本发明属于生物实验用品技术领域，涉及一种简易滤纸卡的制作方法及应用。
背景技术：
质粒是现代生物实验室进行基因操作常用的dna载体，是一种使用频繁的基因操作工具。在试验中，构建好的含目标dna的重组质粒或工具质粒都需要进行保存。通常情况下，质粒保存有两种方法：一种是将质粒转入相应的感受态细菌细胞中，经选择性培养基铺板培养后挑取单克隆，接种到含有相应抗生素的培养基中培养，然后加入终浓度为15～20％的甘油，直接置于-70℃以下冰箱中冷冻保存。另一种是将质粒从培养的细菌中提取出来，用缓冲液(如te)溶解，置于-70℃以下冰箱中冷冻保存。
这两种方法的缺点：(1)需要一定的实验室生物操作过程和耗材，如培养、提取及冻存管等；(2)细菌或质粒取用时的反复冻融导致的细菌死亡或质粒裂解；(3)需要超低温保存条件，不适宜于长途运输及携带。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种简易滤纸卡的制作方法及应用，是将质粒直接点样于经适当剪裁和排列滤纸形成的滤纸卡中，密封于加入干燥剂的简易自封袋中即可。可常温或低温长期保存，便于携带、使用方便。
其具体技术方案为：
一种简易滤纸卡的制作方法，包括以下步骤：
步骤1、将三片滤纸按照上层、中间层和下层依次叠放整齐，用订书机将四个边装订整齐；
步骤2、在上层滤纸上以1cm的直径画圆圈，每个圆圈之间的间距在1cm，沿圆周从右侧将圆圈剪开四分之三，留有四分之一圆周未剪开，掀开剪开的滤纸片上的半圆片，在相应圆片下的中间层滤纸片上画直径为0.5cm的圆圈，每个圆圈中能保存一种或一份质粒。
一种简易滤纸卡在保存质粒过程中的应用，包括以下步骤：
步骤1、将一定浓度的质粒溶液点在中间层滤纸的0.5cm直径的圆圈内，盖上上层滤纸上的半圆片，在每个圆片上做好标记，用透明胶带封口；
步骤2、将滤纸卡放入一个干净的密闭塑料袋中，加入干燥剂，能常温保存携带，或者低温长期保存；
步骤3、使用时，剪开上层滤纸上的相应圆片，将中间层中包含质粒的相应0.5cm直径的圆圈用剪下或刀片取下，浸泡于灭菌水或缓冲液中，离心，吸取上清，即能用于实验室实验。
进一步，步骤1中，所述质粒溶液的点样量为10ul。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明提供的方法，是将质粒直接点样于经适当剪裁和排列滤纸形成的滤纸卡中，密封于加入干燥剂的简易自封袋中即可。可常温或低温长期保存，不需要复杂的实验室生物操作过程和冻存管等耗材，具有便于携带、使用方便的特点，适合推广应用。
具体实施方式
下面结合具体实施方案对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
本发明使用任何一种普通或加厚滤纸(如bio-rad公司生产的滤纸)，将滤纸裁剪成一定大小的纸片(实际大小以保存质粒的数量或使用的自封袋大小、并便于携带为宜，如长10cm、宽6cm的纸片上可保存8种质粒，见下文)。灭菌后，每三片滤纸装订成一个用于保存质粒的滤纸卡。具体方法如下：
(1)将三片滤纸叠放整齐，成三层滤纸(上、中、下)，用订书机将四个边装订整齐。
(2)在上层滤纸上以1cm的直径画圆圈，每个圆圈之间的间距在1cm左右，沿圆周从右侧将圆圈剪开约四分之三，掀开剪开的滤纸片上的半圆片(有四分之一圆周未剪开)，在相应圆片下的中间层滤纸片上画直径为0.5cm的圆圈，每个圆圈中可以保存一种或一份质粒。
保存方法：
(1)将一定浓度的质粒溶液点在中间层滤纸的0.5cm直径的圆圈内(点样量以10ul左右为宜)，盖上上层滤纸上的半圆片，在每个圆片上做好标记，用透明胶带封口。
(2)将滤纸卡放入一个干净的密闭塑料袋中，加入干燥剂，可常温保存携带，也可低温长期保存。
使用方法：
使用时，剪开第一层滤纸上的相应圆片，将中间层中包含质粒的相应0.5cm直径的圆圈用剪下或刀片取下，浸泡与灭菌水或缓冲液中，离心，吸取上清即可用于实验室实验。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。