,145mg,150mg,155mg,160mg,165mg, 170mg,175mg,180mg,185mg,190mg,195mg,200mg,205mg,210mg,215mg,220mg,225mg, 230mg,235mg,240mg,245mg,250mg,255mg,260mg,265mg,270mg,275mg,280mg,285mg, 290mg，295mg和300mg。选定量的化合物B宜一天给予1-4次。选定量的化合物B宜一天给予2 次。选定量的化合物B宜一天给予1次。
[0212] 合适地，化合物B给药W负荷剂量开始。合适地，负荷剂量是维持剂量的2-100倍； 适宜2-10倍;适宜2-5倍;适宜2倍;适宜3倍;适宜4倍;适宜5倍。合适地，负荷剂量给予1-7 天;适宜1-5天;适宜1-3天;适宜1天;适宜2天;适宜3天，然后是维持剂量操作。
[0213] 帕尼单抗（维克替比）W每2周2mg/kg-30mg/kg的剂量给予；适宜每2周3mg/kg- 20mg/kg;适宜每 2 周 5mg/kg-10mg/kg;适宜每 2 周 6mg/kg。
[0214] 本发明的一个实施方式提供W下组合:一天给药1次的化合物A;-天可选给药1次 或2次的化合物B;根据上述操作给药的帕尼单抗，持续至少8周，适宜至少4周，适宜至少2 周，适宜至少10天，适宜至少7天，所有运Ξ种化合物宜在各14天阶段的第一天给药。
[0215] 如本文所用，就化合物A和化合物B指定的所有量表示为游离或未成盐化合物的 量。
[0216] 治疗方法
[0217] 认为本发明组合对受益于抑制MEK和/或B-Raf和/或EGFR的疾病有效用。
[0218] 因此，本发明还提供用于治疗的发明组合，尤其是用于治疗受益于抑制MK(和/或 B-Raf和/或EGFR的疾病，特别是癌症。
[0219] 本发明的另一方面提供治疗受益于抑制MEK和/或B-Raf和/或EGFR的疾病的方法， 所述方法包括给予本发明组合。
[0220] 本发明的另一方面提供本发明组合在生产治疗疾病药物中的应用，其中抑制MEK 和/或B-Raf和/或EGFR是有益的。
[0221] 通常，所述疾病是癌症，从而抑制MEK和/或B-Raf和/或EGFR产生有益效果。适于本 发明组合治疗的癌症示例包括但不限于头部颈部癌、乳腺癌、肺癌、结肠癌、卵巢癌和前列 腺癌的原发和转移形式。癌症宜选自：脑癌(胶质瘤）、成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成 胶质细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、Cowden病、liiermi tte-Duc los病、乳腺癌、炎性乳腺 癌、肾母细胞瘤、尤文肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、结肠癌、头部颈部癌、 肾癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、膜腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌、 成淋己细胞T细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性淋己细胞白血病、毛细胞白血病、急性 成淋己细胞性白血病、急性髓细胞白血病、AML、慢性中性粒细胞白血病、急性成淋己细胞T 细胞白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞大细胞白血病、套细胞白血病、多发性骨髓瘤巨核母细 胞白血病、多发性骨髓瘤、急性巨核细胞白血病、早幼粒细胞白血病、红白血病、恶性淋己 瘤、霍奇金淋己瘤、非霍奇金淋己瘤、淋己母细胞T细胞淋己瘤、伯基特淋己瘤、滤泡性淋己 瘤、成神经细胞瘤、膀脫癌、尿路上皮癌、肺癌、外阴癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、间皮瘤、 食管癌、唾液腺癌、肝细胞癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、GIST (胃肠道间质瘤)和睾丸癌。
[0222] 另外，待治疗的癌症示例包括Barrett腺癌;胆道癌;乳腺癌；宫颈癌;胆管癌；中枢 神经系统肿瘤，包括原发性CNS肿瘤如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤(如多形性成胶质细胞瘤） 和室管膜瘤W及继发性CNS肿瘤（即起始于中枢神经系统之外的肿瘤转移到中枢神经系 统）；结直肠癌，包括大肠结肠癌；胃癌;头部颈部癌，包括头部颈部鱗状细胞癌;血液癌，包 括白血病和淋己瘤如急性成淋己细胞性白血病、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综 合征、慢性髓细胞性白血病、霍奇金淋己瘤、非霍奇金淋己瘤、巨核母细胞白血病、多发性骨 髓瘤和红白血病;肝细胞癌;肺癌，包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌；卵巢癌;子宫内膜癌； 膜腺癌;垂体腺瘤;前列腺癌;肾癌；肉瘤;皮肤癌，包括黑素瘤;和甲状腺癌。
[0223] 合适地，本发明设及治疗或减轻选自W下的癌症严重度的方法:脑癌(胶质瘤）、成 胶质细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、Cowden病、 化ermitte-Duclos病、乳腺癌、结肠癌、头部颈部癌、肾癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、膜腺 癌、前列腺癌、肉瘤和甲状腺癌。
[0224] 合适地，本发明设及治疗或减轻选自W下的癌症严重度的方法:卵巢癌、乳腺癌、 膜腺癌和前列腺癌。
[0225] 合适地，本发明设及在包括人在内的哺乳动物中治疗或减轻癌前期综合征严重度 的方法，其中所述癌前期综合征选自：宫颈上皮内瘤样病变、意义未明的单克隆丙种球蛋白 病(MGUS)、骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、宫颈病变、皮肤捷(黑素瘤前期）、前列腺 上皮(管内）内瘤变(PIN)、导管原位癌(DCIS)、结肠息肉和重型肝炎或肝硬化。
[0226] 合适地，本发明设及治疗或减轻癌症严重度的方法，所述癌症是Raf和KRAS的野生 型或突变体且是PI3K/Pten的野生型或突变体。运包括如下患者：就Raf、KRAS和PI3K/PTEN 而言都是野生型，就Raf、KRAS和PI3K/PTEN而言都是突变体，Raf突变体和KRAS及PI3K/PTEN 野生型、Raf和KRAS野生型及P13K/PTEN突变体的患者。
[0227] 已知化合物B对含BRAF突变的癌症显示抗肿瘤效果，化合物B与帕尼单抗的组合； 和化学物A(MEKi)、化合物B与帕尼单抗的组合适于治疗含B-Raf突变的癌症。化合物B对治 疗无 BRAF突变的癌症不太有效，化学物A与帕尼单抗的组合适于治疗有和没有BRAF突变的 癌症。
[0228] 预期化学物A与帕尼单抗的组合W及化合物B与帕尼单抗的组合显示的毒性低于 W下组合:化学物A、化合物B与帕尼单抗。化学物A与帕尼单抗的组合W及化合物B与帕尼单 抗的组合是本发明的其它合适组合。
[0229] 术语"野生型"在本领域应理解为指在地方种群中出现且无基因修饰的多肤或多 核巧酸序列。"突变体"在本领域理解为与野生型多肤或多核巧酸中所见的对应氨基酸或核 酸相比，分别有至少一个氨基酸或核酸修饰的多肤或多核巧酸序列。术语突变体包括单核 巧酸多态性(SNP)，其中某一核酸链序列相较最常见(野生型)核酸链存在单碱基对区别。
[0230] 就Raf而言为野生型或突变体、就PI3K/Pten而言为野生型或突变体，W及作为野 生型或突变体的癌症由已知方法鉴定。
[0231] 例如，野生型或突变Raf或PI3K/PTEN肿瘤细胞能通过DNA扩增和测序技术、DNA和 RNA检测技术鉴定(分别包括但不限于Nodhern和Southern印迹）、和/或多种生物忍片和阵 列技术鉴定。野生型和突变多肤能通过多种技术检测，所述技术包括但不限于免疫诊断技 术如化ISA、Western印迹或免疫细胞化学。合适地，可使用焦憐酸解激活的聚合反应技术 (PAP)和/或PCR法。Liu,Q等;Human Mu化tion 23:426-436(2004).
[0232] 本发明组合可单独使用或与一种或多种其它治疗剂联用。因此，本发明的另一方 面提供含本发明组合与一种或多种其它治疗剂的另一组合，含所述组合的组合物和药物W 及所述另一组合、组合物和药物在治疗中的应用，特别是治疗易受抑制1邸和/或激酶B和/ 或EGFR影响的疾病。
[0233] 在所述实施方式中，本发明组合可与癌症治疗的其它治疗方法一起使用。特别地， 在抗肿瘤疗法中，考虑除了上述W外，用其它化疗、激素、抗体剂W及手术和/或放射治疗的 联合治疗。因此，本发明所述联合疗法包括给予化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗W及可 选使用其它治疗剂，包括其它抗肿瘤剂。运种药剂组合可一起或分开给予，分开给药时，运 可同时或W在时间上接近和相隔较长的任何顺序依序出现。在一个实施方式中，所述药物 组合包括化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗，W及可选的至少一种额外抗肿瘤剂。
[0234] 在一个实施方式中，所述另一抗癌疗法是手术和/或放射疗法。
[0235] 在一个实施方式中，所述另一抗癌疗法是至少一种额外抗肿瘤剂。
[0236] 对于所治疗易感性肿瘤具有活性的抗肿瘤剂可用于所述组合。有用的典型抗肿瘤 剂包括但不限于抗微管剂如二祗类化合物和长春花生物碱;销配合物;烧化剂如氮芥、氧氮 杂憐环(oxaza地0S地orine)、烷基横酸盐、亚硝基脈和Ξ氮締;抗生素如蔥环类抗生素、放 线菌素和博来霉素;拓扑异构酶II抑制剂如表鬼白毒素;抗代谢物如嚷岭和喀晚类似物及 抗叶酸剂化合物;拓扑异构酶I抑制剂如喜树碱;激素和激素类似物;信号转导通路抑制剂； 非受体酪氨酸血管生成抑制剂;免疫治疗剂;促调亡剂;和细胞周期信号抑制剂。
[0237] 抗微管和抗有丝分裂剂:抗微管和抗有丝分裂剂是时相特异性试剂，针对细胞周 期的Μ或有丝分裂期中的肿瘤细胞微管有活性。抗微管剂的示例包括但不限于二祗类化合 物和长春花生物碱。
[0238] 衍生自天然源的二祗类化合物是时相特异性抗癌剂，其在细胞周期的G2/M期运 作。据信二祗类化合物通过结合微管蛋白使微管的0-微管蛋白亚基稳定。然后，蛋白分解看 来受抑制，有丝分裂被阻滞且随后细胞死亡。二祗类化合物的示例包括但不限于紫杉醇和 其类似物多西他赛。
[0239] 紫杉醇，即与（2R，3S)-N-苯甲酯-3-苯基异丝氨酸的郎，20-环氧-1，2α，4,7β，10β， 13α-六径基紫杉烧-11-締-9-酬-4，10-二乙酸醋-2-苯甲酸醋-13-醋;是分离自太平洋紫杉 短叶红豆杉(Taxus brevifolia)的天然双祗产物，可作为注射液TAX0L海市售可得。其 是祗締紫杉烧家族的成员。美国已批准紫杉醇临床用于治疗难治性卵巢癌(Markman等.， Yale Journal of Biology and Medicine,64:583,1991;McGuire等.，Ann. Intern,Med., 111:273,1989)和治疗乳腺癌化olmes等.，J.化t.Cancer Inst. ,83:1797,1991.)。其是治 疗皮肤肿瘤化inzig等.，P;roc. Am. Soc .Clin .Oncol. , 20 :46)和头部颈部肿瘤(Forastire 等.，Sem.化col. ,20:56,1990)的潜在候选物。所述化合物还显示治疗多囊性肾病(Woo等.， Nature，368:750.1994)、肺癌和追疾的潜力。用紫杉醇治疗患者导致骨髓抑制(《多细胞系》 (multiple cell lineages)，Ignoff ,R. J.等，Cancer Chemotherapy Pocket Guide(癌症 化疗袖珍指南），1998)，所述抑制设及超过阔值浓度(50nM)给药的持续时间化earns，C.M. 等.，Seminars in Oncology,3(6)16-23页，1995)。
[0240] 多西他赛，即与郎，20-环氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六径基紫杉烧-11-締-9-酬-4- 乙酸醋-2-苯甲酸醋Ξ水合物的（2R，3S)-N-簇基-3-苯基异丝氨酸，Ν-叔下基醋，13-醋；可 作为注射液TAXOTE民E厳市售可得。多西他赛适用于治疗乳腺癌。多西他赛是紫杉醇 q.v.的半合成衍生物，用萃取自欧洲紫杉针叶的天然前体10-脱乙酷-己卡亭ΙΠ 制备。
[0241] 长春花生物碱是获自长春花属植物的时相特异性抗肿瘤剂。长春花生物碱通过特 异性结合微管蛋白而在细胞周期的Μ期(有丝分裂)起作用。因此，结合的微管蛋白分子不能 聚合成微管。认为有丝分裂滞留于中期，随后是细胞死亡。长春花生物碱的示例包括但不限 于长春花碱、长春新碱和长春瑞滨。
[0242] 长春花碱，即硫酸长春碱，可作为注射液VELBAN面市售可得。尽管其可能适合 多种实体瘤的二线治疗，其主要适于治疗睾丸癌和多种淋己瘤，包括霍奇金病;淋己细胞性 淋己瘤和组织细胞性淋己瘤。骨髓抑制是长春花碱的剂量限制副作用。
[0243] 长春新碱，即22-氧代长春碱硫酸盐，可作为注射液ONCOVIN?市售可得。长春 新碱适合治疗急性白血病，还发现用于霍奇金和非霍奇金恶性淋己瘤的治疗方案。秀头症 和神经系统影响是长春新碱最常见的副作用，骨髓抑制和胃肠粘膜炎影响出现的程度较 小。
[0244] 长春瑞滨，即3'，4'-二去氨-4'-去氧-C'-去甲长春碱[R-(R*，R*)-2,3-二径基下 二酸盐（1:2)(盐）]，可作为酒石酸长春瑞滨注射液(NAVELB1NE@)市售可得，其是半合 成长春花生物碱。长春瑞滨适合作为单一药剂或与其它化疗剂如顺销联合治疗多种实体 瘤，尤其是非小细胞肺癌、晚期乳腺癌和激素抵抗性前列腺癌。骨髓抑制是长春瑞滨最常见 的剂量限制副作用。
[0245] 销配合物：销配合物是非时相特异性抗癌剂，其与DNA相互作用。销复合物进入肿 瘤细胞，经历水合作用并与DNA形成链内和链间交联，引起对肿瘤的不利生物作用。销配合 物的示例包括但不限于奥沙利销、顺销和卡销。
[0246] 销，良W顿式二氨二氯销，可作为注射液PLATINOL贷市售可得J顿销主要适于 治疗转移性睾丸癌和卵巢癌W及晚期膀脫癌。
[0247] 卡销，即二氨[1，1-环下烧-二簇酸（2-)-0，0 ']销，可作为注射液 PARAPLATIN?市售可得。卡销主要适合晚期卵巢癌的一线和二线治疗。
[0248] 烧化剂:烧化剂是非时相特异性抗癌剂和强亲电体。通常，烧化剂通过烧化与DNA 形成共价键，运是经DNA分子的亲核部分如憐酸、氨基、琉基、径基、簇基和咪挫基团。运类烧 化破坏核酸功能，导致细胞死亡。烧化剂的示例包括但不限于氮芥如环憐酷胺、美法仑和苯 下酸氮芥;烷基横酸盐如白消安;亚硝基脈如卡莫司汀;和Ξ氮締如达卡己嗦。
[0249] 环憐酷胺，即2-[双（2-氯乙基）氨基]四氨-2H-1，3，2-氧氮杂憐环 (oxazaphosphorine)-2-氧化物一水合物，可作为注射液或片剂CYTOXAN?市售可得。 环憐酷胺适合作为单一药剂或与其它化疗剂联合治疗恶性淋己瘤、多发性骨髓瘤和白血 病。
[0250] 美法仑，即4-[双（2-氯乙基）氨基]-^苯丙氨酸，可作为注射液或片剂 ALKERAN?市售可得。美法仑适合多发性骨髓瘤和非可切除卵巢癌的姑息疗法。骨髓抑 制是美法仑最常见的剂量限制副作用。
[ο巧1]苯下酸氮芥，即4-[双(2-氯乙基)氨基]苯下酸，可作为LEUKE民AN?片剂市售 可得。苯下酸氮芥适合慢性淋己性白血病、恶性淋己瘤如淋己肉瘤、巨滤泡性淋己瘤和霍奇 金病的姑息疗法。
[0巧^ 白消安，即1，4-下二醇二甲烧横酸醋，可作为MYLERAN?片剂市售可得。白消 安适合慢性髓细胞性白血病的姑息疗法。
[0253] 卡莫司汀，即1,3-[双(2-氯乙基)-1-亚硝基脈，可作为单一冻干材料瓶BiCNU? 市售可得。卡莫司汀适合作为单一药剂或与其它药剂联合W姑息治疗脑肿瘤、多发性骨髓 瘤、霍奇金病和非霍奇金淋己瘤。
[0巧4]达卡己嗦，即5-(3,3-二甲基-1-Ξ氮締）咪挫-4-簇酷胺，可作为单一材料瓶 DTIC-Dome?市售可得。达卡己嗦适合治疗转移性恶性黑素瘤和与其它药剂联用于霍奇 金病的二线治疗。
[02W]抗生素抗肿瘤药:抗生素抗肿瘤药是结合或插入DNA的非时相特异性试剂。通常， 运类作用产生稳定的DNA复合体或链断裂，其破坏核酸的普通功能，导致细胞死亡。抗生素 抗肿瘤药的示例包括但不限于放线菌素如更生霉素，蔥环霉素如柔红霉素和阿霉素；W及 博来霉素。
[0256] 更生霉素，也称为放线菌素 D，可作为COSM EGEN?注射形式市售可得。更生霉 素适合治疗肾母细胞瘤和横纹肌肉瘤。
[0巧7] 柔红霉素，即（8S-顺式-)-8-乙酷基-10-[(3-氨基-2,3,6-Ξ去氧-日寸-来苏己化 喃基)氧基]-7,8,9,10-四氨-6,8,11-Ξ径基-1-甲氧基-5,12并四苯二酬盐酸盐，可作为 DAUNOXOME⑥脂质体注射形式或CERUBIDINE?注射形式市售可得。肉红霉素适合 急性非淋己细胞性白血病和晚期HIV相关卡波西氏肉瘤治疗中的缓解诱导。
[0258] 阿霉素，即（8S,10S)-l〇-[ (3-氨基-2,3,6-二去氧-a-L-来苏己R比喃基)氧基]-8- 乙醇酷基，7,8,9,10-四氨-6,8,11-Ξ径基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酬盐酸盐，可作为注 射形式投UBEX：⑥或ADRIAMYCINKDF渴市售可得。阿霉素主要适合治疗急性成淋己细胞性 白血病和急性成髓细胞性白血病，但也是治疗一些实体瘤和淋己瘤的有用组分。
[0259] 博来霉素，即分离自轮丝链霉菌(Streptomyces vedicillus)菌株的细胞毒性糖 肤抗生素混合物，可作为掛LENQXANE通市售可得。博来霉素适合作为单一药剂或与其它 药剂联合W姑息治疗鱗状细胞癌、淋己瘤和睾丸癌。
[0260] 拓扑异构酶II抑制剂:拓扑异构酶II抑制剂包括但不限于表鬼白毒素。
[0261] 表鬼白毒素是获自曼德拉草植物的时相特异性抗肿瘤剂。表鬼白毒素通常影响细 胞周期中S和G2期的细胞，运是通过与拓扑异构酶II和DNA形成Ξ元复合物，导致DNA链断 裂。所述链断裂积聚，随后细胞死亡。表鬼白毒素的示例包括但不限于依托泊巧和替尼泊 巧。
[0262] 依托泊巧，即4'-脱甲基-表鬼白毒素9[4,6-0-(R)-亚乙基-β-D-化喃葡萄糖巧]， 可作为注射液或胶囊VePESID?市售可得，且通常称为VP-16。依托泊巧适合作为单一药 剂或与其它化疗剂联合治疗睾丸癌和非小细胞肺癌。 惦63] 替尼泊巧，即4'-脱甲基-表鬼白毒素9[4,6-0-(R)-嚷吩亚甲基-β-D-化喃葡萄糖 巧]，可作为注射液VUMON@市售可得，且通常称为VM-26。替尼泊巧适合作为单一药剂或 与其它化疗剂联合治疗儿童的急性白血病。
[0264] 抗代谢抗肿瘤剂:抗代谢抗肿瘤剂是在细胞周期S期(DM合成)作用的时相特异性 抗肿瘤剂，运是通过抑制DNA合成或者抑制嚷岭或喀晚碱基合成并从而限制DNA合成。因此， S期不推进，且随之细胞死亡。抗代谢抗肿瘤剂的示例包括但不限于氣尿喀晚、氨甲噪岭、阿 糖胞巧、琉基嚷岭、硫鸟嚷岭和吉西他滨。
[0265] 5-氣尿喀晚，即5-氣-2,4-( 1H，3H)喀晚二酬，作为氣尿喀晚市售可得。给予5-氣尿 喀晚导致胸巧酸合成抑制且还渗入RNA和DNA。所得结果通常是细胞死亡。5-氣尿喀晚适合 作为单一药剂或与其它化疗剂联合治疗乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌和膜腺癌。其它氣喀 晚类似物包括5-氣脱氧尿巧(氣尿巧)和5-氣脱氧尿巧单憐酸盐。
[0266] 阿糖胞巧，即4-氨基-Ι-β-D-阿拉伯巧喃糖基-2( 1H)-喀晚酬，作为 €￥了05,\民-1]@市售可得，且通常称为Ara-C。认为阿糖胞巧通过抑制DNA链延长而在S期 显示细胞周期特异性，运是通过阿糖胞巧末端渗入增长的DNA链。阿糖胞巧适合作为单一药 剂或与其它化疗剂联合治疗急性白血病。其它胞巧类似物包括5-氮胞巧和2 '，2 二氣脱氧 胞喀晚核巧(吉西他滨）。 惦67] 琉基嚷岭，即1,7-二氨-6H-嚷岭-6-硫酬一水合物，作为PU民INETHOL@市售可 得。琉基嚷岭通过未指明机制抑制DNA合成而在S期显示细胞周期特异性。琉基嚷岭适合作 为单一药剂或与其它化疗剂联合治疗急性白血病。有用的琉基嚷岭类似物是硫挫嚷岭。 惦6引硫鸟嚷岭，即2-氨基-1,7-二氨-6H-嚷岭-6-硫酬，作为TABLOID?市售可得。硫 鸟嚷岭通过未指明机制抑制DNA合成而在S期显示细胞周期特异性。硫鸟嚷岭适合作为单一 药剂或与其它化疗剂联合治疗急性白血病。其它嚷岭类似物包括喷司他下、赤型-径基壬基 腺嚷岭(eiyt虹ohy化oxynonyladenine)、憐酸氣达拉滨和克拉屈滨。
[0269] 吉西他滨，即2' -脱氧-2 '，2' -二氣胞喀晚单盐酸盐(β-异构体），作为GEMZA民? 市售可得。吉西他滨通过阻断细胞前进通过G1/S期边界而在S期显示细胞周期特异性。吉西 他滨适合与顺销联合治疗局部晚期非小细胞肺癌且单独治疗局部晚期膜腺癌。
[0270] 氨甲噪岭，即Ν-[4[[(2,4-二氨基-6-噪晚基）甲基]甲氨基]苯甲酯基]-心谷氨酸， 作为甲氨噪岭钢市售可得。氨甲噪岭通过抑制嚷岭核巧酸和胸巧酸合成所需的二氨叶酸还 原酶来抑制DNA合成、修复和/或复制，而在S期显示对细胞周期特异性的影响。氨甲噪岭适 合作为单一药剂或与其它化疗剂联合治疗绒毛膜癌、脑膜白血病、非霍奇金淋己瘤W及乳 腺癌、头部癌、颈部癌、卵巢癌和膀脫癌。
[0271] 拓扑异构酶I抑制剂:喜树碱类化合物包括喜树碱和喜树碱衍生物，其可得或作为 拓扑异构酶I抑制剂正在开发中。认为喜树碱类化合物的细胞毒性与其拓扑异构酶I抑制活 性相关。喜树碱类化合物的示例包括但不限于伊立替康、拓扑替康和不同光学形式的下述 7- (4-甲基赃嗦-亚甲基)-10，11 -亚乙二氧基-20-喜树碱。
[0272] 盐酸伊立替康，即（4S)-4，11-二乙基-4-径基-9-[(4-赃晚基赃晚)幾氧基]-1Η-化 喃并[3'，4'，6,7]吗I嗦并[1，2-b]哇嘟-3，14(4H，12H)-二酬盐酸盐，作为注射液 CAMPT0SA民通市售可得。伊立替康是喜树碱衍生物，与其活性代谢物SN-38-起结合拓 扑异构酶I-DNA复合体。认为细胞毒性是不可修复双链断裂的结果，其由拓扑异构酶I:DNA: 伊立替康或SN-38S元复合物与复制酶相互作用导致。伊立替康适合治疗结肠或直肠的转 移性癌症。
[027；3]盐酸拓扑替康，即（S)-l〇-[(二甲基氨基）甲基]-4-乙基-4,9-二径基-1H-化喃并
[3'，4'，6,7]吗|嗦并[l，2-b]-哇嘟-3-14(4H，12H)-二酬单盐酸盐，作为注射液 HYCAMT脚⑥市售可得。拓扑替康是喜树碱衍生物，其结合拓扑异构酶I-DNA复合体并防 止单链断裂再连接，所述断裂由拓扑异构酶I响应DNA分子扭应变导致。拓扑替康适合转移 性卵巢癌和非小细胞肺癌的二线治疗。
[0274] 激素和激素类似物:激素和激素类似物是治疗其中激素与癌生长和/或不生长之 间存在关联的癌症的有用化合物。用于癌症治疗的激素和激素类似物的示例包括但不限 于：肾上腺皮质类固醇类，如强的松和泼尼松龙，其用于治疗儿童的恶性淋己瘤和急性白血 病;氨鲁米特和其它芳香酶抑制剂，如阿那曲挫、来曲挫、伏氯挫和依西美坦，用于治疗肾上 腺皮质癌和含雌激素受体的激素依赖性乳腺癌;孕酬类化合物，如醋酸甲地孕酬，用于治疗 激素依赖性乳腺癌和子宫内膜癌;雌激素，雄激素和抗雄激素，如氣他米特、尼鲁米特、比卡 鲁胺、醋酸环丙氯地孕酬W及5α-还原酶，如非那雄胺和度他雄胺，用于治疗前列腺癌和良 性前列腺肥大;抗雌激素，如它莫西芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、舰昔芬，W及选择性 雌激素受体调节剂(沈RMS)，如美国专利号5,681，835、5,877,219和6,207,716所述的那些， 用于治疗激素依赖性乳腺癌和其它易感性癌症;促性腺激素释放激素(Gn畑)和其类似物， 其刺激黄体化激素(LH)和/或促滤泡激素(FSH)释放W治疗前列腺癌，例如LHRH激动剂和括 抗剂，如醋酸戈舍瑞林和亮脯利特Quprolide)。
[0275] 信号转导通路抑制剂:信号转导通路抑制剂是阻断或抑制引起胞内变化的化学过 程的抑制剂。如本文所用，此变化是细胞增殖或分化。用于本发明的信号转导抑制剂包括W 下的抑制剂:受体酪氨酸激酶、非受体酪氨酸激酶、SH2/SH3结构域阻断剂、丝氨酸/苏氨酸 激酶、憐脂酷肌醇3-激酶、肌醇信号传递和Ras癌基因的抑制剂。
[0276] 数种蛋白酪氨酸激酶催化细胞生长调节所设及多种蛋白中特定酪氨酷残基的憐 酸化。运些蛋白酪氨酸激酶能大致分成受体或非受体激酶。
[0277] 受体酪氨酸激酶是跨膜蛋白，具有胞外配体结合域、跨膜结构域和酪氨酸激酶结 构域。受体酪氨酸激酶参与细胞生长调节且一般称为生长因子受体。许多此类激酶的不恰 当或不受控活化，即异常激酶生长因子受体活性，例如过表达或突变，显示导致细胞生长不 受控。因此，所述激酶的异常活性与恶性组织生长相关。因而，运类激酶的抑制剂能提供癌 症治疗方法。生长因子受体包括例如表皮生长因子受体化GFr)、血小板衍生生长因子受体 (PDGFr)、erbB2、erbB4、ret、血管内皮生长因子受体(VEGFr)、有免疫球蛋白样和表皮生长 因子同源结构域的酪氨酸激酶(TIE-2)、膜岛素生长因子-KIGFI)受体、巨隧细胞集落刺激 因子（cfms)、BTK、ckit、cmet、成纤维细胞生长因子（FGF)受体、Trk受体（TrkA、TrkB和 TrkC)、肝配蛋白（e地)受体和RET原癌基因。数种生长受体抑制剂正在开发中且包括配体括 抗剂、抗体、酪氨酸激酶抑制剂和反义寡核巧酸。生长因子受体和抑制生长因子受体功能的 试剂描述于例如肪化，John C. ,Εχρ.Opin.Ther.Patents(2000) 10(6):803-818;化awver等 DDT第2卷第2期，1997年2月；和Lofts，F.J.等，"作为祀标的生长因子受体(Growth factor receptors as targets)",《癌症化疗的新分子祀标》（New Molecular Targets for Cancer 畑emotherapy),Workman,Paid和Kerr,David编，伦敦的CRC出版社（CRCpress) 1994。
[0278] 非生长因子受体激酶的酪氨酸激酶称为非受体酪氨酸激酶。用于本发明的非受体 酪氨酸激酶是抗癌药的祀点或潜在祀点，包括cS;rc、Lck、Fyn、Yes、Jak、cAbl、FAK(粘着斑激 酶）、布鲁顿酪氨酸激酶(Brutons tyrosine kinase)和Bcr-Abl。运类抑制非受体酪氨酸激 酶功能的非受体激酶和试剂描述于Sinh，S.和Corey，S.J.，（ 1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8(5):465_80;和Bolen,J.B.,Brugge,J.S., (1997)Annual review of Immunology.15:371-404。
[0279] SH2/SH3结构域阻断剂是破坏多种酶或衔接蛋白中SH2或SH3结构域结合的试剂， 所述酶或衔接蛋白包括PI3-K p85亚基、Src家族激酶、衔接分子（Shc、Crk、Nck、Grb2WP Ras-GAP。作为抗癌药祀标的細2/細3结构域描述于Smithgall，T.E. (1995)，Journal of Pharmacological and Toxicological Methods.34(3)125-32。
[0280] 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂包括MAP激酶级联阻断剂，其包括Raf激酶(rafk)、丝裂 原或胞外调节激酶(MEK)和胞外调节激酶巧服)的阻断剂;蛋白激酶C家族成员阻断剂，包括 PKC阻断剂(α、β、丫、ε、μ、λ、t、ζ)。IkB激酶家族（IKKa、IK肺)阻断剂、P邸家族激酶阻断剂、 akt激酶家族成员阻断剂和TGFi3受体激酶阻断剂。运类丝氨酸/苏氨酸激酶和其抑制剂描述 于Yamamoto,T.,Taya,S.,Kaibuchi,Κ.,(1999)Journal of Biochemistry.126(5)799- 803;B;rodt,P,Samani ,A.,和化vab,R. (2000) 'Biochemical Pharmacology,60.1101-1107; Massague,J.,Weis-Garcia,F.(1996)Cancer Surveys.27:41-64;Philip,P.A.,和Harris, A.L.(1995),Cancer Treatment and Research.78:3-27,Lackey,K.等Bioorganic and Medicinal 化emist巧 Letters，（ 10)，2000，223-226;美国专利号6，268，391;和Madinez- lacaci'L.等，Int.J.&nce;r(2000) ,88(1) ,44-52。
[0281] 憐脂酷肌醇3-激酶家族成员的抑制剂也用于本发明，包括PI3-激酶、ATM、DNA-PK 和 Ku 的阻断剂。运些激酶参见 Abraham,R.T. (1996),Current Opinion in Immunology.8 (3)412-8;Canman,C.E.,Lim,D.S.(1998)'Oncogene 17(25)3301-3308;Jackson,S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology.29(7):935-8;和 Zhong,H.等，（Mincer res,(2000)60(6),1541-1545。
[0282] 本发明还使用肌醇信号传递抑制剂，如憐脂酶邱且断剂和肌醇类似物。运些信号抑 制剂描述于化wis,G.和Kozikowski A. ,(1994)《癌症化疗的新分子祀标》,F*aul Workman和 David Kerr编，伦敦的CRC出版社1994。
[0283] 另一组信号转导通路抑制剂是Ras癌基因抑制剂。运类抑制剂包括法呢基转移酶、 彼牛儿基-彼牛儿基转移酶和CAAX蛋白酶的抑制剂W及反义寡核巧酸、核酶和免疫治疗。运 种抑制剂显示在含野生型突变ras的细胞中阻断ras活化，从而用作抗增殖剂。Ras癌基因抑 制参见Scharovsky ,0.G. ,Rozados ,V.R. 'Gervasoni , S. I .Matar ,Ρ. (2000) Journal of Biomedical Science.7(4)292-8;Ashby,M.N.(1998).Current Opinion in Lipidology.9 (2)99-102;和BioChim.Bio地ys.Acta,(19899)1423(3):19-30。
[0284] 如上所述，受体激酶配体结合的抗体括抗剂也可用作信号转导抑制剂。该组信号 转导通路抑制剂包括使用受体酪氨酸激酶胞外配体结合域的人源化抗体。例如，Imclone C225EGFR特异性抗体（参见Green，M. C .等，《实体瘤的单克隆抗体疗法》（Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors),(Mincer Treat.Rev.,(2000),26(4),269-286); Herceptin殺erbB2抗体(参见《乳腺癌中的酪氨酸激酶信号传递:erbB家族受体酪氨酸激 酉每》（Tyrosine Kinase Si邑nailing in Breast c曰ncer:erbB Family Receptor Tyrosine Kinases),化 east cancer Res. ,2000,2(3), 176-183);和 2CB VEGFR2 特异性抗体（参见 化ekkeη，R. A.等，《单克隆抗VEGF抗体选择性抑制VEGFR2活性可阻断小鼠的肿瘤生长》 (Selective Inhibition of VEGFR2Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice),Cancer Res.(2000)60,5117-5124)。
[0285] 抗血管生成剂:还可使用抗血管生成剂，包括非受体Mm(血管生成抑制剂。抗血管 生成剂，如抑制血管内皮生长因子作用的那些（例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单 抗[Avastin?])和通过其它机制作用的化合物(例如利诺胺、整合素 ανβ3功能的抑制剂、内 皮抑素和血管抑素）；
[0286] 免疫治疗剂:用于免疫治疗方案的试剂还可与式（I)化合物联用。免疫治疗方法包 括例如增加患者肿瘤细胞免疫原性的离体或体内方法，如用细胞因子例如白介素2、白介素 4或粒细胞-巨隧细胞集落刺激因子转染，减少Τ细胞无能的方法，用经转染免疫细胞如细胞 因子转染树突细胞的方法，用细胞因子转染肿瘤细胞系的方法和用抗独特型抗体的方法。
[0287] 促调亡剂:用于促调亡方案的试剂(如bd-2反义寡核巧酸)也可用于本发明组合。
[0288] 细胞周期信号转导抑制剂:细胞周期信号转导抑制剂可抑制参与细胞周期控制的 分子。称为细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK)的蛋白激酶家族和其与称为细胞周期蛋白 的蛋白家族相互作用可控制前进通过真核细胞周期。不同细胞周期蛋白/CDK复合体的配位 活化和失活对正常通过细胞周期是必须的。数种细胞周期信号转导抑制剂正在开发中。例 如，包括CDK2、CDK4和CDK6在内的细胞周期蛋白依赖性激酶和其抑制剂的示例描述于例如 Rosania等，Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(2):215-230。
[0289] 在一个实施方式中，本发明组合包括式I化合物或其盐或溶剂化物W及至少一种 选自W下的抗肿瘤剂:抗微管剂、销配合物、烧化剂、抗生素、拓扑异构酶II抑制剂、抗代谢 物、拓扑异构酶I抑制剂、激素和激素类似物、信号转导通路抑制剂、非受体酪氨酸MEK血管 生成抑制剂、免疫治疗剂、促调亡剂和细胞周期信号转导抑制剂。
[0290] 在一个实施方式中，本发明组合包括式I化合物或其盐或溶剂化物W及至少一种 抗肿瘤剂，所述试剂是选自二祗类化合物和长春花生物碱的抗微管剂。
[0291] 在另一个实施方式中，所述至少一种抗肿瘤剂是二祗类化合物。
[0292] 在另一个实施方式中，所述至少一种抗肿瘤剂是长春花生物碱。
[0293] 在一个实施方式中，本发明组合包括式I化合物或其盐或溶剂化物W及至少一种 抗肿瘤剂，所述抗肿瘤剂是销配合物。
[0294] 在另一个实施方式中，所述至少一种抗肿瘤剂是紫杉醇、卡销或长春瑞滨。
[02M]在另一个实施方式中，所述至少一种抗肿瘤剂是卡销。
[0296] 在另一个实施方式中，所述至少一种抗肿瘤剂是长春瑞滨。
[0297] 在另一个实施方式中，所述至少一种抗肿瘤剂是紫杉醇。
[0298] 在一个实施方式中，本发明组合包括式I化合物或其盐或溶剂化物W及至少一种 抗肿瘤剂，所述试剂是信号转导通路抑制剂。
[0299] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是生长因子受体激酶VEGFR2、 TIE2、PDGFR、BTK、erbB2、EGFr、IGFR-1、TrkA、TrkB、TrkC 或 c-f ms 的抑制剂。
[0300] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是丝氨酸/苏氨酸激酶rafk、akt 或PKC-ze化的抑制剂。
[0301] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是选自src激酶家族的非受体酪 氨酸激酶的抑制剂。
[0302] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是c-src的抑制剂。
[0303] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是选自法呢基转移酶和彼牛儿 基-彼牛儿基转移酶抑制剂的Ras癌基因抑制剂。
[0304] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是选自PI3K的丝氨酸/苏氨酸激 酶的抑制剂。
[0305] 在另一个实施方式中，所述信号转导通路抑制剂是双重EG化/erbB2抑制剂，例如 N-I3-氯-4-[(3-氣苯甲基)氧基]苯基}-6-[5-({[2-(甲横酷基）乙基]氨基}甲基)-2-巧喃 基]-4-哇挫嘟胺(结构如下）：
[0306]
[0307] 在一个实施方式中，本发明组合包括式I化合物或其盐或溶剂化物W及至少一种 抗肿瘤剂，所述抗肿瘤剂是细胞周期信号抑制剂。
[0308] 在另一个实施方式中，细胞周期信号转导抑制剂是CDK2、CDK4或CDK6的抑制剂。
[0309] 在一个实施方式中，本发明方法和应用中的哺乳动物是人。
[0310] 如所述，向人给予治疗有效量的本发明组合(化合物A、可选的化合物B和帕尼单抗 (维克替比））。通常，所给予本发明试剂的治疗有效量取决于许多因素，包括例如对象年龄 和体重、需要治疗的精确病症、病症的严重度、制剂性质和给药途径。最后，所述治疗有效量 由主治医生判断。
[0311] 根据已知程序测试本发明组合的功效、优势和协同性质。合适地，根据W下组合细 胞增殖试验测试本发明组合的功效、优势和协同性质。细胞W500个细胞/孔接种于384孔板 的培养基中，所述培养基适合各细胞类型并补充有10%FBS和1%青霉素/链霉素，37°C，5% 0)2下过夜解育。在384孔板上从左到右用化合物A稀释液(20种稀释液，包括不含化合物，根 据化合物从l-20mM开始2倍稀释格栅方式处理细胞;还在384孔板上从上到下用化合物B 处理(20种稀释液，不含化合物，根据化合物从l-20mM开始2倍稀释）；还用帕尼单抗(维克替 比）处理并如上再解育72小时。一些情况下，化合物W交错方式添加且解育时间能延长多至 7天。细胞生长用CellTiter-Gk)底试剂根据厂商操作测量且信号在PerkinElmer 化Vision?读取仪上读取，设为发光模式0.5秒一个读数。数据如下分析。
[0312] 结果表示为t = 0值的百分数并针对化合物浓度作图。t = 0值标准化到100%，代表 化合物添加时存在的细胞数。各化合物和/或化合物组合的细胞反应如下测定:用4或6参数 曲线拟合细胞活力与浓度，采用IDBS XLfit插件用于Microsoft Exce软件并测定50%抑制 细胞生长所需的浓度(glCso)。通过减去不含细胞的孔的值来作背景校正。对于各药物组合， 组合指数(CI)、超过最高单药物的量化0HSA)和超过Bliss的量化OBliss)根据已知方法计 算，例如Qiou和Talalay(1984)Advances in Enzyme Regulation,22,37-55;和Berenbaum, MC( 1981 )Adv.化ncer Research, 35,269-335所述。
[0313 ] w下证明化合物A (MEKi -曲美替尼）、化合物B (BRAFi -达拉菲尼）和其与EGFR抑制 剂组合的体外细胞生长抑制，在肿瘤细胞系中使用帕尼单抗。
[0314]试验 1 [031引方法
[0316] 细胞系和生长条件
[0317] 人结肠肿瘤细胞系Col〇-205、HT-29、服0、5胖1417、1^5411闲^人黑素瘤细胞系4375 来自ATCC。所有细胞系在含10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基中培养。
[0318] 细胞生长抑制试验和组合数据分析。
[0319] 所有细胞在细胞接种前最少培养72小时。细胞在96孔组织培养板(NUNC136102)的 RPMI培养基中W500/孔测定，所述培养基含10%FBSW用于所有细胞。接种后约24小时，细 胞暴露于10个3倍连续稀释的化合物B或化合物B与EGFR抑制剂(本文所用的帕尼单抗)的组 合，恒定摩尔比是10:1，有或没有添加化Μ化合物A。细胞在化合物存在下解育7天。ATP水平 通过加入Cell TiterGlo⑥（普洛麦格(Promega)根据厂商操作测定。简言之，向各板加入 Cell TiterGlo⑩，解育30分钟，然后在SpectraMax L酶标仪上读取发光信号，积分时间为 0.5秒。
[0320] 用化合物或化合物组合处理7天后评估细胞生长抑制，并与载剂(DMS0)所处理细 胞的信号作比较。相对于载剂(DMS0)处理的对照孔计算细胞生长。
[0321] 细胞用化合物处理48小时后，通过蛋白质印迹分析检测细胞信号传递和调亡标记 物。
[0322] 结果：
[0323] MEK抑制剂化合物A、BRAF抑制剂化合物B和其与EGFR抑制剂(本文所用的帕尼单 抗）组合的细胞生长抑制效果在5个BRAF V600E突变人CRC肿瘤细胞系Col〇-205、HT-29、 服0、SW1417、LS411财PA375黑素瘤细胞系中测定。如图1所示例，C〇1〇-205、HT-29、LS411N和 A375细胞系对单独的化合物A和化合物B都敏感。SW1417和RK0耐受单独的化合物A和化合物 B。单独的帕尼单抗在所有6个细胞系中失活。在3/5的BRAF-突变CRC细胞系HT-29、LS411N和 SW1417中，加入帕尼单抗使单独化合物B、或化合物A与化合物B组合的敏感性提高和/或细 胞生长抑制增强。细胞生长抑制敏感性顺序为：
[0324] EGFRi+化合物A+化合物B〉化合物A+化合物B〉单独化合物B;EGFRi+化合物A+化合 物B〉EGFRi+化合物B。相反，另2个CRC细胞系（Colo-205和服0)和黑素瘤细胞系(A375)不显 示与所有巧巾EGFRi的组合益处或几乎没有。
[0325] 细胞用化合物处理48小时后，通过蛋白质印迹分析检测MAPK和PI3K信号传递及细 胞调亡。如图2所示例，向化合物B或化合物A与化合物B的组合加入EGFR抑制剂帕尼单抗导 致卵邸K持续抑制；且cPARP测量到的细胞调亡更多。EGFR抑制剂帕尼单抗、化合物A和化合 物B的Ξ重组合对抑制P祀服和pS6W及增加 PARP切割最有效，前者是MAPK和PI3K信号传递 的量度，后者是HT29细胞中细胞调亡的量度。通过化合物处理没有检测到EGFR和憐酸化 EGFR表达水平的明显变化。
[0326] 试验 2 [0327] 方法
[0328] BRAFV600E突变CRC患者源性肿瘤异种移植模型
[03巧]在雌性裸小鼠中建立的Co-012和CO-018BRAFV600E CRC患者源性肿瘤异种移植 (PDX)内评估体内抗肿瘤功效。肿瘤生长通过皮下植入肿瘤碎片(fragment)来起始，所述碎 片是从原发性肿瘤移出的5(C〇-012)或6(C〇-018)次体内传递。达拉菲尼和曲美替尼分别W 30和Img/kg给药，口服管饲(P.O.)，每天一次，连续28天(qd X 28)。帕尼单抗W30mg/kg腹 膜内（i.P.)给药，每周两次，持续4周(biwk X 4)。对照小鼠接受口服载剂(0.5%径丙甲纤 维素:0.2% Tween⑥.80，溶于去离子水）。在6组小鼠 (n = 8只/组）中于第1天开始给药，所述 小鼠有已建立的Co-012肿瘤(平均体积163-167mm3)和Co-018肿瘤(平均体积119-123mm3)。 当Co-012和Co-018肿瘤分别达到500mm3和lOOOmmS体积终点或在第60天时（W先到者为 准），处死小鼠。功效测定为肿瘤生长延迟(TGD)，药物治疗相比对照小鼠的平均终点时间 (TTE)增加，W及来自生存曲线的时序检验（logrank test)比较。对数转换的肿瘤体积用 AN0VA分析，拟合用于治疗的范围。然后，用相关原始P值计算经拟合治疗均值之间的差异。 由于多重性，随后进行递减P值调整。调整的P值<0.05视作显著。
[0330] 结果
[0331] 达拉菲尼、达拉菲尼和曲美替尼，与帕尼单抗的组合在2个服AFV600E突变CRC患者 源性肿瘤异种移植(PDX)中增强抗肿瘤活性。
[0332] 在雌性裸小鼠中建立的2个BRAFV600E CRC患者源性肿瘤异种移植(PDX)内评估单 独或组合的帕尼单抗、达拉菲尼、达拉菲尼和曲美替尼的抗肿瘤效果。一种PDX携带 PIK3CAHid47k 突变(Co-018)，而另一种(Co-012)是 PIK3CA 野生型。图 3显示 Co-012 和 Co-018 肿 瘤中EGFR、ERK和AKT的基因突变背景及基线憐酸和总蛋白水平。两种肿瘤都有高EGFR和 pEGFR表达水平W及活性MAPK AKT信号转导通路，由免疫组化(1肥)测量。
[0333] 如图4所示，CO-012PDX模型中，达拉菲尼单一疗法和达拉菲尼/曲美替尼组合未显 示显著肿瘤生长延迟(TGD)，而帕尼单抗单一疗法显示70%TGD，3/8(38%)60天存活者。达 拉菲尼/帕尼单抗双重组合产生108%TGD(^0.05相比载剂、单独达拉菲尼、单独帕尼单抗） 和7/8(88%)60天存活者。达拉菲尼/曲美替尼/帕尼单抗Ξ重组合功效最大，显示108%TGD (p<0.05相比载剂、达拉菲尼和曲美替尼组合、帕尼单抗)和8/8(100% )60天存活者。如图5 所示，Co-018模型中，达拉菲尼单一疗法和达拉菲尼/曲美替尼组合、达拉菲尼/帕尼单抗组 合未显示显著肿瘤生长延迟（TGD)。帕尼单抗单一疗法显示存活比载剂对照更短，产生- 38%TGD(p<0.05相比载剂）。仅达拉菲尼、曲美替尼和帕尼单抗Ξ重组合才产生92%TGD(p< 0.05相比所有其它组)和4/7(57% )63天存活者。
[0334] 帕尼单抗在Co-012和Co-018模型中显著提高达拉菲尼或达拉菲尼和曲美替尼的 功效。帕尼单抗、达拉菲尼和曲美替尼Ξ重组合在巧中PDX中都非常有效，在Co-018模型中比 帕尼单抗和达拉菲尼或达拉菲尼和曲美替尼组合更有效延迟肿瘤生长，而单独的达拉菲尼 和帕尼单抗显示很小活性或没有活性。
[0335] 虽然抑制MAPK或EGFR信号传递在BRAF突变CRC中具有有限活性，联合抑制MAPK信 号传递和EGFR具有显著抗肿瘤活性，而Ξ重组合在BRAFV600ECRC临床前模型中最有效。
[0336] 上述数据表明帕尼单抗和达拉菲尼W及达拉菲尼和曲美替尼的组合在BRAFV600E 突变CRC PDX模型中增强抗肿瘤活性，且活性显著高于采用耐受剂量的单独帕尼单抗、单独 达拉菲尼、达拉菲尼和曲美替尼的组合。
[0337] 本发明组合在上述试验中测试W确定治疗癌症的有利治疗效用。
[0338]下列实施例仅用于阐明，而不意在W任何方式限制发明范围。
[0扣9] 实施例1-药盒组成
[0340]如下表1和II所示，将薦糖、微晶纤维素 W及本发明组合的化合物A和BW所示比例 单独混合并成粒，用10%明胶溶液。使湿颗粒过筛，干燥，与淀粉、滑石和硬脂酸混合，随后 过筛并压片。如表ΠI所述，药盒还包括一瓶帕尼单抗。
[0；341]莖
[0345]表1II
[0；346]帕尼单抗，20ml小瓶，浓度为20mg/ml。
[0347]尽管本发明的优选实施方式如上所述，应理解本发明不限于本文所公开的精确说 明，且保留下列权利要求书范围内所有修改的权利。
【主权项】
1. 一种组合，所述组合包括： (i) 结构(I)的化合物或其药学上可接受盐或溶剂化物； (ii) 帕尼单抗;和可选含有 (^)结构(11)的化合物或其药学上可接受盐。2. 如权利要求1所述的组合，其特征在于，所述化合物（I)采用二甲亚砜溶剂化物形式， 且化合物（I I)采用甲磺酸盐形式。3. -种组合，所述组合包括： (i) 结构(I)的化合物或其药学上可接受盐或溶剂化物;和 (ii) 帕尼单抗。4. 一种组合，所述组合包括： (1)结构(11)的化合物或其药学上可接受盐或溶剂化物;和 (ii)帕尼单抗。5. -种组合药盒，所述药盒包括如权利要求1-4所述的组合以及一种或多种药学上可 接受载体。6. 如权利要求5所述的组合药盒，其特征在于，所述结构I的化合物或其药学上可接受 盐或溶剂化物，若存在，以适合口服给药的片剂形式提供。7. 如权利要求5或6所述的组合药盒，其特征在于，所述结构II的化合物或其药学上可 接受盐，若存在，以适合口服给药的胶囊形式提供。8. 如权利要求5-7中任一项所述的组合药盒，其特征在于，所述帕尼单抗以适合IV给药 的形式提供。9. 如权利要求5-7中任一项所述的组合药盒，其特征在于，所述帕尼单抗以适合皮下给 药的形式提供。10. 如权利要求1-9中任一项所述的组合在制造治疗癌症药物中的应用。11. 如权利要求1-9所述的组合，其特征在于，所述组合用于治疗。12. 如权利要求1-9所述的组合，其特征在于，所述组合用于治疗癌症。13. -种药物组合物，其包含如权利要求1-9所述的组合以及药学上可接受稀释剂或载 体。14. 一种在有需要的人中治疗癌的方法，所述方法包括给予治疗有效量的如权利要求1 所述的组合。15. 如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述帕尼单抗以约6mg/kg的量给药。16. 如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述帕尼单抗以约6mg/kg的量给药，在60 分钟内静脉输注给予。17. 如权利要求14-16中任一项所述的方法，其特征在于，所述帕尼单抗与结构I的化合 物或其药学上可接受盐或溶剂化物以及结构II的化合物或其药学上可接受盐共给药。18. 如权利要求14-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述癌症选自头部颈部癌、乳 腺癌、肺癌、结肠癌、卵巢癌、前列腺癌、胶质瘤、成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质 细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、Cowden病、Lhermi tte-Duc Io s病、炎性乳腺癌、肾母细胞 瘤、尤文肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、肾癌、肝癌、黑素瘤、胰腺癌、肉瘤、 骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌、成淋巴细胞T细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴 细胞白血病、毛细胞白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性髓细胞白血病、AML、慢性中性 粒细胞白血病、急性成淋巴细胞T细胞白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞大细胞白血病、套细胞 白血病、多发性骨髓瘤巨核母细胞白血病、多发性骨髓瘤、急性巨核细胞白血病、早幼粒细 胞白血病、红白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、淋巴母细胞T细胞淋巴 瘤、伯基特淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、成神经细胞瘤、膀胱癌、尿路上皮癌、外阴癌、宫颈癌、子 宫内膜癌、肾癌、间皮瘤、食管癌、唾液腺癌、肝细胞癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、GIST (胃 肠道间质瘤)和睾丸癌。19. 如权利要求14-18中任一项所述的方法，其特征在于，所述化合物（I)采用二甲亚砜 溶剂化物形式，且化合物(I I)采用甲磺酸盐形式。20. 如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述帕尼单抗以约6mg/kg的量每2周给药， 在60分钟内静脉输注给予。21. 如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述组合由结构（I)的化合物或其药学上 可接受盐或溶剂化物和帕尼单抗组成。22. -种用于治疗癌的组合或组合药盒，所述组合或组合药盒包含治疗有效量的以下 组合:N- {3- [ 3-环丙基-5-( 2-氟-4-碘-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-三氧代-3，4，6，7-四 氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲亚砜和帕尼单抗，以及可选含有N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6_二氟苯磺 酰胺甲磺酸盐， 其中所述组合在指定时段内给药，和 其中所述组合持续一段时间给药。23. 如权利要求22所述的组合或组合药盒，其特征在于，所述N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-三氧代-3，4，6，7-四氢-2H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲亚砜的量选自约0.25mg-约9mg，且该量适合每天一次给药， 若存在，N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯 基}-2,6_二氟苯磺酰胺甲磺酸盐的量选自约80mg-约220mg，且该量适合以一个或多个剂量 每天2次给药， 帕尼单抗的量选自约6mg/kg，每14天给药。24. 如权利要求23所述的组合或组合药盒，其特征在于，所述N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-三氧代-3，4，6，7-四氢-2H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲亚砜和若存在，N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-i，3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6_二氟苯磺酰胺甲磺酸盐连续给药7天，帕尼单抗在7天中 给药1次，可选之后是一个或多个重复给药周期。25. -种用于治疗癌的组合或组合药盒，所述组合或组合药盒包含治疗有效量的以下 组合:N- {3- [ 3-环丙基-5-( 2-氟-4-碘-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-三氧代-3，4，6，7-四 氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲亚砜和帕尼单抗， 其中所述组合在指定时段内给药，和 其中所述组合持续一段时间给药。26. 如权利要求25所述的组合或组合药盒，其特征在于，所述N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-三氧代-3，4，6，7-四氢-2H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲亚砜的量选自约0.25mg-约9mg，且该量适合每天一次给药，帕尼单抗 的量选自约6mg/kg，每14天给药。27. 如权利要求26所述的组合或组合药盒，其特征在于，所述N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)6，8-二甲基-2，4，7-三氧代-3，4，6，7-四氢-2H-吡啶并[4，3-d]嘧啶-1- 基]苯基}乙酰胺二甲亚砜连续给药14天，帕尼单抗在14天中给药1次，可选之后是一个或多 个重复给药周期。
【文档编号】A61K31/519GK106029074SQ201480075171
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2014年12月11日
【发明人】J·D·格雷绍克, A·胡斯
【申请人】诺华股份有限公司