技术特征：
1.一种免疫球蛋白(ig)结合蛋白，包含一个或多个ig结合结构域，其中至少一个ig结合结构域对应于与seq id no：1具有至少80％的氨基酸同一性的ig结合蛋白，其中对应于seq id no：1的位置8的氨基酸为异亮氨酸(i)、亮氨酸(l)、缬氨酸(v)或芳香族氨基酸，并且其中ig结合蛋白在0.5m naoh的碱性条件下稳定至少20h。2.根据权利要求1所述的ig结合蛋白，其中，对应于seq id no：1的位置8的氨基酸为异亮氨酸(i)或酪氨酸(y)。3.根据权利要求1-2所述的ig结合蛋白，其中，对应于seq id no：1的位置10、14、16、17、18或28的一个或多个氨基酸选自组氨酸(h)或天冬氨酸(d)或谷氨酸(e)的组。4.根据权利要求1-3中任一项所述的ig结合蛋白，其中，至少一个结构域包含seq id no：4-9、20-26和40-49中任一项的氨基酸序列，或者与seq id no：4-9、20-26和40-49中任一项具有至少89.5％的同一性的氨基酸序列。5.根据权利要求1-4中任一项所述的ig结合蛋白，其中，所述蛋白结合至igg1、igg2、igg4、igm、iga、ig片段、fc片段、fab片段、包含ig区的融合蛋白和包含ig区的缀合物。6.根据权利要求1-5中任一项所述的ig结合蛋白，其中，所述蛋白包含2、3、4、5或6个彼此连接的结构域。7.根据权利要求6所述的ig结合蛋白，其中，所述蛋白是同源多聚体或异源多聚体。8.根据权利要求1-7中任一项所述的ig结合蛋白，其中，所述蛋白固定至固体载体。9.一种亲和分离基质，包含连接至所述亲和分离基质的根据权利要求1至8中任一项所述的ig结合蛋白。10.根据权利要求1至8中任一项所述的ig结合蛋白或者根据权利要求9所述的亲和分离基质用于与所述ig结合蛋白具有亲和力的任何蛋白的亲和纯化的用途。11.一种亲和纯化包含ig序列的蛋白的方法，所述方法包括：a.提供含有包含ig序列的蛋白的液体；b.提供根据权利要求10所述的亲和分离基质，所述亲和分离基质包含连接至根据权利要求9所述的亲和分离基质的至少一种根据权利要求1至8中任一项所述的ig结合蛋白；c.在允许至少一种根据权利要求1-8中任一项所述的ig结合蛋白与包含ig序列的蛋白结合的条件下，将所述亲和分离基质与所述液体接触；和d.从所述亲和纯化基质洗脱所述包含ig序列的蛋白，由此获得含有所述免疫球蛋白的洗脱液。12.根据权利要求11所述的方法，其中，在步骤(d)中，其中大于95％的所述包含ig序列的蛋白在ph 3.7或以上从包含根据权利要求1-8中任一项所述的ig结合蛋白的所述亲和纯化基质上洗脱。13.根据权利要求12所述的方法，其中，在步骤(d)中，大于95％的所述包含ig序列的蛋白在ph 4.5或以上从包含根据权利要求1-8中任一项所述的ig结合蛋白的所述亲和纯化基质上洗脱。14.根据权利要求11-13中任一项所述的方法，包括用碱清洗液清洗所述亲和纯化基质的额外的步骤(e)。
技术总结
本发明涉及免疫球蛋白(Ig)结合蛋白，其包含具有带有支链侧链的高度疏水性氨基酸(Iso、Leu、Val)或者芳香族氨基酸(Tyr、Phe或Trp)的一个或多个结构域，这些氨基酸对应于SEQ ID NO：1的Ig结合蛋白或功能类似蛋白的位置4或6或8。该新型蛋白对于抗体(免疫球蛋白)的高效纯化方法具有优良性质，例如，该蛋白具有高结合量和高化学稳定性。本发明还涉及包含本发明的Ig结合蛋白的亲和基质。本发明还涉及这些Ig结合蛋白或亲和基质用于亲和纯化免疫球蛋白的用途，并且涉及使用本发明的Ig结合蛋白的亲和纯化方法。和纯化方法。和纯化方法。
技术研发人员：保罗
受保护的技术使用者：纳维格蛋白质有限公司
技术研发日：2021.07.14
技术公布日：2023/3/17