专利名称：牛蒡菊糖及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种植物菊糖及其提取方法的改进，具体讲是一种牛蒡菊糖及其制备方法，其生物工程化工技术领域。
背景技术：
牛蒡(Arctium lappa L.)《本草纲目》又名大力子，亦称“东洋萝卜”，“黑萝卜”，别称“恶实”，是菊科二年生草本植物，在我国已实现大面积的人工栽培。主要利用其根，作为一种新特蔬菜，习惯用于食用。目前，牛蒡的经济价值仅限于出口蔬菜，国际市场对出口牛蒡规格要求较高，造成每年等外根大量堆积被当作废物废弃，并造成一定的环境污染。也有用牛蒡根下脚料饲喂家畜和家禽的，但其经济价值也不会高。据记载与报道，牛蒡是一种中药，其味甘平无毒，有健胃、益气、滋阴壮阳、清热解毒之功效；能抵制精神萎缩，防止脂肪沉积，维持血管壁弹性，防止高血压、动脉硬化，并对各种类风湿性关节炎具有疗效。牛蒡是一种药食同源植物。
菊糖又称菊粉，广泛存在于自然界多种植物之内，例如菊芋、菊苣、大丽菊、洋葱等。它是一种由D-果糖经糖苷键聚合而成多糖形式的果糖复合物，其聚合度一般为2-60。菊糖活性广泛，具有多方面的生理功能，它本身是一种功能性果聚糖，因此是双歧杆菌的促生长因子，具有改善食品和饲料的性能，可作为防治肿瘤、冠心病、糖尿病、结肠癌、便秘等的保健食品配料和天然药物。目前，菊糖已在美国、英国等国被认为是一种天然食品配料而非添加剂。菊糖商品的主要来源为天然植物，目前工业上一般多从菊芋根中提取菊芋菊糖。从菊芋提取的菊糖，其提取工艺繁琐，要获取低聚合度的菊糖，需要用内切菊糖酶进一步降解而制成。菊芋菊糖是一种聚合度在25--35的果糖复合物。
据报道，牛蒡的根含有高含量的菊糖。据估计山东、江苏两地20万亩牛蒡种植地，能年产10万吨尚未充分利用的等外牛蒡根。以低成本的等外牛蒡根为原料制备的牛蒡菊糖以及提取菊糖的工艺研究，目前尚未见公开报道。
发明内容本发明的目的是弥补现有技术的不足，提供一种牛蒡菊糖以及从牛蒡根中提取菊糖的制备方法新工艺。该制备方法的提取工艺完善可行，操作简单，节省劳动力，降低牛蒡菊糖的总生产成本，提高牛蒡菊糖的提取率，达到为80％以上。
本发明的目的是由以下技术方案实现的，研制了一种牛蒡菊糖，其基本物化性质是外观为白色或淡黄色固体粉末，易吸湿，易结块，微甜，无臭，易溶于水；有热稳定性，其与碘不呈颜色反应；有旋光性，其在水中为左旋，旋光度在-29.8±2°。该菊糖的结构式是由呋喃构型的D-果糖，经β(2→1)糖苷键聚合而成寡糖式低聚果糖，其分子链终端以α(1→2)糖苷键连接一个葡萄糖分子；其结构式如下 n＝10～12该菊糖的分子简式可用GFn表示，其中G为葡萄糖(glucose的缩写)，F为果糖(fructose的缩写)，n为聚合度。
经分析表明该菊糖平均分子量为1976--2230；经紫外光谱(UV)分析表明该菊糖在紫外区202nm有一吸收峰；经分析该菊糖在葡聚糖凝胶层析法(SephedexG-50)的分部收集图谱中，出现形状对称的单一峰，即表明该菊糖纯度较高，具有均一组分；该无定形疏松状固体粉末的牛蒡菊糖是由牛蒡及等外牛蒡根原料中提取的。
所述牛蒡菊糖的制备方法是先将牛蒡及等外牛蒡根经清洗40--60℃下干燥--粉碎成粉末，再按适当的投料比，以如下步骤处理(1)将上述按投料比称量的干原料粉末分次热水浸提；(2)分次过滤，合并提取液，取提取液，分离的残渣另做处理；(3)将上述提取液经除去小分子杂质和脱色处理；(4)将(3)步收集的提取液，减压浓缩至原体积的1/3；(5)将(4)步的浓缩液脱蛋白，离心除去滤渣；(6)将(5)步收集的滤液，用4倍于该滤液体积的95％乙醇，或用3倍于该滤液体积的无水乙醇，进行乙醇沉析，再在4℃冰箱中静置过夜；(7)将(6)步乙醇沉析的混合物，在4000r/min、15min条件下离心，除去上清液；(8)将(7)离心处理的滤饼，用无水乙醇、丙酮溶剂反复洗涤沉淀，并抽滤，去除残留溶剂；(9)将(8)抽滤处理的滤饼，真空干燥制粉先在40--60℃、真空度0.085MPa条件下，干燥4--5小时，再粉碎得白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末的、提取率为85±1％的牛蒡菊糖成品。
所述的适当的投料比是干原料粉末与水的重量/体积比为1∶5--15(Kg/l)。
所述的(1)步是将称量的干原料粉末分2--3次热水浸提，每次浸提保持恒温水温80±5℃，每次浸提保持恒温的时间0.5--1小时。
所述的(3)步的除去小分子杂质和脱色处理是采用大孔吸附树脂洗脱法。
所述的(4)步的减压浓缩是在60℃下旋转蒸发真空浓缩设备中进行的。
所述的(5)步的脱蛋白是用改良的Sevage法，即是将Sevage试剂(氯仿∶正丁醇＝1∶4，V/V)，按该试剂与浓缩液的体积比1∶3--5投料，反复浸泡处理；每次加入Sevage试剂后混合均匀，静置20--30分钟，使混合液完全分层，除去下层的蛋白质变性胶状物，保留上清液层；再按上述比例加入Sevage试剂后混合均匀，再继续静置20--30分钟，待混合液完全分层后分离，保留上清液层；如此反复处理9--10次，再离心除去滤渣。
所述的(5)步的脱蛋白还可用三氯醋酸法，其是在浓缩液中加入1.5倍体积的5％三氯醋酸，摇匀后， 迅速于冰箱中放置4--6小时，出现分层后，在室温下3000rpm离心，除去下层白色沉淀，如此反复处理处理2--3次。
所述的(6)步的乙醇沉析，其是用4倍体积的95％乙醇或3倍体积的无水乙醇加入到(5)步收集的滤液，使混合液的乙醇终浓度达到75％(V/V)后，在4℃冰箱中放置过夜，再在室温和4000rpm、15min条件下，离心除去上清液，保留沉淀。
所述的(8)步中的用无水乙醇、丙酮溶剂反复洗涤，是用无水乙醇和丙酮溶剂反复漂洗洗涤5分钟，抽滤去除残留溶剂；如此反复漂洗2-3次，直至沉淀物颜色呈白色或淡黄色。
本发明的优点在于由于研究了用牛蒡及等外牛蒡根提取菊糖的工艺条件。选择投料的固液比、提取温度、提取时间、提取次数四个因素作为单因素进行梯度实验，确定其条件范围，并采用正交设计法优化提取条件，得到了牛蒡菊糖提取工艺的诸因素的组合，主要有投料的固液比为1∶5--15，热水浸提的提取温度80±5℃，每次热水浸提的提取时间0.5--1小时，热水浸提的重复提取2--3次，且对菊糖的脱蛋白和醇析方法作了较为深入的研究。本发明优化的制备方法所得的该菊糖的结构式是由呋喃构型的D-果糖，经β(2→1)糖苷键聚合而成寡糖式低聚果糖，其分子链终端以α(1→2)糖苷键连接一个葡萄糖分子。经高效凝胶渗透色谱法(HP-GPC)分析表明该菊糖平均分子量为1976--2230，从而推算出其聚合度n在10～12；经紫外光谱(UV)分析表明该菊糖在紫外区202nm有一吸收峰，而在紫外区260nm和280nm处无吸收峰，表明其不含蛋白质和核酸等大分子杂质。经红外光谱(IR)分析表明该菊糖具备菊糖的某些特征基团；经葡聚糖凝胶层析法(SephedexG-50)分析表明该菊糖在分部收集中出现形状对称的单一峰，说明其纯度较高，是均一组分；该外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末的牛蒡菊糖是由牛劳及等外牛蒡根原料中提取的，这些技术指标是前所未有的。尤其是本发明牛蒡菊糖的聚合度在10～12左右，是天然的低聚果糖，纯度较高，不需要菊糖酶或其它酶来降解，因此牛蒡菊糖也可称作为牛蒡寡糖。本发明为菊糖的商品化生产寻找到了一种新原料——等外牛蒡根，并提供了一种制备牛蒡菊糖的工艺方法。可想而知，等外牛蒡根作原料，成本非常低廉，将大大降低菊糖的总生产成本，而且本发明的工艺方法完善可行，操作简单，节省劳动力，提高了牛蒡菊糖的提取率，达到为85％以上。
(四)附图及其实施例本发明的实施例结合
如下图1-3为高效凝胶渗透色谱法(HP-GPC)的色谱图。
图4为葡聚糖凝胶层析法(SephedexG-50)的色谱图。
图5为牛蒡菊糖的紫外光谱(UV)的色谱图。
参见图1-3是用于测定牛蒡菊糖的平均分子量的色谱图，所测定的该菊糖平均分子量为1976--2230。图4是用于测定牛蒡菊糖纯度的洗脱曲线图。图5是牛蒡菊糖的紫外光谱(UV)扫描的色谱图。
本发明经对牛蒡菊糖的分析测定，用改良的苯酚硫酸法，检测样品中菊糖的含量。经测定，菊糖含量为80±5％。计算工艺过程的 经该菊糖分析，该菊糖提取率能高达85％以上。
本发明的保护范围并不局限于以下实施例中。
实施例1取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、60℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用10倍体积的热水于80℃恒温下浸提牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入95％乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性，与碘不呈颜色反应，表明没有还原性，有旋光性。
实施例2取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、50℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用15倍体积的热水于85℃恒温下浸提牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入95％乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
实施例3取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、65℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用8倍体积的热水于80℃浸提干牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
实施例4取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、50℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用6倍体积的热水于80℃浸提干牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解，有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
实施例5取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、60℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用5倍体积的热水于80℃浸提干牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入95％乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
实施例6取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、70℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用12倍体积的热水于75℃浸提干牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再用三氯醋酸法脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入95％乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
实施例7取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、65℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用8倍体积的热水于85℃浸提干牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
实施例8取新鲜牛蒡根，将其用自来水清洗，自然晾干，用人工或切片机切成大小厚度均一的薄片、60℃下烘箱干燥、机械粉碎到40目左右，成为牛蒡干粉，称量备用。
用10倍体积的热水于80℃浸提干牛蒡粉。每次提取后过滤，用双层滤布初滤，然后将滤液再用布氏漏斗抽滤，从而完全分离残渣(牛蒡渣用来提取膳食纤维)和提取液，合并提取液。将酸化(pH＝4)后的大孔吸附树脂(3250树脂或其它规格型号的树脂)装入层析柱(Φ3.5×50cm或其它规格型号)中，用去离子水平衡后，使提取液以一定流速流经树脂床，洗脱小分子杂质和脱色，接收流出液，并用α-奈酚硫酸法随时检验流出液是否是含糖组分。将收集的提取液在60℃下旋转蒸发真空浓缩至原体积的1/3，浓缩液再脱蛋白，脱蛋白后的滤液中加入无水乙醇，使乙醇终浓度达到75％，4℃冰箱中静置过夜，在室温、4000rpm、15min条件下离心除去上清液，保留沉淀。再用无水乙醇、丙酮反复洗涤沉淀2-3次，布氏漏斗抽滤，去除残留溶剂。将沉淀物于40℃、真空度0.085MPa下干燥4-5h，然后经小型粉碎机粉碎得样品。外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，极易吸湿，易结块，微甜，无臭。溶于冷水中，而在热水中能很快溶解；有很好的热稳定性；与碘不呈颜色反应，表明没有还原性；有旋光性。
本发明的制备方法中工艺条件实施例，如下表
权利要求
1.一种牛蒡菊糖，其基本物化性质是外观为白色或淡黄色固体粉末，易吸湿，易结块，微甜，无臭，易溶于水，有热稳定性，其与碘不呈颜色反应，有旋光性，其在水中为左旋，旋光度在-29.8±2°；其特征在于该菊糖的结构式由呋喃构型的D-果糖，经β(2→1)糖苷键聚合而成寡糖式低聚果糖，其分子链终端以α(1→2)糖苷键连接一个葡萄糖分子；其结构式如下 n＝10～12该菊糖的分子简式GFn，其中G为葡萄糖，F为果糖，n为聚合度；经分析表明该菊糖平均分子量为1976--2230；经紫外光谱分析表明该菊糖在紫外区202nm有一吸收峰；经分析该菊糖在葡聚糖凝胶层析法的分部收集图谱中，出现形状对称的单一峰，即表明该菊糖纯度较高，具有均一组分；该无定形疏松状固体粉末的牛蒡菊糖是由牛蒡及等外牛蒡根原料中提取的。
2.根据权利要求1所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于先将牛蒡及等外牛蒡根经清洗40--70℃下干燥--粉碎成粉末，再按适当的投料比，以如下步骤处理(1)将上述按投料比称量的干原料粉末分次热水浸提；(2)分次过滤，合并提取液，取提取液，分离的残渣另做处理；(3)将上述提取液，经除去小分子杂质和脱色处理；(4)将(3)步收集的提取液，减压浓缩至原体积的1/3；(5)将(4)步的浓缩液脱蛋白，离心除去滤渣；(6)将(5)步收集的滤液，用4倍于该滤液体积的95％乙醇，或用3倍于该滤液体积的无水乙醇，进行乙醇沉析，再在4℃冰箱中静置过夜；(7)将(6)步乙醇沉析的混合物，在4000r/min、15min条件下离心，除去上清液；(8)将(7)离心处理的滤饼，用无水乙醇、丙酮溶剂反复洗涤沉淀，并抽滤，去除残留溶剂；(9)将(8)抽滤处理的滤饼，真空干燥制粉先在40--60℃、真空度0.085MPa条件下，干燥4--5小时，再粉碎得白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末的、提取率为85±5％的牛蒡菊糖成品。
3.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的适当的投料比是干原料粉末与水的重量/体积比为1∶5--15(Kg/l)。
4.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(1)步是将称量的干原料粉末分2--3次热水浸提，每次浸提保持恒温水温80±5℃，每次浸提保持恒温时间0.5--1小时。
5.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(3)步的除去小分子杂质和脱色处理是采用大孔吸附树脂洗脱法。
6.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(4)步的减压浓缩是在60℃下旋转蒸发真空浓缩设备中进行的。
7.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(5)步的脱蛋白是用改良的Sevage法，即是将Sevage试剂(氯仿∶正丁醇＝1∶4，V/V)，按Sevage试剂与浓缩液的体积比1∶3--5投料，反复浸泡处理，每次加入Sevage试剂后混合均匀，静置20--30分钟，使混合液完全分层，除去下层的蛋白质变性胶状物，保留上清液层，再按上述比例加入Sevage试剂后混合均匀，再继续静置20--30分钟，待混合液完全分层后分离，保留上清液层；如此反复处理9--10次，再离心除去滤渣。
8.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(5)步的脱蛋白还可用三氯醋酸法，其是在浓缩液中加入1.5倍体积的5％三氯醋酸，摇匀后，迅速于冰箱中放置4--6小时，出现分层后，在室温下3000rpm离心，除去下层白色沉淀，如此反复处理处理2--3次。
9.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(6)步的乙醇沉析，其是用4倍体积的95％乙醇或3倍体积的无水乙醇加入到(5)步收集的滤液，使混合液的乙醇终浓度达到75％(V/V)后，在4℃冰箱中放置过夜，再在室温和4000rpm、15min条件下，离心除去上清液，保留沉淀。
10.根据权利要求2所述牛蒡菊糖的制备方法，其特征在于所述的(8)步中的用无水乙醇、丙酮溶剂反复漂洗洗涤5分钟，抽滤去除残留溶剂；如此反复漂洗2-3次，直至沉淀物颜色呈白色或淡黄色。
全文摘要
本发明是牛蒡菊糖及其制备方法，由等外牛蒡根原料中提取的，外观为白色或淡黄色无定形疏松状固体粉末，易吸湿，易结块，微甜，无臭，易溶于水，有热稳定性，与碘不呈颜色反应，有旋光性，在水中为左旋光度－29.8±2°。该菊糖的结构式由呋喃构型的D－果糖，经β(2→1)糖苷键聚合而成寡糖式低聚果糖，其分子链终端以α(1→2)糖苷键连接一个葡萄糖分子；该菊糖的分子简式为G－Fn其中G为葡萄糖，F为果糖，n为聚合度10～12，平均分子量1976—2230；经紫外光谱分析，其在紫外区202nm有一吸收峰。在葡聚糖凝胶层析法的分部收集图谱中，有形状对称的单一峰，即该菊糖纯度高，具有均一组分。本制备方法成本低廉，工艺完善，操作简单，节省劳力，提取率达到为85％以上。
文档编号C08B37/00GK1485344SQ0315625
公开日2004年3月31日 申请日期2003年9月2日 优先权日2003年9月2日
发明者李光友, 郝林华, 陈靠山 申请人:国家海洋局第一海洋研究所