外来体检测用单克隆抗体的制作方法

外来体检测用单克隆抗体的制作方法
【专利摘要】外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～195的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104～202的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36～54的单克隆抗体或其抗体片段、和识别SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113～201的单克隆抗体或其抗体片段。本发明的外来体检测用单克隆抗体可以以良好的灵敏度和特异性检测机体内外来体上的CD9、CD63或CD81。
NITE BP-1481
2012.12.12

FERM BP-11519
2012.12.14

FERM BP-11521
2012.12.14

NITE BP-1480
2012.12.12

FERM BP-11520
2012.12.14

NITE BP-1482
2012.12.12
【专利说明】外来体检测用单克隆抗体

【技术领域】
[0001] 本发明涉及检测外来体的抗体的套件。更详细而言，涉及针对外来体表面的特定 抗原（CD9、CD63、CD81)的单克隆抗体或其抗体片段、含有该单克隆抗体或其抗体片段的套 件、使用该单克隆抗体或其抗体片段来检测来源于外来体的miRNA的方法、测定该套件与 来源于受试者的机体试样的复合体的方法、使用该套件的癌或免疫系疾病的诊断方法和用 于实施该方法的试剂盒、以及使用该套件的抗癌剂或抗免疫系疾病药的药效评价方法和用 于实施该方法的试剂盒。

【背景技术】
[0002] 外来体是存在于机体内的体液中的囊泡颗粒。已知与通常的细胞表面相同地，在 外来体表面存在各种膜蛋白。另一方面，还已知在外来体内部，除了细胞因子等各种蛋白质 以外，还含有microRNA(miRNA)。此外，据报道外来体分泌自各种细胞、例如免疫系的细胞 或各种癌细胞，作为机体内的细胞间通信的媒介发挥功能而与生理现象关联、或者与癌等 疾病的关联性受到关注。
[0003] 例如，在非专利文献1中，报道了使用作为肿瘤标志物的EpCAM的抗体来分离卵巢 癌患者的循环血液中的外来体，并在来源于该外来体的miRNA表达量与卵巢癌患者之间发 现了关联性。因此，只要可简便地捕捉与癌等疾病关联的外来体的量的变化，则可期待在外 来体的诊断药中的应用。
[0004] 此外，⑶9、⑶63和⑶81是属于四跨膜蛋白家族的4次穿膜型膜蛋白，在许多外来 体上表达。例如,非专利文献2中报道了用⑶63的抗体、或肿瘤关联标志物的Caveolin-I 的抗体对黑素瘤患者血浆中的外来体进行检测、定量化，与正常人相比有所上升。专利文献 1中通过组合CD63抗体或针对各种膜蛋白的抗体等来与离心后的血浆样品反应，并对来源 于癌患者中的外来体的信号进行定量、分析。
[0005]现有技术文献 专利文献 专利文献I:W02010/065968号小册子 非专利文献 非专利文献I:D.D.Taylor，etal·、Gynecol.Oncol.、2008、110、pl3_21 非专利文献 2 :M.Logozzi，etal.、PLoS0NE、2009、4、pl-10。


【发明内容】

[0006] 发明要解决的技术问题 作为抗CD9抗体、抗CD63抗体和抗CD81抗体，销售有各种抗体。这些市售抗体是通过 直接免疫表达CD9、CD63或CD81的细胞而得的抗体之一，而并不是利用设计的特定抗原进 行免疫得到的抗体。因此，在灵敏度、特异性方面尚不充分，为了迅速且简便、而且准确且精 度良好地检测外来体,需要进一步的技术开发。
[0007] 本发明的课题在于提供：能够以良好的灵敏度和特异性检测或捕捉机体内外来体 的单克隆抗体或其抗体片段、含有该单克隆抗体或其抗体片段的套件、测定该套件与来源 于受试者的机体试样的复合体的方法、使用该套件的癌或免疫系疾病的诊断方法、以及使 用该套件的抗癌剂或抗免疫系疾病药的药效评价方法。
[0008] 用于解决技术问题的方法 本发明人为了解决上述课题而反复深入研究，结果发现，通过制备并使用针对外来体 上的CD9、CD63和CD81的特定序列的单克隆抗体，能够以良好的灵敏度和特异性检测和捕 捉机体内外来体，从而完成了本发明。
[0009]艮P、本发明涉及： < 1 >外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQIDNO:1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?195的单克隆抗体或其抗体片段、识 别SEQIDNO:2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104?202的单克隆抗体或其抗体片段、 识别SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36?54的单克隆抗体或其抗体片段、 和识别SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?201的单克隆抗体或其抗体片 段。 更详细而言，涉及以下的< 2 >?< 13 >。
[0010]<2>外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：作为识别SEQIDNO: 1所示的 氨基酸序列的氨基酸编号113?195的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERMABP-11519 保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（CD9-12A12抗体）或其片段； 作为识别SEQIDNO:2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104?202的单克隆抗体片段 的由以保藏编号FERMABP-11520保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶63-8A12抗体)或其 片段； 作为识别SEQIDNO:2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104?202的单克隆抗体片段 的由以保藏编号FERMABP-11521保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶63-13C8抗体)或其 片段； 作为识别SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?201的单克隆抗体片段 的由以保藏编号NITEABP-1480保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶81-4G6抗体)或其片 段； 作为识别SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?201的单克隆抗体片段 的由以保藏编号NITEABP-1481保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶81-6D12抗体）或其 片段；和 作为识别SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36?54的单克隆抗体片段的 由以保藏编号NITEABP-1482保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶81-12C4抗体）或其片 段。
[0011] <3>单克隆抗体或其抗体片段的套件，其包含选自下述的同一或二种抗体 或其抗体片段的组合：⑶9-12A12抗体或其抗体片段、⑶63-8A12抗体或其抗体片段、和 ⑶63-13C8抗体或其抗体片段。
[0012] <4>前述<3 >所述的套件，其选自：固相抗体为⑶9-12A12抗体或其抗体片 段、标记抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段的套件； 固相抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD63-13C8抗体或其抗体片段 的套件； 固相抗体为CD63-8A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段 的套件；和 固相抗体为CD63-8A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD63-13C8抗体或其抗体片段 的套件。
[0013] <5 >前述<3 >或<4>所述的套件，其用于检测外来体。
[0014] < 6 >疾病特异性的外来体检测用单克隆抗体的套件，其包含选自⑶9-12A12 抗体或其抗体片段、CD63-8A12抗体或其抗体片段、和CD63-13C8抗体或其抗体片段中的抗 体或其抗体片段、与疾病特异性膜蛋白抗体或其抗体片段的组合。
[0015] < 7 >癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有前述< 3 >?< 5 >中任一项所 述的套件的单克隆抗体或其抗体片段。
[0016] < 8 >癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有前述< 6 >所述的套件的单克隆 抗体或其抗体片段。
[0017] <9>癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有前述< 6>所述的套件。
[0018] <10>检测外来体的miRNA的方法，该方法包括：使来源于受试者的机体试样 与前述< 1>或< 2 >所述的单克隆抗体接触而捕捉该外来体。
[0019] <11>测定来源于外来体复合体的信号强度的方法，该方法包括：使来源于受 试者的机体试样与前述<3>?<5>中任一项所述的套件的单克隆抗体接触而形成该外 来体复合体。
[0020] < 12 >癌或免疫系疾病的判定方法，其是用于判定受试者是否具有癌或免疫 系疾病的发病的方法，该方法包括： 步骤（I):使来源于受试者的机体试样与前述< 3 >?< 5 >中任一项所述的套件的 单克隆抗体接触而形成外来体复合体，并测定来源于该复合体的信号强度的步骤；和 步骤（II):将前述步骤（I)中测定得到的信号强度与对照者的信号强度进行对比，在确 认前述受试者的信号强度较对照者的信号强度强时，判定前述受试者具有癌或免疫系疾病 的发病的步骤。
[0021] < 13 >抗癌剂或抗免疫系疾病药的药效评价方法，该方法包括： 步骤(A):使来源于抗癌剂或抗免疫系疾病药的给药前和给药后的受试者的机体试样 与前述< 3 >?< 5 >中任一项所述的套件的单克隆抗体接触而形成外来体复合体，并测 定来源于该复合体的信号强度的步骤；和 步骤（B):在确认前述来源于抗癌剂或抗免疫系疾病药的给药后的受试者的机体试样 的来源于该复合体的信号强度较前述来源于抗癌剂或抗免疫系疾病药的给药前的受试者 的机体试样的来源于该复合体的信号强度弱时，判定抗癌剂或抗免疫系疾病药显不药效的 可能性高的步骤。
[0022] 发明效果 本发明的外来体检测用单克隆抗体能够以良好的灵敏度和特异性检测和捕捉机体内 外来体上的⑶9、⑶63或⑶81。藉此实现了下述优异效果：可以捕捉血液样本内的外来体 的微小变化(除了外来体的量的变化之外，还包括外来体上的膜蛋白的CD9、CD63或CD81的 量的变化)，可以检测来源于癌等疾病的外来体的变化，可应用于诊断作为造成变化的原因 的疾病。

【专利附图】

【附图说明】
[0023] [图1]图1是示出利用外来体的诊断方法的概念的图。
[0024] [图2]图2是示出四跨膜蛋白家族（⑶9、⑶63和⑶81)的结构的图（图A)、和示 出抗体制作中使用的小环肽缀合物（图B)和大环Fc融合蛋白（图C)的图。
[0025] [图3]图3是用于抗原的⑶9和⑶63的序列信息。
[0026] [图4]图4是示出使用单克隆抗体的VLPs(Virus-Like-Particles，病毒样颗 粒）的评价方法（VLPELISA)。
[0027] [图5]图5是进行抗⑶9单克隆抗体的2次评价的图。
[0028] [图6]图6是进行抗⑶63单克隆抗体的2次评价的图。
[0029] [图7]图7是示出⑶9的外来体ELISA的标准曲线的图。
[0030] [图8]图8是示出⑶63的外来体ELISA的标准曲线的图。
[0031] [图9]图9是通过使用市售和本发明（自制)的抗⑶9抗体或抗⑶63抗体的外来 体ELISA对来自正常人、乳癌患者、和大肠癌患者的血清中的外来体的信号强度进行比较 的图。
[0032] [图10]图10是通过组合本发明的抗⑶9抗体和抗⑶63抗体的外来体ELISA 对来自正常人、乳癌患者、和大肠癌患者的血清中的外来体的信号强度进行测定的图。
[0033] [图11]图11是通过组合本发明的抗⑶9抗体或抗⑶63抗体与抗EpCAM抗体的 外来体ELISA对来自正常人、乳癌患者、和大肠癌患者的血清中的外来体的信号强度进行 测定的图。
[0034] [图12]图12是用于抗原的⑶81的序列信息。
[0035] [图13]图13是将本发明的抗CD9抗体与市售的抗CD9抗体进行免疫沉降性能 比较的图。
[0036] [图14]图14是将本发明的抗CD63抗体与市售的抗CD63抗体进行免疫沉降性 能比较的图。
[0037] [图15]图15是将本发明的抗CD81抗体与市售的抗CD81抗体进行免疫沉降性 能比较的图。

【具体实施方式】
[0038] 本发明的外来体检测用单克隆抗体具有下述特征：能够以良好的灵敏度和特异性 检测或捕捉机体内外来体上的CD9、CD63或CD81。所以，有时也将本发明的单克隆抗体记 载为外来体检测或捕捉用单克隆抗体。
[0039] 外来体上的⑶9、⑶63、⑶81分别是由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列组成的多 肽、由SEQIDNO:2所示的氨基酸序列组成的多肽、由SEQIDNO:3所示的氨基酸序列组成 的多肽。此外，CD9、CD63和CD81均是属于具有图2A所示4次穿膜型的结构的四跨膜蛋白 家族的膜蛋白。这些膜蛋白将小环(记为EC1)和大环(记为EC2)这2种环结构提呈至细胞 夕卜，本发明的单克隆抗体的特征在于，对这些环表现出特异性的识别。
[0040]以下，对本发明的外来体检测或捕捉用单克隆抗体的制备方法、含有该抗体的套 件、利用该抗体或套件的评价方法、和使用该抗体的外来体的捕捉进行详述。
[0041] <单克隆抗体的制备方法> (抗原的制备） 本发明的单克隆抗体是如下所述设计抗原而制备的，因而对抗原的灵敏度和特异性优 异。
[0042] 依照公知的方法合成外来体的⑶9、⑶63或⑶81的小环肽，S卩，在⑶9多肽的 Arg36_Asn50、0)63 多肤的Val38_Pro54、0)81 多肤的Arg36_Ala54 的氨基末端添加了半 胱氨酸残基的肽。对于所得的各肽，使用进行了马来酰亚胺化的KLH〔KeyholeLimpet HemocyaniruImject(注册商标)MaleimideActivatedmcKLH、1^。7 7社制〕，经由肤的SH 基制备半抗原。图2B示出前述免疫原的模式图，图3A和图12A示出其肽序列。
[0043] 此外，家兔IgG的Fc区与⑶9、⑶63或⑶81的大环肽的融合蛋白（Fe融合蛋白） 也可用作抗原。具体可如下制备：将导入了与在⑶9多肽的Hisll3-Ilel95、⑶63多肽的 Glyl04-Asn202、CD81多肽的Phell3-Lys201的羧基末端添加有Fc的多肽对应的多核苷酸 序列的质粒载体导入例如Freestyle293-F细胞（Invitrogen公司（4V匕'卜口 '7'工V 社）制)并瞬时表达，然后使用蛋白A柱（MAPSII试剂盒、Bio-RadLaboratoriesInc.) 进行纯化，由此制备。图2C示出前述免疫原的模式图，图3B和图12B示出其肽序列。
[0044](单克隆抗体的制备） 本发明的外来体检测用单克隆抗体（以下也简称为本发明的单克隆抗体）并无 特别限定，可依照公知的方法、例如、K.Watanabeetal.，Vasohibinasan endothelium-derivednegativefeedbackregulatorofangiogenesis,J.Clin. Invest. 114 (2004),898-907 中记载的方法制备。
[0045] 具体地，首先使用上述所得的抗原对哺乳动物进行免疫。作为哺乳动物，没有特别 限制，通常可使用小鼠、大鼠、牛、兔、山羊、绵羊、豚鼠等。其中，优选小鼠和大鼠、更优选小 鼠、作为所述小鼠，例示有A/J系、BALB/C系、DBA/2系、C57BL/6系小鼠。此外，该哺乳动物 的年龄根据使用的动物种类而不同，没有特别限定，在小鼠或大鼠的情形，通常为约4?12 周龄、优选为约5?10周龄。应予说明，为了制造本发明的单克隆抗体，可以考虑与进行细 胞融合的转化细胞的适合性来选择这些哺乳动物。
[0046] 为了增强免疫应答，抗原与佐剂混合而作为免疫原使用。作为佐剂，可以没有特别 限定地使用公知的佐剂。此外，该佐剂与抗原的混合，对于使用的佐剂，可以依照本领域公 知的方法。
[0047] 哺乳动物的免疫依照本领域公知的方法进行。例如，通过将免疫原向哺乳动物的 皮下、皮内、静脈、和/或腹腔内注射给药来进行。此外，免疫原的给药可以在最初的免疫后 重复数次进行，其给药间隔可适宜调整。应予说明，免疫应答根据被免疫的哺乳动物的种类 和系统而不同，因而免疫计划和免疫原的给药量可对应于所用动物适宜设定。
[0048] 如此，可在经免疫的哺乳动物体内制备所期望的抗体产生细胞。作为所述抗体产 生细胞，优选为在免疫原的最终给药的3?5天后采集的脾细胞。应予说明，为了使经免疫 的哺乳动物的脾脏肥大化，可以进行加强(免疫原的追加注射)。在加强中所给药的免疫原 的量理想的是最初给药的免疫原的量的约4?5倍，可以以此为标准进行适宜增减。
[0049] 接着，将所得抗体产生细胞与来源于骨髓瘤的细胞（骨髓瘤细胞）进行细胞融合， 制备杂交瘤。
[0050] 杂交瘤的增殖能力依赖于细胞融合中所用骨髓瘤细胞的种类，因而作为骨髓瘤细 胞，优选为增殖能力优异的细胞。此外，骨髓瘤细胞优选与产生待融合抗体产生细胞的哺乳 动物具有相容性。作为该实例，例示有小鼠骨髓瘤P3Ul、X63-Ag8. 653等骨髓瘤细胞。
[0051] 细胞融合的方法可以使用本领域公知的方法，例如，例示有使用聚乙二醇（PEG)的 方法、使用仙台病毒的方法、使用电融合装置的方法等。
[0052] 所得的杂交瘤可以依照公知方法通过用选择培养基培养来分离。应予说明，为了 确认所选择的杂交瘤是否产生所期望的抗体，可以采集培养上清，基于公知的方法、例如、 后述ELISA法进行抗体效价测定。
[0053] 这样，可以得到产生所期望的单克隆抗体的杂交瘤。该杂交瘤可以用通常的培养 基传代培养，还可以在液氮中半永久地保存。
[0054] 所期望的单克隆抗体可以通过体内和体外的培养法来大量制备。体外培养法可通 过在适当的血清培养基或无血清培养基中培养杂交瘤来实施，所期望的单克隆抗体产生在 培养基中。根据该培养法，可以以培养上清的形式得到比较高纯度的所期望的抗体。此外， 体内培养法可以通过将杂交瘤注射接种于与杂交瘤具有相容性的哺乳类动物、例如小鼠等 的腹腔内并进行增殖来实施，所期望的抗体可以以小鼠腹水的形式大量回收。
[0055] 所得培养上清和小鼠等的腹水可以直接作为粗制抗体液使用。此外，它们可以依 照常法，例如，通过适宜组合DEAE阴离子交换色谱法、亲和色谱法、硫酸铵分级沉淀法、PEG 分级沉淀法、乙醇分级沉淀法等来纯化，制为纯化抗体。
[0056] 这样得到的本发明的单克隆抗体示于表1。本说明书中，各单克隆抗体可通过抗原 蛋白和克隆编号来表示，例如，可表示为CD9-12A12抗体。
[0057] [表 1]

【权利要求】
1. 外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：能够检测或捕捉外来体的、识别SEQ ID NO :1所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?195的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104?202的单克隆抗体或其抗体片段、识别SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36?54的单克隆抗体或其抗体片段、和识别SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?201的单克隆抗体或其抗体片段。
2. 外来体检测或捕捉用单克隆抗体，其选自：作为识别SEQ ID NO :1所示的氨基酸序 列的氨基酸编号113?195的单克隆抗体片段的由以保藏编号FERM ABP-11519保藏的杂 交瘤产生的单克隆抗体（CD9-12A12抗体）或其片段； 作为识别SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104?202的单克隆抗体片段 的由以保藏编号FERM ABP-11520保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶63-8A12抗体)或其 片段；作为识别SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列的氨基酸编号104?202的单克隆抗体片段 的由以保藏编号FERM ABP-11521保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶63-13C8抗体)或其 片段；作为识别SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?201的单克隆抗体片段 的由以保藏编号NITE ABP-1480保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶81-4G6抗体)或其片 段；作为识别SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列的氨基酸编号113?201的单克隆抗体片段 的由以保藏编号NITE ABP-1481保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶81-6D12抗体）或其 片段；和作为识别SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列的氨基酸编号36?54的单克隆抗体片段的 由以保藏编号NITE ABP-1482保藏的杂交瘤产生的单克隆抗体（⑶81-12C4抗体）或其片 段。
3. 单克隆抗体或其抗体片段的套件，其包含选自下述的同一或二种抗体或其抗体片 段的组合：⑶9-12A12抗体或其抗体片段、⑶63-8A12抗体或其抗体片段、和⑶63-13C8抗体 或其抗体片段。
4. 权利要求3所述的套件，其选自：固相抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段、标记抗 体为CD9-12A12抗体或其抗体片段的套件； 固相抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD63-13C8抗体或其抗体片段 的套件；固相抗体为CD63-8A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD9-12A12抗体或其抗体片段 的套件；和固相抗体为CD63-8A12抗体或其抗体片段、标记抗体为CD63-13C8抗体或其抗体片段 的套件。
5. 权利要求3或4所述的套件，其用于检测外来体。
6. 疾病特异性的外来体检测用单克隆抗体的套件，其包含选自CD9-12A12抗体或其 抗体片段、CD63-8A12抗体或其抗体片段、和CD63-13C8抗体或其抗体片段中的抗体或其抗 体片段、与疾病特异性膜蛋白抗体或其抗体片段的组合。
7. 癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有权利要求3?5中任一项所述的套件的单克 隆抗体或其抗体片段。
8. 癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有权利要求6所述的套件的单克隆抗体或其 抗体片段。
9. 癌或免疫系疾病的诊断试剂盒，其含有权利要求6所述的套件。
10. 检测外来体的miRNA的方法，该方法包括：使来源于受试者的机体试样与权利要 求1或2所述的单克隆抗体接触而捕捉该外来体。
11. 测定来源于外来体复合体的信号强度的方法，该方法包括：使来源于受试者的机 体试样与权利要求3?5中任一项所述的套件的单克隆抗体接触而形成所述外来体复合 体。
12. 癌或免疫系疾病的判定方法，其是用于判定受试者是否具有癌或免疫系疾病的发 病的方法，该方法包括： 步骤（I):使来源于受试者的机体试样与权利要求3?5中任一项所述的套件的单克 隆抗体接触而形成外来体复合体，并测定来源于该复合体的信号强度的步骤；和步骤（II):将前述步骤（I)中测定得到的信号强度与对照者的信号强度进行对比，在确 认前述受试者的信号强度较对照者的信号强度强时，判定前述受试者具有癌或免疫系疾病 的发病的步骤。
13. 抗癌剂或抗免疫系疾病药的药效评价方法，该方法包括： 步骤(A):使来源于抗癌剂或抗免疫系疾病药的给药前和给药后的受试者的机体试样 与权利要求3?5中任一项所述的套件的单克隆抗体接触而形成外来体复合体，并测定来 源于该复合体的信号强度的步骤；和步骤（B):在确认前述来源于抗癌剂或抗免疫系疾病药的给药后的受试者的机体试样 的来源于该复合体的信号强度较前述来源于抗癌剂或抗免疫系疾病药的给药前的受试者 的机体试样的来源于该复合体的信号强度弱时，判定抗癌剂或抗免疫系疾病药显不药效的 可能性高的步骤。
【文档编号】C07K16/18GK104302667SQ201280064577
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2012年12月26日 优先权日:2011年12月26日
【发明者】太田英树, C.冈田, 村上登美, 冈本博之, 园田光 申请人:盐野义制药株式会社