本发明涉及一种精子优选装置及方法。
背景技术：
在很多情况下，需要将精子从精浆中分离出来，用于精子功能检测、治疗性授精和辅助生殖技术(art)等。常用的精子分离优选技术有直接上游法和非连续密度梯度法。
非连续密度梯度离心法能分离出优质的精子，特别是从其它细胞成分和碎片中分离出优质的精子。它比直接上游法更易标准化，结果也较稳定。这个方法制备和回收的精子常用于ivf和icsi中。
非连续密度梯度离心法是将精液放置在由表面涂以硅烷的胶质制剂组成的密度梯度介质上，然后根据细胞密度的大小不同通过离心分离获得精子。此外，活动精子能够穿过密度材料游到试管底。简单的两种不同的密度介质形成非连续梯度制备方法是密度梯度法最常用的方法，经典方法采用40%密度介质的放在上层，80%放在底层。非连续密度梯度离心法能够获得较高活力的精子，而且不带有碎片、白细胞、细菌。
但是，实际操作中，由于精液粘稠、死精子比例较多等因素，或者实验员在用吸管吸取离心后精子沉淀团上方的大量上清液操作不当，部分精液标本最终分离的精子活力不是很好，偶尔还会夹杂少许精液蛋白颗粒或者一些死精子。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是：提供一种精子优选装置及方法，本发明采用螺旋管的原理使得精子在密度梯度液中游走的路径延长，同时利用活动精子主动游动的特点，可以提高非连续密度梯度离心法分离优质精子的效率，另外采用本发明进行精子优选操作，能够缩短实验时间，同时利于操作的标准化。
解决上述技术问题的技术方案是：一种精子优选装置，包括离心管盖、离心管体和安装在离心管体内的螺旋通道，所述的离心管体是由管体和底部锥形段构成，管体下端与底部锥形段通过螺纹连接，所述螺旋通道分为上螺旋通道和下螺旋通道，上螺旋通道底端和下螺旋通道上端之间间隔5-15mm形成离心管分层区域，上螺旋通道和下螺旋通道分别与离心管分层区域连通，下螺旋通道通过竖直止流管与底部锥形段连通，竖直止流管的直径为3-6mm，长度为10-20mm。
所述离心管分层区域的离心管体上标注有分层中点刻度线。
所述离心管盖与离心管体上端通过螺纹连接。
一种精子优选方法，采用上述的精子优选装置，包括以下步骤：
⑴让所有液体升至室温或37℃；
⑵旋开精子优选装置的离心管盖；
⑶使用一次性无菌吸管，吸取2ml下层分离液isolate90%，加入精子优选装置离心管体的管口，加入后的下层分离液通过螺旋通道流到离心管体的底部，下层分离液的上端液面与分层中点刻度线重合；
⑷使用一支新的无菌吸管，再加入2ml上层分离液isolate50%，使上层分离液与下层分离液之间形成明显的分层；
⑸用5ml或10ml容量吸管充分混合液化精液；
⑹使用新的无菌吸管，将1.5~2.0ml液化精液加入精子优选装置的离心管体内；
⑺扭紧精子优选装置的离心管盖，在300-400g的离心力下离心15-30分钟；
⑻离心后轻轻旋开精子优选装置离心管体的底部锥形段，使其与上部管体分离，即可得到优质活力的精子沉淀团。
由于采用上述技术方案，本发明具有以下有益效果：
1、本发明采用螺旋管的原理使得精子在密度梯度液中游走的路径延长，同时利用活动精子主动游动的特点，在外部离心力作用下，使得活力好的精子更容易往离心管下部走，可以提高非连续密度梯度离心法分离优质精子的效率。
2、本发明管体下端与底部锥形段通过螺纹连接，离心结束后，再将底部锥形段拆下使其与管体分离。离心后精子沉淀团位于底部锥形段内，精子沉淀团上方仅有少量在允许范围内的上清液，实验员不需用吸管吸取精子沉淀团上方的上清液，从而避免吸取上清液操作不当时容易混入精液蛋白颗粒或者一些死精子的情况，缩短实验时间的同时利于操作的标准化。
下面，结合附图和实施例对本发明之一种精子优选装置及方法的技术特征作进一步的说明。
附图说明
图1：本发明之精子优选装置结构示意图（局剖）。
图2：本发明之精子优选装置轴测图。
图3：本发明之精子优选装置使用状态图（离心操作前）。
图4：本发明之精子优选装置使用状态图（离心操作后）。
图中：1-离心管盖，2-离心管体，21-管体，22-底部锥形段，3-螺旋通道，31-上螺旋通道，32-下螺旋通道，4-离心管分层区域，41-分层中点刻度线，5-竖直止流管。
p1表示上层分离液isolate50%，p2表示下层分离液isolate90%，p3表示精子沉淀团。
具体实施方式
实施例1：一种精子优选装置，如图1-图2所示，包括离心管盖1、离心管体2和安装在离心管体内的螺旋通道3，所述的离心管体是由管体21和底部锥形段22构成，管体下端与底部锥形段通过螺纹连接，所述螺旋通道3分为上螺旋通道31和下螺旋通道32，上螺旋通道底端和下螺旋通道上端之间间隔5-15mm形成离心管分层区域4，上螺旋通道和下螺旋通道分别与离心管分层区域连通，下螺旋通道通过竖直止流管5与底部锥形段连通，竖直止流管要求管径较小，长度较长，一般竖直止流管的直径为3-6mm，长度为10-20mm，设置竖直止流管的目的是为了保证在离心管盖1盖紧离心管体2的情况下，将底部锥形段22从管体21上拆卸下来后，液体不会从竖直止流管中流出。
本实施例中，所述离心管分层区域4的离心管体上标注有分层中点刻度线41，这样便于操作。作为一种变换，也可以不设置分层中点刻度线。
本实施例中，所述离心管盖与离心管体上端通过螺纹连接。作为一种变换，离心管盖与离心管体也可以采用其他方便拆装的连接方式。
实施例2：一种精子优选方法，如图3-图4所示，采用如实施例1所述的精子优选装置，采用非连续密度梯度法，包括以下步骤：
⑴让所有液体升至室温或37℃；
⑵旋开精子优选装置的离心管盖；
⑶使用一次性无菌吸管，吸取2ml下层分离液isolate90%，加入精子优选装置离心管体的管口，加入后的下层分离液通过螺旋通道流到离心管体的底部，下层分离液的上端液面与分层中点刻度线重合；
⑷使用一支新的无菌吸管，再加入2ml上层分离液isolate50%，使上层分离液与下层分离液之间形成明显的分层；
⑸用5ml或10ml容量吸管充分混合液化精液；
⑹使用新的无菌吸管，将1.5~2.0ml液化精液加入精子优选装置的离心管体内；
⑺扭紧精子优选装置的离心管盖，在300-400g的离心力下离心15-30分钟；
⑻离心后轻轻旋开精子优选装置离心管体的底部锥形段，使其与上部管体分离，即可得到优质活力的精子沉淀团。