抗GII.17型诺如病毒单克隆抗体及其用途的制作方法

本发明属于免疫学领域，涉及抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体及其用途，更具体地涉及包含所述抗体的试剂盒在检测gii.17型诺如病毒感染中的用途，以及所述抗体用于制备预防gii.17型诺如病毒感染的药物中的用途。

背景技术：

1、诺如病毒(norovirus)是1972年美国学者kapikian在诺瓦克镇的腹泻患者粪便中首次发现并命名为诺瓦克病毒(norwalk virus，nv)，随后在第八届国际病毒命名委员会上将该病毒命名为诺如病毒，它是引起人感染性胃肠炎疫情暴发和婴幼儿急性腹泻的主要病原体之一。

2、诺如病毒为单股正链rna病毒，属于杯状病毒科，直径约为26-35nm，无包膜，表面粗糙，球形，呈二十面体对称；从急性胃肠炎病人的粪便中分离。诺如病毒基因组全长约7.7kb，包含3个开放阅读框(open reading frames，orfs)。依据基因序列的系统发生学，诺如病毒可分为6个基因群(genogroup，gi-gvi)，每个基因群又分为多个基因型(genotype)。

3、人类感染诺如病毒多由gi和gii基因群引起，其中又以gii群为主；据统计，超过75％的人类nov急性胃肠炎由gii群感染所致。在不同时期、不同地区，各基因型的检出率和流行情况存在较大的差异和变化，近20年来，gii.2、gii.4、gii.6、gii.7、gii.12、gii.17等价型均有检出。

4、诺如病毒具有基因型多样且快速变异的特性，并且当前无理想的细胞培养系统和动物模型，一定程度上限制了抗诺如病毒疫苗和药物的研发。因此，至今对诺如病毒仍缺乏有效的预防措施、预防疫苗或治疗药物，也缺乏相应的病毒检测手段。

5、基于以上，本发明人提供了一种定量的、可靠的诺如病毒的检测手段，以及一种具有良好的临床应用前景的抗诺如病毒的疫苗或药物，其具有广阔的应用前景。

技术实现思路

1、因此，为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体，所述抗体对gii.17型诺如病毒具有特异性阻断作用，同时对gi.1、gii.2、gii.4和gii.6型均无交叉反应；本发明还提供了一种操作简便、灵敏度高、成本低、可适用于大批量生产的检测gii.17型诺如病毒的试剂盒。本发明还提供了一种用于预防gii.17型诺如病毒感染的药物。

2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

3、一方面，本发明提供了一种抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab，其中所述单克隆抗体由保藏号为cctcc no：c2021171的杂交瘤细胞株2f11分泌。

4、另一方面，本发明提供了一种杂交瘤细胞株2f11，所述杂交瘤细胞株的保藏号为cctcc no：c2021171。

5、其中，杂交瘤细胞株2f11的保藏号为cctcc no：c2021171(保藏日期：2021年9月1日，保藏号为cctcc no：c2021171，保藏地：中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学)。

6、再一方面，本发明提供了一种用于检测样品中gii.17型诺如病毒的存在和/或其水平的装置，所述装置包括本发明所述的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab；优选地，所述样品为多价诺如病毒疫苗。

7、优选地，所述检测使用免疫方法，所述装置为用于免疫方法的装置；更优选地，所述免疫方法选自免疫印迹法、免疫沉淀法、免疫组化法、酶联免疫吸附法或免疫化学发光法等。更优选地，所述检测使用酶联免疫吸附法或免疫化学发光法。

8、优选地，所述装置为试剂盒；更优选地，所述试剂盒还包含兔抗gii.17型诺如病毒多克隆抗体和/或羊抗鼠种属抗体；进一步优选地，所述试剂盒还包含包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、终止液和标准品中的一种或多种；更进一步优选地，所述试剂盒还包括酶标板和/或封板膜。

9、再一方面，本发明提供了上述单克隆抗体2f11-ab在制备用于检测样品中gii.17型诺如病毒的存在和/或其水平的试剂或试剂盒中的用途。

10、根据本发明所述的用途，其中，所述样品为多价诺如病毒疫苗。

11、本发明还提供了一种gii.17型诺如病毒的定量检测方法，所述检测方法使用免疫方法；更优选地，所述免疫方法选自免疫印迹法、免疫沉淀法、免疫组化法、酶联免疫吸附法或免疫化学发光法等。

12、再另一方面，本发明提供一种检测试剂，所述检测试剂含有本发明所述的单克隆抗体。所述检测试剂的制备方法可以是本领域技术人员熟知的任何方法，例如将本发明的单克隆抗体与适当的载体，如水、盐水、缓冲剂等混和。本发明的检测试剂可用于样本中gii.17型诺如病毒的表达水平的检测，同时可动态检测gii.17型诺如病毒蛋白水平的变化。

13、本发明还提供了一种用于预防和/或治疗gii.17型诺如病毒感染的药物组合物，其包含本发明所述的单克隆抗体2f11-ab。

14、优选地，所述药物组合物为疫苗。

15、本发明还提供了所述单克隆抗体2f11-ab在制备用于预防和/或治疗gii.17型诺如病毒感染的药物组合物中的用途。

16、优选地，所述药物组合物为疫苗。

17、本发明的有益效果在于：

18、1.由于诺如病毒存在较多价型，目前gii.17型诺如病毒尚未有一种简单快速的定量检测方法，本发明提供的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab专属性高，实验结果显示，对gi.1、gii.2、gii.4、gii.6型均无交叉免疫反应，可从存在多种价型的抗原中定量检测gii.17型，适宜作为制备诺如多价疫苗时的质量监控手段。

19、2.本发明提供的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab的各项指标均符合研发要求，可以反复冻融多次，抗体性状稳定，检测结果不受影响，适合在试剂应用过程中的存储使用，方便使用人应用。

20、3.本发明提供的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab具有较高的阻断活性，bt50高达2560以上，具有治疗gii.17型诺如病毒感染的潜在优势，可以应用于制备相关治疗药物。

21、生物保藏信息

22、杂交瘤细胞株2f11的保藏号为cctcc no：c2021171，保藏日期：2021年9月1日，保藏号为cctcc no：c2021171，保藏地：中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学。

技术特征：

1.一种抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab，其中所述单克隆抗体由保藏号为cctcc no：c2021171的杂交瘤细胞株2f11分泌。

2.一种杂交瘤细胞株2f11，所述杂交瘤细胞株的保藏号为cctcc no：c2021171。

3.一种用于检测样品中gii.17型诺如病毒的存在和/或其水平的装置，所述装置包括如权利要求1所述的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab；

4.根据权利要求3所述的装置，其中，所述装置为用于免疫方法的装置；

5.根据权利要求3或4所述的装置，其中，所述装置为试剂盒；

6.如权利要求1所述的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab在制备用于检测样品中gii.17型诺如病毒的试剂或试剂盒中的用途。

7.如权利要求6所述的用途，其中，所述样品为多价诺如病毒疫苗。

8.一种用于预防和/或治疗gii.17型诺如病毒感染的药物组合物，其包含如权利要求1所述的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab；

9.如权利要求1所述的抗gii.17型诺如病毒单克隆抗体2f11-ab在制备用于预防和/或治疗gii.17型诺如病毒感染的药物组合物中的用途；

技术总结
本发明提供了抗GII.17型诺如病毒单克隆抗体及其用途。本发明提供了一种抗GII.17型诺如病毒单克隆抗体2F11‑Ab，其中所述单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO：C2021171的杂交瘤细胞株2F11分泌。本发明提供了一种杂交瘤细胞株2F11，所述杂交瘤细胞株的保藏号为CCTCC NO：C2021171。本发明提供了一种用于检测样品中GII.17型诺如病毒的装置，所述装置包括本发明所述的抗GII.17型诺如病毒单克隆抗体2F11‑Ab。本发明提供的抗GII.17型诺如病毒单克隆抗体2F11‑Ab具有较高的阻断活性，BT50高达2560以上，具有治疗GII.17型诺如病毒感染的潜在优势，可以应用于制备相应的检测疫苗和治疗药物。

技术研发人员：葛君,李建强,王晓东,谭昌耀,周童,任苏林,顾月,陈悦
受保护的技术使用者：远大赛威信生命科学（南京）有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11