动物细胞培养方法与流程

本发明涉及生物，具体地，涉及动物细胞培养方法。

背景技术：

1、动物细胞培养技术是当今生物工程领域中的前沿技术之一，无论是在研究还是在生产实践方面都对当代生物技术有着重要的影响。虽然目前市售的商业化培养基已具有非常好的广谱性，但是却缺少针对性，并且培养成本高。

2、由此，用于动物细胞的培养方法有待研究。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种动物细胞培养方法，细胞生长速度快，产物表达量，底物的转化率，原料成本低。

2、根据本发明的一个方面，本发明提供了一种动物细胞培养方法。根据本发明的实施例，该方法包括：利用复合培养基对所述动物细胞进行第一培养，其中，所述复合培养基为包括expichotm表达培养基和dynamistm agttm培养基；以及在所述第一培养后，利用培养添加剂定期进行补料，进行第二培养。

3、根据本发明实施例的动物细胞培养方法，利用复合培养基进行培养，降低了细胞培养成本，培养基的来源更充分，利于扩增产能；并且，该培养方法，细胞生长速度快，产物表达量，发酵周期短，底物的转化率高。

4、另外，根据本发明上述实施例的动物细胞培养方法还可以具有如下附加的技术特征：

5、根据本发明的实施例，所述expichotm表达培养基和dynamistm agttm培养基的体积比为1∶0.8-1.2。

6、根据本发明的实施例，所述培养添加剂包括sheff-cho pf plus acf添加剂、cellboosttm 7a添加剂和cell boosttm 7b添加剂。由此，细胞培养的成本低，补料的来源更充分，同时能够让细胞更优的表达。根据本发明的实施例，第一次进行所述补料，所述培养添加剂包括2％所述sheff-cho pf plus acf添加剂、3％所述cell boosttm 7a添加剂添加剂和0.5％所述cell boosttm 7b添加剂；后续进行所述补料，所述培养添加剂包括2％所述sheff-cho pf plus acf添加剂、5％所述cell boosttm 7a添加剂和1％所述cell boosttm7b。

7、根据本发明的实施例，所述定期进行补料为隔天进行所述补料。

8、根据本发明的实施例，第一次所述补料在所述第一培养开始后的18-22小时。

9、根据本发明的实施例，所述第一培养的条件为37℃，溶氧为8％co2。由此，培养环境适宜，细胞的生长速度快。

10、根据本发明的实施例，所述第二培养的温度为表达温度，溶氧为5％co2。由此，培养条件适宜，细胞的表达量高。

11、根据本发明的实施例，表达温度为30-32℃，优选地，为32℃。

12、根据本发明的实施例，所述动物细胞为重组哺乳动物细胞。

13、本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

技术特征：

1.一种动物细胞培养方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述expichotm表达培养基和dynamistmagttm培养基的体积比为1∶0.8-1.2。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养添加剂包括sheff-cho pf plusacf添加剂、cell boosttm 7a添加剂和cell boosttm7b添加剂。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一次进行所述补料，所述培养添加剂包括2％所述sheff-cho pf plus acf添加剂、3％所述cell boosttm 7a添加剂添加剂和0.5％所述cell boosttm 7b添加剂；后续进行所述补料，所述培养添加剂包括2％所述sheff-chopf plus acf添加剂、5％所述cell boosttm 7a添加剂和1％所述cell boosttm 7b。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述定期进行补料为隔天进行所述补料。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一次所述补料在所述第一培养开始后的18-22小时。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一培养的条件为37℃，溶氧为8％co2。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二培养的温度为表达温度，溶氧为5％co2。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，表达温度为30-32℃，优选地，为32℃。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物细胞为重组哺乳动物细胞。

技术总结
本发明公开了一种动物细胞培养方法，该方法包括：利用复合培养基对所述动物细胞进行第一培养，其中，所述复合培养基为包括ExpiCHOTM表达培养基和DynamisTM AGTTM培养基；以及在所述第一培养后，利用培养添加剂定期进行补料，进行第二培养。该方法利用复合培养基进行培养，降低了细胞培养成本，培养基的来源更充分，利于扩增产能；并且，该培养方法，细胞生长速度快，产物表达量，发酵周期短，底物的转化率高。

技术研发人员：施磊,方鹏,游猛,曹雨霞,冯庆君,朱晓红,孙小伟
受保护的技术使用者：江苏迈威康新药研发有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13