新的环庚烯化合物、其制备方法和含有它们的药物组合物的制作方法

专利名称：新的环庚烯化合物、其制备方法和含有它们的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的环庚烯化合物、其制备方法和含有它们的药物组合物。
本发明的化合物用作法尼基转移酶抑制剂。
大量蛋白质进行了转录后变化，这改变了它们的定位和它们的功能。特别是类脂型修饰使得一类在游离形态非活性的蛋白质能粘附在原生质膜内，这对于确保它们的功能是决定性的一步。这应用了异戊烯基化(Curr.Opin.Cell.Biol.，4，1992，1008-1016)，由数种酶催化法尼基转移酶(FT酶)和两种香叶草基香叶草基转移酶(GGT酶-I和GGT酶-II)，其将异戊烯基连接到在底物蛋白质羧基端部的15-(反，反-法尼基)或20-(全反香叶草基香叶草基)碳原子上(J.Biol. Chem.，271，1996，5289-5292；Curr.Opin.Struct.Bio1.，7，1997，873-880)。FT酶催化该转移，从焦磷酸法尼基酯开始，形成一个硫醚，其键连在底物蛋白质上基于末端四肽共有序列CA1A2X的半胱氨酸上，C表示半胱氨酸，A1和A2表示脂族氨基酸，X表示丝氨酸、丙氨酸或蛋氨酸。GGT酶-I用焦磷酸香叶草基香叶草基酯作为供体底物用于完成类似的转移，但是此时共有序列CAAX通过亮氨酸或苯丙氨酸终止。那两种杂二聚体酶共享一个48kDa的α亚基，具有两个不同的β链，尽管它们有30％氨基酸序列同源性。GGT酶-II在XXCC和XCXC型末端序列上作用，具有与那些前述的酶不同的α和β亚基。
对于抑制那些FTase酶之一的兴趣是基于异戊烯基化致癌基因Ras的肿瘤发展的暗示(Annu.Rev.Biochem.，56，1987，779-827)。Ras蛋白质以四种主要形式存在，Harvey或H-Ras、N-Ras、Kirsten或K-Ras A和B。在至少四分之一的癌症中这些蛋白质以一种变态形式表现，对于肿瘤的一些组织学类型和根据Ras的形式发生率甚至更高。例如，在胰腺癌中发现80-90％的K-Ras的突变，在结肠癌中发现30-60％(Int.J.Onco1.，7，1995，413-421)。大量临床数据已经证明了致癌基因在肿瘤发展中、更特定地是在细胞生长现象中的作用。在细胞外信号——诸如被生长因子活化的那些——向不同的胞质激活酶以及随后向细胞核的传递中，从整体而言，在增生、细胞死亡和细胞存活方面，(Cancer Met.Rev.，13，1994，67-89；Curr.Opin.Genetics&Develop.，8，1998，49-54；J.Bio1.Chem.273，1998，19925-19928)，或在肿瘤环境调节-特别是血管生成方面(Cancer Res.，55，1995，4575-4580)，其为一种必要的连接物。
因此在肿瘤学中对FT酶抑制剂的研究相当有兴趣(Curr.Opin.Chem.Biol.，2，1998，40-48)。因为0.5％的动物蛋白质可能被异戊烯基化，大部分是香叶草基香叶草基化的，尤其感兴趣的是涉及GGT酶、特别是结构与FT酶类似的GTT酶-I的FT酶的特定抑制剂。对这类抑制剂的最初研究，共有序列法尼基化的肽模拟分析，以及使用通过化学库筛选得到的分子的后继研究，证实了在体外和动物实验中抗肿瘤的策略(Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.，37，1997，143-166；Biochim.Biophys.Acta.，1423，1999，C19-C30；Cancer Res.，58，1998，4947-4956)。成纤维细胞特定地被变异的H-Ras蛋白质基因转染并植入动物中发展成肿块，其生长作为动物获得FT酶抑制剂剂量的函数减小。在转基因动物的情况下，通过控制适当的导致随机表现自发的乳房癌或唾液腺癌的促进剂，它们表现出H-Ras的变异型，那些相同的抑制剂使得已经形成的肿块的消退，并阻止了治疗持续期间新肿块的出现。最后，这类产品在降低小鼠内人异体移植物的生长方面有活性，基于模型，可能引起存活的增加。在肿瘤病理学中变异的Ras蛋白质不只是那些抑制剂间接的目标。多种肿瘤模型的研究已经能够确定肿瘤生长的抑制与变异的Ras蛋白质的存在相独立。该作用可能部分地与直接的抗血管生成活性有关，这样可能独立于肿瘤的致癌基因的轮廓(oncogenic profile)(Eur.J.Cancer，35，1999，1394-1401)。该观察补充并提高了这类抑制剂用于抗肿瘤用途的可能性，并且，在与通过法尼基化蛋白质改变或增强的机理或通过法尼基化蛋白质相关的任何病症中，不存在减弱正常细胞功能的副作用对于FT酶的抑制也很有用。除了癌症，这尤其应用于例如血管成形术或血管外科手术后的再狭窄和I型多发性神经纤维瘤(Mol.CellBiol.，17，1997，862-872)。
本发明的化合物具有新的结构，能够选择性地抑制与GGT酶相关的FT酶。它们因此用于治疗与通过Ras蛋白质或其它法尼基化蛋白质进行的细胞内信号传输相关的所有病症，并且用于与血管生成扩大相关的病症。因此它们可用于治疗癌症，还可用于治疗血管成形术或血管外科手术后的再狭窄和I型多发性神经纤维瘤。
本发明涉及式(I)化合物 其中X表示一个键或选自亚烷基、CO、S(O)n、*-S(O)n-A1-、*-CO-A1-、-A1-S(O)n-A’1-和-A1-CO-A’1-(其中A1和A’1相同或不同，表示亚烷基，n是0、1或2)的基团，符号“*”表示这些基团和环庚烯结合的点，Y表示芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R8基团取代，R1、R2、R3和R4分别彼此独立地表示氢原子或芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R8基团取代，或R1、R2、R3和R4成对地形成一个键，或R1和R2、或R2和R3、或R3和R4成对地与它们键连的碳原子一起形成稠合的苯环或稠合的芳香环的或部分不饱和的具有5或6个环原子且含有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的杂环，条件是仅有一个环可与7元结构稠合，T表示-CH(R5)-、-N(R5)-或*-N(R5)CO-基(其中R5表示氢原子或烷基、芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳基烷基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R7基团取代)，符号“*”表示这些基团和环庚烯结合的点，V表示氢原子或芳基或杂芳基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R7基团取代，A2表示[C(R6)(R’6)]p基，其中当T表示-N(R5)-基或*-N(R5)CO-基时p是0、1、2、3或4，或当T表示-N(R5)-基时p是1、2、3或4；R6和R’6可以相同或不同，表示氢原子或烷基、烯基、炔基、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂环烷基、任选被取代的芳烷基、任选被取代的杂芳基烷基或任选被取代的杂环烷基烷基、R9基团或被R9基团取代的烷基(其中R9表示-OR5、-N(R5)(R’5)、-S(O)mR5、-CON(R5)(R’5)、-N(R5)COR’5、-N(R5)SO2R’5、-SO2N(R5)(R’5)或-N(R5)COO(R’5)基，m是0、1或2，R’5可具有R5表示的任一含义)，R7表示卤原子或烷基、烷氧基、羟基、巯基、烷硫基、氰基、氨基(任选被一个或两个烷基取代)、硝基、羧基、烷氧基羰基、氨基羰基(任选被一个或两个烷基取代)、氨基甲酰基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的芳烷基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的杂芳基烷基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的环烷基烷基、未取代的或取代的杂环烷基或未取代的或取代的杂环烷基烷基，R8表示卤原子、或氧、羟基、氰基、硝基、羧基、烷氧基羰基或全卤代烷基或-U-R80或-A80-U-R80基(其中A80表示亚烷基；U表示一个键、氧原子或选自NH、S(O)m、NHCO、CONH、SO2NH和NHSO2，m是0、1或2；R80是选自烷基、芳基、芳烷基、杂芳基和杂芳基烷基的基团)，条件是-术语“烷基”表示有1-6个碳原子的直链或支链基团，-术语“亚烷基”表示有1-6个碳原子的直链或支链二价基团，-术语“环烷基”表示有3-8个碳原子饱和环基，-术语“杂环烷基”表示有5-7个环原子且含有1-3个选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和的环基，-术语“芳基”表示苯基或萘基，-术语“杂芳基”表示单环或双环基，其为芳族或含有至少一个芳环，具有5-11个环原子且含有1-5个选自氮、氧和硫的杂原子，-用于术语“芳基”、“杂芳基”、“环烷基”和“杂环烷基”的术语“取代的”表示这些基团可以被一个或多个相同或不同的选自氰基、烷基羰基、氨基羰基(任选被一个或两个烷基取代)和卤素原子的基团取代，-用于术语“芳烷基”、“杂芳基烷基”、“环烷基烷基”和“杂环烷基烷基”表示这些基团的环部分可以被一个或多个相同或不同的选自氧、氰基、烷基羰基、氨基羰基(任选被一个或两个烷基取代)和卤素原子的基团取代，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
在药学可接受的酸中，可述及的是盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、富马酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸、甲磺酸、樟脑酸等。
在药学可接受的碱中，可述及的是氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、叔丁胺等。
在式(I)化合物中，X优选表示一个键。
优选的是(I)化合物是其中Y表示芳基(优选任选被R8取代的苯基)的那些。
本发明有利的一方面是涉及其中每个R1、R2、R3和R4表示氢原子的式(I)化合物。
本发明更特别涉及其中T表示-N(R5)-基、尤其是表示-NH-基的式(I)化合物。
优选A2基是亚甲基、亚乙基、(4-氰基苯基)亚甲基、(4-氯苯基)亚甲基、(4-氰基苄基)亚甲基和(4-氯苄基)亚甲基。
最有利的是V表示杂芳基，诸如吡啶基和1H-咪唑基，这些基团优选被诸如对氰基苄基或对氯苄基的任选取代的芳烷基取代。
优选本发明的V-A2-T-基是基团[(4-氰基苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基氨基。
在优选的式(I)化合物中，当V被R7取代时，R7表示任选取代的芳烷基或任选取代的杂芳基烷基。这些基团有利地被卤原子或氰基取代。
本发明尤其有利的一个方面涉及式(I)化合物，其中X表示一个键，Y表示任选被R8取代的芳基，每个R1、R2、R3和R4表示氢原子，T表示-N(R5)-基，尤其是-NH-基，A2表示-CH2-、-CH2-CH2-、(4-氰基苯基)亚甲基、(4-氯苯基)亚甲基、(4-氰基苄基)亚甲基或、(4-氯苄基)亚甲基，V表示杂芳基，诸如任选被R7取代的吡啶和1H-咪唑基。
在优选的式(I)化合物中，更可述及的有4-{[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]-甲基}苄腈，4-{[5-({[3-(3-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]-甲基}苄腈和4-{-5-({[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]-甲基}苄腈。
本发明还涉及制备式(I)化合物的方法，特征在于使用式(II)化合物作为原料 其中R1、R2、R3和R4定义如式(I)，其羰基官能基与式Li-X-Y的有机金属化合物反应，其中X和Y定义如式(I)，得到式(III)化合物 其中R1、R2、R3、R4、X和Y定义如前，将该化合物在酸性介质中进行异构化反应，生成式(IV)化合物 其中R1、R2、R3、R4、X和Y定义如前，式(IV)化合物在将羟基转变为一个离去基团后，进行-通过与甲硅烷基化合物反应引入一个活性官能基，甲硅烷基化合物是例如Me3SiCN、CH2＝CH-CH2-SiMe3或CH2＝C(Oalk)(OSiMe3)，其中alk表示烷基；然后与适当的基团缩合生成式(I/a)化合物 是式(I)化合物的一种特定情况，其中R1、R2、R3、R4、R5、A2、V、X和Y定义如前，-或与叠氮化钠作用，在三苯基膦存在下的水解后生成式(V)的胺 其中R1、R2、R3、R4、X和Y定义如前，式(V)化合物与下式的醛 其中V定义如前，R6和R’6定义如式(I)，R”6表示那些与R6或R’6定义中相同的原子或基团，p是1、2、3或4，缩合形成式(I/b)化合物 是式(I)化合物的一种特定情况，其中R1、R2、R3、R4、R’6、R”6、V、X、Y和p定义如前，[这类式(I/b)化合物还可从式(II’)化合物起始得到 其中R1、R2、R3和R4定义如前，其形成相应的甲硅烷基醚后，在强碱性介质中与化合物Y-X’-CHO反应，其中Y定义如前，X’表示一个键或亚烷基，脱保护后得到式(III’)化合物 其中R1、R2、R3、R4、X’和Y定义如前，该化合物与式V-A2-NH2的胺缩合，其中V和A2定义如前，得到式(I/ba)化合物，其为式(I/b)化合物的一种特定情况 其中R1、R2、R3、R4、X’和Y定义如前]，或式(V)化合物与其中V和A2定义如式(I)、Hal表示卤素原子的式V-A2-CO-Hal化合物进行酰化反应，或与其中V和A2定义如式(I)的式V-A2-COOH羧酸偶合，得到式(I’/b)化合物 其中R1、R2、R3、R4、A2、X和Y定义如前，化合物(I/b)和(I’/b)可如前所述与式R”5CHO的醛、或与式R”5-CO-Hal的酰卤、或与式R”5-COOH的羧酸进行相同类型的缩合，其中R”5可具有R5的任何除了氢原子以外的含义，得到式(I/c)化合物 其为式(I)化合物的一种特定情况，其中R1、R2、R3、R4、R5、A2、V、X和Y定义如前，式(I/a)、(I/b)、(I’/b)和(I/c)化合物构成了式(I)化合物的全体，-如果需要，其可用常规的提纯技术纯化，-如果适当，其可根据常规的分离技术分离成其异构体，-如果需要，其可用药学可接受的酸或碱转化成其加成盐。
本发明还涉及药物组合物，含有至少一种式(I)化合物作为活性成分，其单独存在或与一种或多种惰性无毒药学可接受的赋形剂或载体结合。
在根据本发明的药物组合物中，尤其可述及的是那些适合口服、非肠胃给药、鼻用或眼用的，片剂或糖衣药丸、舌下片、胶囊、锭剂、悬浮剂、霜剂、软膏、皮用凝胶等。
有效剂量的变化根据患者的年龄和体重、病症的形质和严重性以及给药途径，其可以是口服、鼻用、直肠给药或非肠胃给药。通常单位剂量范围为每24小时0.05-500mg，每次治疗给药1-3次。
下列实施例详细说明本发明但不对其构成任何形式的限制。所述的化合物结构用常规光谱技术确定。
使用的原料是公知的产品或根据已知的方法制备。制备例14-[(5-甲酰基-1H-咪唑-1-基)甲基]苄腈步骤A4-{[5-(羟甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈二聚形式的二羟基丙酮(23.35g/0.129mol)和巯基异氰酸钾(25.18g/0.259mol)连续加入25g(0.233mol)4-(氨基甲基)苄腈在100ml异丙醇中的溶液中，然后将混合物置于冰浴中，滴加20ml乙酸。反应混合物在室温搅拌48小时。得到沉淀，滤出，用50ml异丙醇洗涤，然后用50ml水洗涤2次，继而干燥。如此得到晶体，其直接用于后继的脱硫步骤13g(0.059mol)前面得到的晶体置于140ml 10％的硝酸在水中的稀溶液中。在0摄氏度，非常缓慢地加入0.1g硝酸钠。观察到明显的棕色气体放出，混合物逐渐变得均匀。反应混合物随后在室温搅拌3小时，然后过滤，用AcOEt萃取1次。然后用5N氢氧化钠溶液补充水相的碱性，之后用AcOEt萃取2次。有机相用饱和的NaCl溶液洗涤，然后用MgSO4干燥。真空蒸发，得到标题化合物。步骤B4-[(5-甲酰基-1H-咪唑-1-基)甲基]苄腈向4.6g(24.9mmol)步骤A所得化合物在120mlDMSO中的溶液中连续加入三乙胺(13.8ml/99.6mmol)和SO3-吡啶配合物(9.89g/62.25mmol)，反应混合物在室温搅拌30分钟。然后将整个反应物恢复到0摄氏度，用水水解，然后用AcOEt萃取数次。合并有机相，用饱和的NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥，蒸发至干燥，得到标题化合物。制备例24-{[5-(氨基甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈向制备例1所得化合物(1.05g/4.97mmol)在50ml甲醇中的溶液中加入3.83g(49.7mmol)乙酸铵和NaBH3CN(0.313g/4.97mmol)，将整个反应物在室温搅拌48小时。然后用饱和的NaHCO3溶液水解反应混合物，用AcOEt萃取。然后合并有机萃取物，用MgSO4干燥，浓缩至干燥。然后用硅胶柱(CH2Cl2，MeOH，NH4OH，98/1.5/0.5)提纯残留的油，得到白色泡沫形式的标题化合物。
根据与制备例1和2相同的方法，用适当的物质代替4-(氨基甲基)苄腈，得到制备例3-13制备例34-[1-(5-甲酰基-1H-咪唑-1-基)乙基]苄腈制备例44-[(5-甲酰基-1H-咪唑-1-基)甲基]环己烷腈制备例51-[(1-氰基-4-哌啶基)甲基]-1H-咪唑-5-醛制备例61-(3-苯基丙基)-1H-咪唑-5-醛制备例71-(4-氟苄基)-1H-咪唑-5-醛制备例81-(4-氯苄基)-1H-咪唑-5-醛制备例91-(3-氯苄基)-1H-咪唑-5-醛制备例101-(4-溴苯基)-1H-咪唑-5-醛制备例111-苄基-1H-咪唑-5-醛制备例124-{[5-(2-氧代乙基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈制备例131-(2-苯基乙基)-1H-咪唑-5-醛制备例144-[(3-甲酰基-4-吡啶基)甲基]苄腈步骤A4-(4-氰基苄基)-3-甲酰基-1(4H)-吡啶羧酸苯酯4-溴苄腈在20mlTHF中的溶液滴加到已经冷却到-20摄氏度的1.44g(0.022mol)锌在无水THF中的悬浮液中。整个反应物在室温搅拌4小时。
同时，将3-吡啶羧酸酐(1.9ml/0.02mol)加入20ml无水THF中形成溶液，然后在0摄氏度加入氯甲酸苯酯(2.5ml/0.02mol)在10mlTHF中的溶液，反应混合物在该温度搅拌1小时。可见发白的沉淀形成。
先前得到的溴-锌化合物随后转移到保护的吡啶中，整个反应物在0摄氏度搅拌1.5小时，随后逐步恢复到室温，在该温度搅拌1.5小时。用饱和的NH4Cl溶液进行水解，然后用AcOEt萃取，萃取物用饱和NaCl溶液洗涤，然后用MgSO4干燥，再蒸发至干燥。得到棕色的油，通过硅胶色谱提纯(庚烷，10％AcOEt)，得到标题化合物。
步骤B4-[3-甲酰基-4-吡啶基)甲基]苄腈步骤A得到的产物在80ml萘烷中形成溶液，然后加入0.336g(0.010mol)硫，整个反应物在140-150摄氏度加热24小时。过滤反应混合物然后浓缩。得到棕色的油，用硅胶色谱提纯(庚烷，10％AcOEt 10％)，得到标题化合物。元素微量分析C％H％N％理论值75.654.53 12.60实测值75.504.32 12.50制备例154-[(咪唑-4-基)羰基]苄腈步骤AN，N-二甲基-1H-咪唑-1-磺酰胺该化合物根据D.J.Chadwick和R.I.Ngochindo，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.，481，1984从10.2g(0.15mol)咪唑开始制备。得到20g半透明的黄色油，其在室温逐渐结晶成无定形固体，产率93％。IR 1177和1391cm-1，ν(NSO2).NMR(CDCl3)7.35，d，(1H)；7.25d，(1H)；7.15s，(1H)；2.31s，(6H).元素微量分析
C％ H％ N％S％理论值34.285.1823.9818.30实测值34.715.5323.0218.47步骤B2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]-N，N-二甲基-1H-咪唑-1-磺酰胺该化合物根据J.W.Kim，S.M.Abdelaal和L.Bauer J.HeterocyclicChem.，611 1995所述的方案制备，通过用正丁基锂(在己烷中的1.6M的溶液)在-78摄氏度将步骤B得到的化合物锂化，然后加入TBDMSiCl。硅胶色谱(在庚烷中的乙酸乙酯)后，以80％的产率分离得到半透明黄色油形式的2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]-N，N-二甲基-1H-咪唑-1-磺酰胺。IR 1176和1386cm-1，v(NSO2)。NMR(CDCl3)7.35，d，(1H)；7.25d，(1H)；2.85，s，(6H)；1.0s，(9H)；0.45，s，(6H).步骤C2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]-5-[(4-氰基苯基)(羟基)甲基]-N，N-二甲基-1H-咪唑-1-磺酰胺将1.25ml(19.9mmol)正丁基锂溶液(在己烷中1.6M)缓慢地加入到已处于-78摄氏度的步骤B得到的化合物(4.76g，18mmol)在40ml无水THF中的溶液中，然后整个反应物在该温度保持1小时30分钟。随后加入对氰基苯甲醛在20mlTHF中的溶液3.3g(25.1mmol)。整个反应物在-78摄氏度搅拌0.5小时，然后用饱和的NaHCO3水溶液水解。当反应混合物处于室温时，用AcOEt萃取，然后用饱和的NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥，浓缩至干燥。
用硅胶柱(庚烷/AcOEt 3/1)提纯后，以83％的产率得到5.8g标题化合物。IR3449 v(OH)；2230 v(CN)；1609 v(C＝C)；1376和1146νcm-1(NSO2).NMR(CDCl3)7.7，d，(2H)；7.6d，(2H)；6.65s(1H)；6.15s(1H)；3.35m(1H，OH)；2.85，s，(6H)；1.0s，(9H)；0.45，s，(6H)。步骤D5-[(4-氰基苯基)(羟基)甲基]-N，N-二甲基-1H-咪唑-1-磺酰胺将步骤C得到的化合物(4g，9.5mmol)溶于40mlTHF得到溶液。然后加入AcOH/H2O(7∶3)的混合物(40ml)，整个反应物在室温搅拌2小时。然后用冰水混合物水解反应混合物，用AcOEt萃取，用饱和的NaHCO3水溶液洗涤，然后用饱和的NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥，浓缩至干燥。然后将残留的固体在庚烷中研磨，得到白色晶体形式的标题化合物2.57g，产率89％。IR3200 2700v(OH)；2230v(CN)；1390和1152vcm-1(NSO2).NMR(CDCl3)7.9，s，(1H)；7.75和7.55 2d，(4H)；6.55s(1H)；6.15d(1H)；3.25d(1H，OH)；3.0，s，(6H).元素微量分析C％ H％ N％S％理论值50.97 4.6118.2910.47实测值51.58 4.7618.0510.12步骤E4-(1H-咪唑-5-颈羰基)芐腈根据F.Effenberger；M.Roos；R.Ahmad；和A.Kerbs；Chem.Ber.；124(7)；1639-1650；1991所述的方法，从前面步骤得到的化合物开始通过使用三氧化铬在乙酸中回流下氧化得到4-(1H-咪唑-5-基羰基)苄腈。制备例164-[(1-甲基-1H-咪唑-5-基)羰基]苄腈步骤A4-[(1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)羧基]苄腈将制备例15得到的化合物在DMF中制成溶液，顺序加入2摩尔当量的Et3N和1.1摩尔当量的三苯基甲基氯。整个反应物在室温搅拌96小时。反应混合物随后用水和冰的混合物水解，映AcOEt萃取。用稀释的1NHCl溶液、继而用饱和的NaHCO3溶液、最后用饱和的NaCl溶液洗涤后，将反应混合物浓缩至干燥，用硅胶柱提纯(庚烷，AcOEt)。以78％的产率得到晶体化合物形式的4-[(1-三苯甲基-1H-咪唑-5-基)羰基]苄腈。步骤B4-[(1-甲基-1H-咪唑-5-基)羰基]苄腈从前面步骤制备的化合物开始使用I.M.Bell等人J.Med.Chem.；44；2933-2949；2001所述的方法用两步得到该化合物，用作为烷基化试剂的碘甲烷代替苄基溴。使用硅胶的提纯步骤可分离4-[(1-甲基-1H-咪唑-5-基)羰基]苄腈。制备例174-[2-(1H-咪唑-5-基)-2-氧乙基]苄腈该化合物根据与制备例15相同的方法得到，在步骤C用4-(氰基苯基)乙醛作为烷基化试剂代替对氰基苯甲醛。制备例184-[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-氧乙基]苄腈该化合物根据与制备例16相同的方法使用在制备例17中得到的化合物得到。制备例19(4-氯苯基)(1H-咪唑-5-基)methanone该化合物根据与制备例15相同的方法得到，在步骤C用4-(氯苯基)苯甲醛代替对氰基苯甲醛作为烷基化试剂。制备例20(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)methanone该化合物根据与制备例16相同的方法使用在制备例19中得到的化合物得到。制备例212-(4-氯苯基)-1-(1H-咪唑-5-基)ethanone该化合物根据与制备例15相同的方法得到，在步骤C用4-(氯苯基)乙醛代替对氰基苯甲醛作为烷基化试剂。制备例222-(4-氯苯基)-1-(甲基-1H-咪唑-5-基)ethanone
该化合物根据与上述制备例16相同的方法使用在制备例21中得到的化合物得到。实施例14-{[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈步骤A1-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-醇使用Tetrahedron Vol 52，no.9，pp3107-3116，1996所述的方法得到该化合物。
将16.9ml(26.9mmol)正丁基锂的溶液(1.6M/己烷)缓慢地加入到已处于-78摄氏度的3.25ml(26.9mmol)α-溴甲苯在THF/Et2O(50/25ml)混合物中的溶液中。整个反应物在该温度搅拌30分钟，然后加入环庚酮(3ml/26.9mmol)，混合物在该温度搅拌1小时，然后搅拌过夜，温度逐渐恢复到室温。反应混合物然后用饱和的NaHCO3水溶液水解，用Et2O萃取。用饱和的NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥，蒸发至干燥生成棕色的油，其用硅胶色谱提纯(庚烷，2％AcOEt)，得到无色油形式的标题产物。元素微量分析C％ H％理论值83.12 8.97实测值83.26 8.75步骤B3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-醇将1％浓度的H2SO4在水(100ml)中的稀溶液滴加到步骤A所得化合物(3.7g/18.29mmol)在100ml二恶烷中的溶液中。然后将整个反应物在室温搅拌2小时。反应混合物用Et2O萃取，用饱和的NaHCO3水溶液洗涤，然后用饱和的NaCl溶液洗涤直至中性。用MgSO4干燥，蒸发至干燥生成油，其用硅胶色谱提纯(庚烷，AcOEt，4/1)，得到无色油形式的标题产物。元素微量分析C％H％理论值83.128.97实测值83.708.77步骤C乙酸3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基酯向步骤B所得化合物(6.2g/0.03mol)在100mlCH2Cl2中的溶液中顺序加入吡啶(4.9ml/0.06mol)、DMAP(1.83g/0.015mol)，然后滴加乙酸酐(5.7ml/0.06mol)。然后将整个反应物在室温搅拌24小时。然后浓缩反应混合物至干燥，溶于AcOEt，用稀HCl溶液(1N)、饱和的NaHCO3水溶液、然后用饱和的NaCl溶液洗涤；用MgSO4干燥，然后浓缩至干燥。残留的黄色油随后用硅胶色谱提纯，得到白色晶体形式的标题产物。步骤D3-叠氮基1-(2-甲基苯基)-1-环庚烯向步骤C所得化合物(3.52g/14.56mmol)在50ml 1，2-二氯乙烷中的溶液中滴加三甲基甲硅烷基叠氮化物(TMSN3)，然后加入0.326g(1.46mmol)高氯酸镁(Mg(ClO4)2)，将整个反应物在室温搅拌过夜。用水进行水解，然后用AcOEt萃取；合并有机相，用饱和的NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥，浓缩至干燥。得到的黄色油用硅胶柱色谱提纯(环己烷，2％AcOEt)，得到半透明油形式的标题产物。步骤E3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基胺向步骤D所得化合物(2.4g/10.73mmol)在60ml THF中的溶液中加入2.5ml水，然后是4.23g(16.1mmol)三苯基膦PPh3，然后反应物在室温搅拌过夜。然后将整个反应物浓缩至干燥，继而用硅胶色谱提纯(CH2Cl2，20％MeOH，2％NH4OH)，得到黄色油形式的标题产物。元素微量分析
C％H％ N％理论值83.539.516.96实测值82.719.327.09步骤F4-{[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈向步骤E所得化合物(0.764g/3.7mmol)在30mlC2H4Cl2中的溶液中加入0.82g制备例1得到的化合物，然后是NaHB(OAc)3(1.18g/5.55mmol)，整个反应物在室温搅拌48小时。然后用水水解反应混合物，用AcOEt萃取，然后洗涤至中性。用MgSO4干燥并浓缩至干燥后，残留的油用使用洗脱剂的硅胶色谱提纯(CH2Cl2/MeOH/NH4OH97.5/2/0.5)。得到半透明树脂形式的标题化合物，其直接溶于40mlCH3CN/H2O 50/50的混合物中。
用富马酸进行成盐的转化，得到相应的二-富马酸盐，冻干。熔点60-63摄氏度元素微量分析C％H％N％理论值64.965.77 8.91实测值65.245.69 8.91实施例24-{[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用溴苯代替1-溴-2-甲基苯。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析
C％H％ N％理论值69.22 6.0110.98实测值69.14 6.1410.25实施例34-{[5-({[3-(2-甲基苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈步骤A叔丁基(二甲基){[3-(2-甲基亚苄基)-1-环庚烯-1-基]氧基}硅烷向环庚酮(71.7mmol)在220ml无水THF中的溶液中顺序加入三苯基膦(72.6mmol)并再滴加叔丁基二甲基甲硅烷三氟化物(72.3mmol)，整个反应物在室温搅拌1小时30分钟。然后将混合物调节到-78摄氏度，缓慢加入正丁基锂/己烷(72mmol)溶液，30分钟后加入2-甲基苯甲醛(72.03mmol)。整个反应物在室温搅拌30分钟，然后温度逐渐恢复到室温。2小时30分钟后，反应混合物从2.5升石油醚中沉淀出来并过滤，滤液浓缩至干燥。用硅胶色谱提纯(100％庚烷)后得到标题产物。步骤B(2-甲基苄基)-2-环庚烯-1-酮将正四正丁基氟化铵(1M)在THF(1.35mmol)中的溶液用注射器加入到0摄氏度的步骤A所得化合物(1.34mmol)在15ml无水THF的溶液中，整个反应物在该温度搅拌1小时30分钟。然后将反应混合物浓缩至干燥，直接沉积在硅胶柱上(庚烷/AcOEt 9/1)，得到标题化合物。步骤C4-{[5-({[3-(2-甲基苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈根据J.Org.Chem.1998，63，370所述的方法，通过制备例2所得化合物(2mmol)和步骤B所得化合物(2mmol)之间的偶合得到标题化合物。用硅胶提纯(CH2Cl2，MeOH，NH4OH，95/4/1)后得到纯的半透明胶体形式的标题化合物，其转化成富马酸盐。实施例44-{(5-{[(3-苄基-2-环庚烯-1-基)氨基]甲基}-1H-咪唑-1-基)甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例54-{[5-({[3-(3-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-甲基苯代替1-溴-2-甲基苯。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析C％H％ N％理论值70.29 6.2910.93实测值70.39 6.0610.90实施例64-{[5-({[3-(3-甲基苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用3-甲基苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例74-{[5-({[3-(4-甲基苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用4-甲基苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例84-{[5-({[3-(4-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-4-甲基苯代替1-溴-2-甲基苯。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析
C％ H％ N％理论值70.296.2910.93实测值70.316.0810.88实施例94-{[5-({[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯。元素微量分析C％ H％ N％理论值61.30 5.5611.44实测值61.77 5.5811.26实施例104-{[5-({[3-(3-氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用3-氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例114-{[5-({[3-(4-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-4-氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例124-{[5-({[3-(4-氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用4-氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例134-{[5-({[3-(2-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2-氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例144-{[5-({[3-(2-氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用2-氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例154-{[5-({[3-(2，3-二氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2，3-二氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例164-{[5-({[3-(2，3-二氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用2，3-二氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例174-{[5-({[3-(2，4-二氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用2，4-二氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例184-{[5-({[3-(2，4-二氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2，4-二氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例194-{[5-({[3-(2，5-二氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2，5-二氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例204-{[5-({[3-(2，5-二氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用2，5-二氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例214-{[5-({[3-(3，5-二氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用3，5-二氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例224-{[5-({[3-(3，5-二氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3，5-二氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例234-{[5-({[3-(3，4-二氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用3，4-二氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例244-{[5-({[3-(3，4-二氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3，4-二氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例254-{[5-({[3-(2，3-二氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2，3-二氯苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例264-{[5-({[3-(2，3-二氯苄基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例3，在步骤A中用2，3-二氯苯甲醛代替2-甲基苯甲醛。实施例274-{[5-({[3-(4-氯-2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-4-氯-2-甲基苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例284-{[5-({[3-(4-氟-2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-4-氟-2-甲基苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例294-{[5-({[3-(2，4-二甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2，4-二甲基苯代替1-溴-2-甲基苯。实施例304-{1-[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]乙基}苄腈过程如实施例1，在步骤F中用制备例3所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例314-{[3-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-4-吡啶基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤F中用制备例14所得的化合物代替制备例1得到的化合物。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析C％ H％ N％理论值67.59 5.836.57实测值67.04 5.726.07实施例324-{[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}环己烷腈过程如实施例1，在步骤F中用制备例4所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例33N-({1-[(1-氰基-4-哌啶基)甲基]-1H-咪唑-5-基}甲基)-N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例5所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例344-{[5-({[3-(3-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}环己烷腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-甲基苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例4所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例35N-({1-[(1-氰基-4-哌啶基)甲基]-1H-咪唑-5-基}甲基)-N-[3-(3-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-甲基苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例5所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例364-{[5-({[3-(2-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}环己烷腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例4所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例374-{[5-({[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}环己烷腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例4所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例38N-({1-[(1-氰基-4-哌啶基)甲基]-1H-咪唑-5-基}甲基)-N-[3-(2-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例5所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例39N-({1-[(1-氰基-4-哌啶基)甲基]-1H-咪唑-5-基}甲基)-N-[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例5所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例404-[(5-{[(3-基-2-环庚烯-1-基)氨基]甲基}-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2，4，6-三甲基苯代替1-溴-2-甲基苯。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析C％ H％ N％理论值65.846.148.53实测值65.486.078.48实施例414-({5-[({3-[(苯硫基)甲基]-2-环庚烯-1-基}氨基)甲基]-1H-咪唑-1-基}甲基)苄腈过程如实施例1，在步骤A中用[(溴甲基)硫代基]苯代替1-溴-2-甲基苯。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析C％ H％N％ S％理论值61.81 5.49 8.484.85实测值61.99 5.76 8.454.82实施例42N-{3-[(苯硫基)甲基]-2-环庚烯-1-基}-N-(3-吡啶甲基)胺过程如实施例1，在步骤A中用[(溴甲基)硫代基]苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用烟碱醛代替制备例1得到的化合物。元素微量分析C％ H％ N％S％理论值60.42 5.795.035.76实测值60.51 5.854.895.60实施例434-{[{3-[(苯硫基)甲基]-2-环庚烯-1-基}(3-吡啶甲基)-氨基]甲基}苄腈过程如实施例1的步骤F，从实施例42所得化合物开始，用4-甲酰基苄腈代替制备例1所得的化合物。
用富马酸进行成盐转化，得到相应的富马酸盐元素微量分析C％H％ N％ S％理论值65.195.636.484.94实测值65.355.836.584.92实施例44N-[(1-苄基-1H-咪唑-5-基)甲基]-N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例11所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例45N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]-N-{[1-(2-苯基乙基)-1H-咪唑-5-基]甲基}胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例13所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例46N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]-N-{[1-(3-苯基丙基)-1H-咪唑-5-基]甲基}胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例6所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例47N-{[1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基}]-N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例8所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例48N-{[1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基}]-N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例9所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例49N-{[1-(4-溴苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基}]-N-[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤F中用制备例10所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例50N-[(1-苄基-1H-咪唑-5-基)甲基]-N-(3-苯基-2-环庚烯-1-基)胺过程如实施例1，在步骤A中用溴苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例11所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例51N-[(1-苄基-1H-咪唑-5-基)甲基]-N-[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例11所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例52N-{[1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基}-N-(3-苯基-2-环庚烯-1-基)胺过程如实施例1，在步骤A中用溴苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例7所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例53N-{[1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基}-N-[3-(2-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例8所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例54N-{[1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-5-基]甲基}-N-[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例9所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例554-{[3-({[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-4-吡啶基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-2-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例14所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例56N-{3-[(苯硫基)甲基]-2-环庚烯-1-基}-N，N-二(3-吡啶基甲基)胺过程如实施例1的步骤F，从实施例42所得的化合物开始，用烟碱醛代替制备例1得到的化合物。实施例574-{[5-(2-{[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}乙基)-1H-
咪唑-1-基]甲基}苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例12所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例584-[{[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}(1H-咪唑-5-基)甲基]苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例15所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例594-[{[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例16所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例604-[2-{[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}-2-(1H-咪唑-5-基)乙基]苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例17所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例614-[2-{[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}-2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]苄腈过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例18所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例623-(3-氯苯基)-N-[(4-氯苯基)(1H-咪唑-5-基)甲基]-2-环庚烯-1-胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例19所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例633-(3-氯苯基)-N-[(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-2-环庚烯-1-胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例20所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例643-(3-氯苯基)-N-[2-(4-氯苯基)-1-(1H-咪唑-5-基)乙基]-2-环庚烯-1-胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例21所得的化合物代替制备例1得到的化合物。实施例653-(3-氯苯基)-N-[2-(4-氯苯基)-1-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]-2-环庚烯-1-胺过程如实施例1，在步骤A中用1-溴-3-氯苯代替1-溴-2-甲基苯，在步骤F中用制备例22所得的化合物代替制备例1得到的化合物。药理学研究
FT酶酶活性的确定在96孔平板中通过放射性闪烁接近试验方法进行。由与生物素偶合的lamin B的羧基端基序列(YARSNRSCAIM)组成的受体底物在放射性供体底物([3H]焦磷酸法尼基酯)以及在DMSO中的各种浓度的试验化合物存在下培养。通过在1小时期间加入FT酶在37摄氏度银发反应，然后用适当的缓冲液终止，缓冲液含有被scintillant浸渍的珠子的悬浮液。这些珠子还与streptavidin偶合以通过与生物素偶合俘获易于法尼基化的肽，从而经放射性标记的法尼基与scintillant接触。在放射活性计数器中读取该平板，数据转化为对照的百分比，从而以导致50％法尼基化抑制的试验产物的浓度(IC50)这一形式表示结果。
对于GGT酶-I，使用等价的试验，用生物素基化的序列TKCVIL代替受体底物，用[3H]焦磷酸香叶草基香叶草基酯代替供体底物。结果本发明的化合物对于FT酶具有纳摩尔级的IC50，显示出它们作为这种酶的有力的抑制剂的特征，与GGT酶-I比较，证明具有适合的选择性，在后者的情况下IC50仅为微摩尔级。实施例B细胞增殖试验a)大鼠成纤维细胞的RAT2系和适当的用于插入基因v-H-ras的转染子测试权利要求产品对细胞的有效性。RAT2细胞能够表征测试产品的内在毒性，而被转染的细胞表现出变化的形态和更迅速的生长速度，适合用于测量所期望的对细胞内FT酶的特定作用。
亲代和被转染的细胞在96孔细胞培养平板中在含有10％血清的介质存在下培养。24小时后，在4天期间，将试验产品加入到相同的介质中，通过细胞活力方法使用3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑律溴化物(MTT)对细胞的最终数量进行间接评价。结果在本发明化合物的情况下，在纳摩尔范围内观察到被v-H-ras转染的细胞的生长缓慢下降。这种作用，反映出被转染细胞返回到亲代系的生长特性，通过将转染子的形态逆转到亲代表型(扩散的损失和折射)也可以实现。数个对数单位将这种特定作用与在微摩尔范围内在RAT2细胞上观察到的细胞毒素作用分隔开，最有利的差量是对于最有活性的产物有至少4个单位。a)在从临床活组织检查中得到的人的癌品系上进行补充试验。所用的品系均来自于ATCC(American Type Culture Collection)，试验在96孔平板中进行，与产物接触的时间相应于4个倍增期。结果在本发明化合物用于品系EJ138——表现出H-Ras蛋白突变的膀胱癌——的情况下，在显微镜下观察并用MTT方法间接计数，得到一百纳摩尔级的IC50表示的抗增殖活性。通过类似于在大鼠v-H-ras转染子上观察到的对细胞形态的作用实现抑制。实施例C大鼠蛋白质体外异戊烯化试验被v-H-ras转染的大鼠成纤维细胞和表现出H-Ras突变的EJ138膀胱癌细胞以高密度培养，然后在24小时后用不同浓度的试验化合物处理48小时。细胞溶解产物在电泳胶上沉淀，转移分离的蛋白用于蛋白质印迹，使用直接对抗Ras蛋白的抗体识别异戊烯化的或非异戊烯化的形式。结果使用本发明的化合物，观察到将Ras的法尼基化修饰在10nM级浓度减半的效果，同时它们对提纯的FT酶有效。实施例D在琼脂中的生长细胞在琼脂中在血清和各种浓度的试验化合物存在下培养以评价它们独立于底物的生长。在那些称为克隆基因生长的条件下，在试验期间(2周)保持RAT2细胞为隔离的且可生长的细胞。相反地，被v-H-ras转染的细胞形成多细胞群，可对其计数并且可通过图象分析测量其大小。结果本发明的化合物以10nM级的IC50抑制聚集体的形成而不产生细胞毒素作用，因为大部分用高于IC50的浓度处理的被转染细胞保持为被隔离且可生长的细胞的形式，类似于未处理的亲代RAT2细胞。实施例E体外血管生成试验该试验包括根据Lab Invest 1990，63，115-122中所述的方法在三维胶原凝胶中、在完全定义培养基中并且不使用血清进行大鼠主动脉碎片的培养。从培养的第三天开始发展血管分枝，在其之前是各个相互不同的成纤维细胞发生可评价的迁出。结果在这些培养条件下和与本发明化合物接触5天后，观察到对细胞赘生物的选择抑制效果只有内皮细胞受到影响，IC50为百纳摩尔级。
权利要求
1.式(I)化合物 其中X表示一个键或选自亚烷基、CO、S(O)n、*-S(O)n-A1-、*-CO-A1-、-A1-S(O)n-A’1-和-A1-CO-A’1-(其中A1和A’1相同或不同，表示亚烷基，n是0、1或2)的基团，符号“*”表示这些基团和环庚烯结合的点，Y表示芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R8基团取代，R1、R2、R3和R4分别彼此独立地表示氢原子或芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R8基团取代，或R1、R2、R3和R4成对地形成一个键，或R1和R2、或R2和R3、或R3和R4成对地与它们键连的碳原子一起形成稠合的苯环或稠合的芳香环的或部分不饱和的具有5或6个环原子且含有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的杂环，条件是仅有一个环可与7元结构稠合，T表示-CH(R5)-、-N(R5)-或*-N(R5)CO-基(其中R5表示氢原子或烷基、芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳基烷基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R7基团取代)，符号“*”表示这些基团和环庚烯结合的点，V表示氢原子或芳基或杂芳基，这些基团分别是未取代的或被一个或多个相同或不同的R7基团取代，A2表示[C(R6)(R’6)]p基，其中当T表示-N(R5)-基或*-N(R5)C0-基时p是0、1、2、3或4，或当T表示-N(R5)-基时p是1、2、3或4；R6和R’6可以相同或不同，表示氢原子或烷基、烯基、炔基、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂环烷基、任选被取代的芳烷基、任选被取代的杂芳基烷基或任选被取代的杂环烷基烷基、R9基团或被R9基团取代的烷基(其中R9表示-OR5、-N(R5)(R’5)、-S(O)mR5、-CON(R5)(R’5)、-N(R5)COR’5、-N(R5)SO2R’5、-SO2N(R5)(R’5)或-N(R5)COO(R’5)基，m是0、1或2，R’5可具有R5表示的任一含义)，R7表示卤原子或烷基、烷氧基、羟基、巯基、烷硫基、氰基、氨基(任选被一个或两个烷基取代)、硝基、羧基、烷氧基羰基、氨基羰基(任选被一个或两个烷基取代)、氨基甲酰基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的芳烷基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的杂芳基烷基、未取代的或取代的环烷基、未取代的或取代的环烷基烷基、未取代的或取代的杂环烷基或未取代的或取代的杂环烷基烷基，R8表示卤原子、或氧、羟基、氰基、硝基、羧基、烷氧基羰基或全卤代烷基或-U-R80或-A80-U-R80基(其中A80表示亚烷基；U表示一个键、氧原子或选自NH、S(O)m、NHCO、CONH、SO2NH和NHSO2，m是0、1或2；R80是选自烷基、芳基、芳烷基、杂芳基和杂芳基烷基的基团)，条件是-术语“烷基”表示有1-6个碳原子的直链或支链基团，-术语“亚烷基”表示有1-6个碳原子的直链或支链二价基团，-术语“环烷基”表示有3-8个碳原子饱和环基，-术语“杂环烷基”表示有5-7个环原子且含有1-3个选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和的环基，-术语“芳基”表示苯基或萘基，-术语“杂芳基”表示单环或双环基，其为芳族或含有至少一个芳环，具有5-11个环原子且含有1-5个选自氮、氧和硫的杂原子，-用于术语“芳基”、“杂芳基”、“环烷基”和“杂环烷基”的术语“取代的”表示这些基团可以被一个或多个相同或不同的选自氰基、烷基羰基、氨基羰基(任选被一个或两个烷基取代)和卤素原子的基团取代，-用于术语“芳烷基”、“杂芳基烷基”、“环烷基烷基”和“杂环烷基烷基”表示这些基团的环部分可以被一个或多个相同或不同的选自氧、氰基、烷基羰基、氨基羰基(任选被一个或两个烷基取代)和卤素原子的基团取代，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
2.根据权利要求1的式(I)化合物，其中X表示一个键，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
3.根据权利要求1的式(I)化合物，其中Y表示任选被R8取代的芳基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
4.根据权利要求1的式(I)化合物，其中每个R1、R2、R3和R4表示氢原子，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
5.根据权利要求1的式(I)化合物，其中T表示-N(R5)-基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
6.根据权利要求1的式(I)化合物，其中T表示-NH-基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
7.根据权利要求1的式(I)化合物，其中A2表示-CH2-或-CH2-CH2-基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
8.根据权利要求1的式(I)化合物，其中A2表示(4-氰基苯基)亚甲基、(4-氯苯基)亚甲基、(4-氰基苄基)亚甲基或(4-氯苄基)亚甲基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
9.根据权利要求1的式(I)化合物，其中V表示任选被R7取代的杂芳基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
10.根据权利要求1的式(I)化合物，其中V表示任选被R7取代的咪唑基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
11.根据权利要求9和10任一项的式(I)化合物，其中R7表示未取代的或取代的芳烷基或未取代的或取代的杂芳基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
12.根据权利要求1的式(I)化合物，其中X表示一个键；Y表示任选被R8取代的芳基；每个R1、R2、R3和R4表示氢原子；T表示-NH-基；A2表示-CH2-、-CH2-CH2-基、(4-氰基苯基)亚甲基、(4-氯苯基)亚甲基、(4-氰基苄基)亚甲基或(4-氯苄基)亚甲基；V表示任选被R7取代的杂芳基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
13.根据权利要求1的式(I)化合物，其中X表示一个键；Y表示任选被R8取代的芳基；每个R1、R2、R3和R4表示氢原子；T表示-NH-基；A2表示-CH2-、-CH2-CH2-基、(4-氰基苯基)亚甲基、(4-氯苯基)亚甲基、(4-氰基苄基)亚甲基或(4-氯苄基)亚甲基；V表示任选被R7取代的咪唑基，它们的对映体、非对映异构体和其药学可接受的酸或碱的加成盐。
14.根据权利要求1的式(I)化合物，其为(R，S)-4-{[5-({[3-(2-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈，4-{[5-({[3-(3-甲基苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈，和4-{[5-({[3-(3-氯苯基)-2-环庚烯-1-基]氨基}甲基)-1H-咪唑-1-基]甲基}苄腈。
15.制备根据权利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使用式(II)化合物作为原料 其中R1、R2、R3和R4定义如式(I)，其羰基官能基与式Li-X-Y的有机金属化合物反应，其中X和Y定义如式(I)，得到式(III)化合物 其中R1、R2、R3、R4、X和Y定义如前，将该化合物在酸性介质中进行异构化反应，生成式(IV)化合物 其中R1、R2、R3、R4、X和Y定义如前，式(IV)化合物在将羟基转变为一个离去基团后，进行-通过与甲硅烷基化合物反应引入一个活性官能基，甲硅烷基化合物是例如Me3SiCN、CH2＝CH-CH2-SiMe3或CH2＝C(Oalk)(OSiMe3)，其中alk表示烷基；然后与适当的基团缩合生成式(I/a)化合物 是式(I)化合物的一种特定情况，其中R1、R2、R3、R4、R5、A2、V、X和Y定义如前，-或与叠氮化钠作用，在三苯基膦存在下的水解后生成式(V)的胺 其中R1、R2、R3、R4、X和Y定义如前，式(V)化合物与下式的醛 其中V定义如前，R6和R’6定义如式(I)，R”6表示那些与R6或R’6定义中相同的原子或基团，p是1、2、3或4，缩合形成式(I/b)化合物 是式(I)化合物的一种特定情况，其中R1、R2、R3、R4、R’6、R”6、V、X、Y和p定义如前，[这类式(I/b)化合物还可从式(II’)化合物起始得到 其中R1、R2、R3和R4定义如前，其形成相应的甲硅烷基醚后，在强碱性介质中与化合物Y-X’-CHO反应，其中Y定义如前，X’表示一个键或亚烷基，脱保护后得到式(III’)化合物 其中R1、R2、R3、R4、X’和Y定义如前，该化合物与式V-A2-NH2的胺缩合，其中V和A2定义如前，得到式(I/ba)化合物，其为式(I/b)化合物的一种特定情况 其中R1、R2、R3、R4、X’和Y定义如前]，或式(V)化合物与其中V和A2定义如式(I)、Hal表示卤素原子的式V-A2-CO-Hal化合物进行酰化反应，或与其中V和A2定义如式(I)的式V-A2-COOH羧酸偶合，得到式(I’/b)化合物 其中R1、R2、R3、R4、A2、X和Y定义如前，化合物(I/b)和(I’/b)可如前所述与式R”5CHO的醛、或与式R”5-CO-Hal的酰卤、或与式R”5-COOH的羧酸进行相同类型的缩合，其中R”5可具有R5的任何除了氢原子以外的含义，得到式(I/c)化合物 其为式(I)化合物的一种特定情况，其中R1、R2、R3、R4、R5、A2、V、X和Y定义如前，式(I/a)、(I/b)、(I’/b)和(I/c)化合物构成了式(I)化合物的全体，-如果需要，其可用常规的提纯技术纯化，-如果适当，其可根据常规的分离技术分离成其异构体，-如果需要，其可用药学可接受的酸或碱转化成其加成盐。
16.药物组合物，含有至少一种根据权利要求1-14任一项的化合物作为活性成分，其单独使用，或与一种或多种惰性无毒药学可接受的赋形剂或载体结合。
17.根据权利要求16的含有至少一种根据权利要求1-14的活性成分的药物组合物在生产治疗癌性疾病的药物中的用途。
18.根据权利要求16的含有至少一种根据权利要求1-14的活性成分的药物组合物在生产治疗血管成形术或血管外科手术后的再狭窄和I型多发性神经纤维瘤的药物中的用途。
全文摘要
式(I)化合物及含其的药物:其中:X表示一个键或选自亚烷基、CO、S(O)
文档编号C07D233/64GK1365973SQ0210204
公开日2002年8月28日 申请日期2002年1月17日 优先权日2001年1月18日
发明者P·卡萨拉, T·勒迪古阿赫, G·多雷, J·希克曼, A·皮埃尔, G·图克, N·吉尔鲍德 申请人:瑟维尔实验室