活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法与流程

1.本技术涉及化妆品技术领域，特别涉及一种活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法。


背景技术：

2.在现有技术中，活性胶原结构的提取工艺条件苛刻，具有低温度的工艺特点，导致活性胶原提取液生产难度大的问题，同时，进一步影响到包括活性胶原提取液的护肤品也存在生产难度大的问题，因此，如何提供一种活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法以解决现有技术中活性胶原提取液和包括活性胶原提取液的护肤品的生产难度大的技术问题。


技术实现要素：

3.本技术提供一种活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法以解决现有技术中活性胶原提取液和包括活性胶原提取液的护肤品的生产难度大的技术问题。
4.为解决上述问题，本技术提供一种活性胶原提取液，所述活性胶原提取液包括活性胶原主体和基质，所述活性胶原主体包括三螺旋活性胶原、胶原肽和水解胶，在所述活性胶原主体中，所述三螺旋活性胶原质量分数大于等于90％小于100％，所述胶原肽和所述水解胶的质量分数总和大于0小于等于10％，所述基质为水。
5.其中，所述活性胶原提取液的ph值为3.5-5.5。
6.本技术还提供一种活性胶原提取液的制备方法，所述活性胶原提取液的制备方法用于制备如前所述的活性胶原提取液，所述活性胶原提取液的制备方法包括：
7.提供新鲜皮料，除去表皮层和皮下脂肪层，采用第一有机溶剂和水进行清洗，得到第一半成品；
8.将所述第一半成品搅碎成肉泥，得到第二半成品；
9.采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品；以及
10.采用hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入软化溶液进行软化，软化过程的温度为20摄氏度-40摄氏度，ph值为2.5-4.5，加入第一组蛋白酶或者第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液。
11.其中，所述第一有机溶剂为75％乙醇。
12.其中，所述第二有机溶剂为丙酮、乙醇和石油醚中的至少两种的组合，所述第二有机溶剂与所述第二半成品的质量比为0.5-3.5：1。
13.其中，所述第二有机溶剂为丙酮和乙醇的混合物，所述丙酮和乙醇的体积比为1： 0.5-3.5，或者，所述第二有机溶剂为石油醚和乙醇的混合物，所述石油醚和乙醇的体积比为1：0.5-3.5。
14.其中，所述盐溶液为质量分数为3％-15％的nacl溶液，所述盐溶液与所述第二半
成品的质量比为0.5-3.5：1。
15.其中，在所述采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品的步骤中，所述水与所述第二半成品的质量比为2.5-7：1。
16.其中，所述hcl溶液的浓度为0.001mol/l-0.02mol/l，所述软化溶液为醋酸溶液、柠檬酸溶液或醋酸和柠檬酸的混合溶液，所述软化溶液的浓度为0.01mol/l-0.3mol/l，所述第一组蛋白酶为胃蛋白酶，所述第二组蛋白酶包括木瓜蛋白酶和/或菠萝蛋白酶。
17.其中，所述第二组蛋白酶还包括胰蛋白酶、无花果蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶中的一种或几种的组合。
18.其中，所述软化溶液与所述预浸泡混合物的体积比为20-60：1，所述第一组蛋白酶与所述第三半成品的质量比为4
‰‑
10
‰
：1，所述第二组蛋白酶与所述第三半成品的质量比为2
‰‑6‰
：1。
19.本技术还提供一种活性胶原提取液的制备系统，所述活性胶原提取液的制备系统用于制备如前所述的活性胶原提取液，所述活性胶原提取液的制备系统包括：
20.片皮设备组，所述片皮设备组用于对新鲜皮料除去表皮层和皮下脂肪层，采用第一有机溶剂和水进行清洗，得到第一半成品；
21.切碎设备，所述切碎设备用于将所述第一半成品搅碎成肉泥，得到第二半成品；
22.除杂设备组，所述除杂设备组用于采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品；以及
23.提取设备组，所述提取设备组用于对所述第三半成品进行预浸泡、软化以及酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液。
24.其中，所述片皮设备组包括切割机、片皮机和清洗装置，所述切割机用于对新鲜皮料进行切割处理，得到所述皮料条，所述片皮机用于除去所述皮料条的表皮层和皮下脂肪层，得到第一中间产物，所述清洗装置用于采用所述第一有机溶剂和所述水对所述第一中间产物进行清洗得到所述第一半成品。
25.其中，所述清洗装置包括清洗槽、皮料条投料口、第一有机溶剂投料口、水投料口和皮料条出料口，所述皮料条投料口、所述第一有机溶剂投料口、所述水投料口和所述皮料条出料口均与所述清洗槽连通，所述皮料条投料口、所述第一有机溶剂投料口、所述水投料口和所述皮料条出料口为同一开口或不同开口。
26.其中，所述除杂设备组包括第一清洗缸、第一除杂过滤设备、第二清洗缸、第二除杂过滤设备、第三清洗缸和第三除杂过滤设备，所述第一清洗缸用于将所述第二有机溶剂和所述第二半成品进行混合，所述第一除杂过滤设备用于对所述第一清洗缸中的混合物进行过滤，滤掉液体，得到第二中间产物，所述第二清洗缸用于将所述盐溶液和所述第二中间产物进行混合，所述第二除杂过滤设备用于对所述第二清洗缸中的混合物进行过滤，滤掉液体，得到第三中间产物，所述第三清洗缸用于将所述水和所述第三中间产物进行混合，所述第三除杂过滤设备用于对所述第三清洗缸中的混合物进行过滤，滤掉液体，得到所述第三半成品，所述第一清洗缸、所述第二清洗缸和所述第三清洗缸为同一清洗缸或不同清洗缸，所述第一除杂过滤设备、所述第二除杂过滤设备和所述第三除杂过滤设备为同一除杂过滤设备或不同除杂过滤设备。
27.其中，所述除杂设备组还包括计量器，所述计量器用于对加入所述第一清洗缸的所述第二半成品、对加入所述第一清洗缸的所述第二有机溶剂、对加入所述第二清洗缸的所述盐溶液和对加入所述第三清洗缸的所述水进行质量或体积计算。
28.其中，所述除杂设备组还包括处理器，所述处理器用于控制所述第二有机溶剂与所述第二半成品的质量比，用于控制所述盐溶液与所述第二半成品的质量比，以及用于控制加入所述除杂设备的所述水与所述第二半成品的质量比。
29.其中，所述提取设备组包括提取罐、搅拌器和提取液过滤设备，所述提取罐用于采用 hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入软化溶液进行软化，加入所述第一组蛋白酶或者所述第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的所述酶解液为所述第四半成品，所述搅拌器用于对所述提取罐中的混合物进行搅拌，所述提取液过滤设备用于对所述第四半成品进行过滤，得到的溶液为所述活性胶原提取液。
30.其中，所述提取设备组还包括计量器、温度计和ph计，所述计量器用于对加入所述提取罐的所述软化溶液的体积和所述第一组蛋白酶或所述第二组蛋白酶的质量进行计算，所述温度计用于检测所述提取罐内混合物的温度，所述ph计用于检测所述提取罐内混合物的ph值。
31.其中，所述提取设备组还包括处理器，所述处理器用于控制所述软化溶液与所述预浸泡混合物的体积比、控制所述第一组蛋白酶与所述第三半成品的质量比、控制所述第二组蛋白酶与所述第三半成品的质量比、控制软化过程的ph值，以及控制软化过程的温度。
32.其中，所述提取设备组还包括显示组件，所述处理器还用于控制所述显示组件显示所述计量器所计算的质量、所述温度计所检测的温度和所述ph计所检测的ph值。
33.其中，所述提取液过滤设备包括第一子设备和第二子设备，所述第一子设备的滤袋的目数为30-50，所述第二子设备的滤袋的目数为150-300，所述第一子设备用于对所述第四半成品进行过滤，得到提取液半成品，所述第二子设备用于对所述提取液半成品进行过滤，得到所述活性胶原提取液。
34.本技术还提供一种护肤品，所述护肤品包括活性胶原提取液、透明质酸钠、平衡剂、柔润剂、剂型调节剂、防腐剂和水，所述活性胶原提取液为如前所述的活性胶原提取液，所述活性胶原提取液、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系为2份-10份的所述活性胶原提取液、2份-6份的所述透明质酸钠、1份-4份所述平衡剂、100份-200份的所述柔润剂、2份-20份的所述剂型调节剂、1份-4份的所述防腐剂和1760份-1900份的水。
35.其中，所述透明质酸钠为分子量为120万-150万、80万-100万、20万-40万和1万-10 万道尔顿的透明质酸钠的一种或几种的组合。
36.其中，所述平衡剂包括甘草酸二钾、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠中的一种或几种的组合。
37.其中，所述柔润剂为甘油、丁二醇、丙二醇、甘油辛酸酯、1,2-己二醇，甘油聚醚-26 中的一种或几种。
38.其中，所述剂型调节剂为羟乙基纤维素和黄原胶中的一种或两种的组合。
39.其中，所述防腐剂包括辛酰羟肟酸和乙基己基甘油中的一种或两种的组合。
40.其中，所述护肤品的ph为4.5-7。
41.本技术还提供一种护肤品的制备方法，包括：
42.提供活性胶原提取液、透明质酸钠、平衡剂、柔润剂、剂型调节剂、防腐剂和水，所述活性胶原提取液为如前所述的活性胶原提取液，所述活性胶原提取液、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系为2份
ꢀ‑
10份的所述活性胶原提取液、2份-6份的所述透明质酸钠、1份-4份所述平衡剂、100份
ꢀ‑
200份的所述柔润剂、2份-20份的所述剂型调节剂、1份-4份的所述防腐剂和1760份-1900 份的水；
43.根据所述质量份数关系将所述水的一部分、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述剂型调节剂在40摄氏度-60摄氏度混合搅拌，得到第一混合物；
44.根据所述质量份数关系将所述柔润剂和所述防腐剂加入所述第一混合物中混合搅拌，得到第二混合物；以及
45.待所述第二混合物冷却至室温，根据所述质量份数关系将所述活性胶原提取液加入所述第二混合物中搅拌，再加入所述水的另一部分进行混合搅拌，得到所述护肤品。
46.本技术实施例的有益效果是：本技术提供了一种活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法，在制备所述活性胶原提取液时，提供新鲜皮料，除去表皮层和皮下脂肪层，采用第一有机溶剂和水进行清洗，得到第一半成品；将所述第一半成品搅碎成肉泥，得到第二半成品；采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品；以及采用hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入软化溶液进行软化，软化过程的温度为20摄氏度-40摄氏度，ph值为2.5-4.5，加入第一组蛋白酶或者第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液，整体制备过程无需低温条件，使得所述活性胶原提取液生产难度降低，从而实现了一种生产难度低的活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法。
附图说明
47.为了更清楚地说明本技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，其中：
48.图1为本技术所提供的活性胶原提取液的制备方法的所制备的活性胶原提取液的实施例a、sds-page蛋白质高分子量标准蛋白、以sigma牛皮i型胶原为对比例的 sds-page凝胶电泳比对图；
49.图2为本技术所提供的活性胶原提取液的制备方法的所制备的活性胶原提取液的实施例a的圆二色(circular dichroism，cd)光谱图。
50.图3是本技术所提供的活性胶原提取液的制备系统的第一种实施方式的结构示意图；
51.图4是本技术所提供的活性胶原提取液的制备系统的第二种实施方式的结构示意图。
具体实施方式
52.下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。可以理解的是，此处所描述的具体实施例仅用于解释本技术，而非对本技术的限定。另外还需要说明的是，为了便于描述，附图中仅示出了与本技术相关的部分而非全部结构。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。
53.本技术提供一种活性胶原提取液。所述活性胶原提取液包括活性胶原主体和基质，所述活性胶原主体包括三螺旋活性胶原、胶原肽和水解胶，在所述活性胶原主体中，所述三螺旋活性胶原质量分数大于等于90％小于100％，所述胶原肽和所述水解胶的质量分数总和大于0小于等于10％，所述基质为水。
54.所述活性胶原提取液的ph值为3.5-5.5，例如，3.5，3.65，3.75，3.8，3.95，4，4.2， 4.35，4.5，4.68，4.85，4.9，5，5.1，5.15，5.25，5.3或5.5等。
55.本技术还提供一种活性胶原提取液的制备方法。所述活性胶原提取液的制备方法用于制备如前所述的活性胶原提取液。
56.所述活性胶原提取液的制备方法包括：
57.b11、提供新鲜皮料，除去表皮层和皮下脂肪层，采用第一有机溶剂和水进行清洗，得到第一半成品。
58.具体的，所述皮料可以为牛皮、猪皮、羊皮、马皮和驴皮等哺乳动物皮料。取新鲜皮料切割成幅宽为20cm-35cm的皮料条，用片皮机去除表皮层及皮下脂肪层，仅留下真皮层，然后用75％乙醇清洗1次-2次，每次约30分钟至1小时，纯化水清洗1次-2次，每次约15分钟至30分钟。
59.b12、将所述第一半成品搅碎成肉泥，得到第二半成品。
60.具体的，将所述第一半成品置于直立式切碎机后搅碎成肉泥，肉泥尺寸一般小于 0.5mm-3mm。
61.b13、采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品。
62.具体的，先将所述第二半成品与所述第二有机溶剂混合搅拌，滤掉所述第二有机溶剂，保留肉泥，然后将所述肉泥和所述盐溶液混合搅拌，滤掉所述盐溶液，保留肉泥，再将所述肉泥与所述水混合搅拌，滤掉所述水，收集肉泥。
63.在一些实施例中，所述第二有机溶剂为丙酮、乙醇和石油醚中的至少两种的组合。具体的，所述第二有机溶剂可以为丙酮和乙醇的混合物，也可以为石油醚和乙醇的混合物，还可以为丙酮和石油醚的混合物，又可以为丙酮、乙醇和石油醚的混合物。
64.当所述第二有机溶剂为丙酮和乙醇的混合物时，所述丙酮和乙醇的体积比可以为1： 0.5-3.5，例如，1：0.5，1：0.8，1：1，1：1.45，1：1.5，1：1.82，1：1.9，1：2，1：2.15， 1：2.3，1：2.5，1：2.75，1：3，1：3.2或1：3.5等。
65.当所述第二有机溶剂为石油醚和乙醇的混合物时，所述石油醚和乙醇的体积比可以为 1：0.5-3.5，例如，1：0.5，1：0.75，1：1，1：1.1，1：1.35，1：1.5，1：1.75，1：1.9， 1：2，1：2.1，1：2.35，1：2.95，1：3，1：3.25，1：3.3或1：3.5等。
66.所述第二有机溶剂与所述第二半成品的质量比为0.5-3.5：1，例如，0.5：1，0.95：1， 1：1，1.4：1，1.5：1，1.65：1，1.7：1，1.9：1，2：1，2.15：1，2.4：1，2.75：1，2.95： 1，3：1或
3.5：1等。
67.所述盐溶液为质量分数为3％-15％的nacl溶液。所述盐溶液为质量分数为可以为3％， 3.5％，4％，5％，5.5％，6％，7％，7.2％，8％，9.5％，10％，11％，12.2％，13％，14％或 15％等。
68.所述盐溶液与所述第二半成品的质量比为0.5-3.5：1，例如，0.5：1，0.8：1，1：1， 1.45：1，1.5：1，1.65：1，1.75：1，1.9：1，2：1，2.65：1，2.8：1，3：1，3.15：1， 3.2：1或3.5：1等。
69.在所述采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品的步骤中，所述水与所述第二半成品的质量比为2.5-7：1，例如，2.5：1，3：1，3.3：1， 3.4：1，3.5：1，3.65：1，3.7：1，3.92：1，4：1，4.25：1，4.4：1，4.5：1，4.9：1，5： 1，5.3：1，5.73：1，6：1，6.5：1，6.75：1或7：1等。
70.在一种实施方式中，将搅碎的肉泥置于清洗缸内，加入肉泥1倍-3倍质量的丙酮/乙醇或石油醚/乙醇清洗1h-2h，滤掉有机溶剂，保留肉泥，再次像清洗罐内加入1倍-3倍质量的5％-10％nacl溶液清洗1h-2h，滤掉溶液，保留肉泥，最后加入3倍-6倍质量的纯化水清洗2次，收集肉泥。
71.b14、采用hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入软化溶液进行软化，软化过程的温度为20摄氏度-40摄氏度，ph值为2.5-4.5，加入第一组蛋白酶或者第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液。
72.所述hcl溶液的浓度为0.001mol/l-0.02mol/l，例如，0.001mol/l，0.008mol/l， 0.01mol/l，0.013mol/l，0.017mol/l或0.02mol/l等。所述hcl溶液与所述第三半成品的质量比为0.01-1：1，例如，0.01：1，0.1：1，0.15：1，0.3：1，0.5：1，0.65：1，0.82： 1，0.9：1，0.95：1或1：1等。
73.所述软化溶液为醋酸溶液、柠檬酸溶液或醋酸和柠檬酸的混合溶液。所述软化溶液的浓度为0.01mol/l-0.3mol/l，例如，0.01mol/l，0.015mol/l，0.1mol/l，0.15mol/l，0.2mol/l， 0.25mol/l，0.28mol/l或0.3mol/l等。所述软化溶液与所述预浸泡混合物的体积比为20-60： 1，例如，20：1，25：1，30：1，48：1，50：1，55：1或60：1等。
74.所述软化过程的温度可以为20摄氏度，22摄氏度，25摄氏度，26摄氏度，27摄氏度，28摄氏度，30摄氏度，32摄氏度，35摄氏度，38摄氏度或40摄氏度等。
75.所述软化过程的ph值可以为2.5，2.6，2.7，2.85，2.9，3，3.2，3.35，3.5，3.7，3.95， 4，4.15，4.35，4.4或4.5等。
76.所述第一组蛋白酶为胃蛋白酶。所述第一组蛋白酶与所述第三半成品的质量比为4
‰ꢀ‑
10
‰
：1，例如，4
‰
：1，4.5
‰
：1，5
‰
：1，7
‰
：1，8.5
‰
：1，9
‰
：1或10
‰
：1等。
77.所述第二组蛋白酶包括木瓜蛋白酶和/或菠萝蛋白酶。所述第二组蛋白酶还可以包括胰蛋白酶、无花果蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶中的一种或几种的组合。所述第二组蛋白酶与所述第三半成品的质量比为2
‰‑6‰
：1，例如，2
‰
：1，2.5
‰
：1，3
‰
：1，3.5
‰
：1，4
‰
： 1，5
‰
：1或6
‰
：1等。
78.在步骤b14的过滤过程中，可以采用两步过滤法，也即对通过酶解反应得到的酶解液进行两次过滤。在第一次过滤中，可以采用目数为30-50之间的滤袋。在一些实施例中，第一次过滤时采用的滤袋的目数可以为30，35，45，48或50等。在第二次过滤中，可以采用目数
为150-300的滤袋。在一些实施例中，第二次过滤时采用的滤袋的目数可以为150， 180，200，275或300等。
79.在一些实施方式中，将肉泥置于提取罐，先加入少量0.01mol/l-0.015mol/l的hcl溶液预浸泡，得到预浸泡混合物，再加入所述预浸泡混合物的30倍-60倍体积的 0.05mol/l-0.3mol/l柠檬酸溶液，在25摄氏度-28摄氏度条件下浸泡软化12h-24h，在浸泡过程中，ph控制在3.0-4.0，再投入肉泥质量的3
‰‑5‰
的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和胰蛋白酶的复合酶，搅拌反应24h-48h后，酶解反应液依次采用48目滤袋和200目滤袋过滤，收集溶液即得活性胶原提取液。
80.在一些实施方式中，将肉泥置于提取罐，先加入少量0.005mol/l-0.015mol/l的hcl 溶液预浸泡，得到预浸泡混合物，再加入所述预浸泡混合物的30倍-50倍体积的 0.05mol/l-0.3mol/l醋酸溶液，在25摄氏度-28摄氏度条件下浸泡软化12h-36h，在浸泡过程中，ph控制在3.0-4.5，再投入肉泥质量的5
‰‑8‰
的胃蛋白酶，搅拌反应24h-48h后，酶解反应液依次采用48目滤袋和200目滤袋过滤，收集溶液即得活性胶原提取液。
81.请参阅表1，表1为本技术所提供的活性胶原提取液的制备方法所制备的活性胶原提取液的质量指标：
[0082][0083]
表1
[0084]
以下对采用本技术所提供的活性胶原提取液的制备方法的制备的活性胶原提取液的实施例a进行分析：
[0085]
实施例a：
[0086]
取1kg新鲜皮料切割成幅宽为25cm的皮料条，用片皮机去除表皮层及皮下脂肪层，仅保留真皮层，然后用75％乙醇清洗30分钟，纯化水清洗2次，每次15分钟，滤干水分备用；将清洗皮片置于直立式切碎机后搅碎成肉泥，肉泥尺寸约为0.5-1mm左右；将搅碎的肉泥置于清洗缸内，加入1.5l混合有机试剂(v丙酮：v乙醇＝1：1)清洗60min，然后滤掉有机溶剂，再次像清洗罐内加入1.5l质量分数5％的nacl溶液清洗60min，滤掉溶液，最后加入5l纯化水清洗2次，收集肉泥；将肉泥置于提取罐，先加入少量0.01mol/l 的hcl溶液预浸泡，加入50l体积的0.1mol/l的醋酸溶液，ph值为3.0，在25摄氏度条件下浸泡软化12h，再加入5g胃蛋白酶，搅拌反应24h后，酶解反应液依次采用48目滤袋和200目滤袋过滤，收集滤过液得到所述活性胶原提取液。
[0087]
请参阅表2，表2为实施例a的活性胶原提取液的质量检测结果：
对样品进行定量检测，胰蛋白酶敏感性可以检测发生变性的胶原部分。胰蛋白酶可消化胶原中的变性部分(胶原肽及水解胶原),而三螺旋胶原能抵御大多数蛋白酶的消化，通过测定消化液中羟脯胺酸含量分析变性的胶原含量，检测结果表3：
[0096]
样品编号1号2号3号平均值三螺旋活性胶原含量/％92.591.790.991.7
[0097]
表3
[0098]
进一步的，对实施例a的活性胶原提取液进行细胞增殖检测：
[0099]
实施例a的活性胶原提取的细胞增殖试验方法参见文献(chen r n,ho h o,sheu m t. characterization of collagenmatrices crosslinked using microbial transglutaminase [j].biomaterials,2005,26(20):4229-4235.)进行。
[0100]
使用鼠成纤维细胞系nih/3t3细胞系，无菌操作将活性胶原提取液平铺于48孔板内约2mm厚，用冷冻干燥机冻干备用。然后将48孔板冻干测试样品在超净工作台内紫外照射30分钟，将消化状态较好且处于对数生长期的鼠成纤维细胞浓度调整为1
×
104个/ml，接种于冻干样品上，每孔加400μl，设为实验组；
[0101]
将相同密度的细胞直接种于孔板内(孔板内无胶原样品)，每孔400μl，设为对照组；
[0102]
另将含有冻干样品的48孔板，置于超净工作台内紫外照射30分钟，每孔直接加入培养液400μl(不含细胞)，设为调零组。
[0103]
在37摄氏度、5％co2、饱和湿度条件下孵育培养，每间隔24h更换培养液并用倒置显微镜定期观察细胞形态。
[0104]
分别在培养24h(1天)、72h(3天)、120h(5天)后用mtt检测试剂盒检测细胞活力，根据其570nm处吸光度值(a570)的大小(以630nm为参照波长)，评价样品的促细胞增殖能力。
[0105]
实验组a570＝实验组样品测定吸光度值-调零组吸光度值。
[0106]
备注：以上测试设3个复孔取平均值。
[0107]
请参阅表4，表4为细胞增殖检测的检测结果。
[0108]
时间(h)实验组调零组对照组00.0720.0480.041240.2040.0630.175720.4550.0520.3451200.8520.0840.964
[0109]
表4
[0110]
从以上测试数据可知，实验组的吸光值随着时间不断增加，实验组孔板内的细胞生长增殖情况较好，表明本实施例所制备的活性胶原提取液具有较好地促进细胞增殖的能力。
[0111]
请参阅图3-4，本技术还提供一种活性胶原提取液的制备系统。所述活性胶原提取液的制备系统10用于制备前述活性胶原提取液。
[0112]
所述活性胶原提取液的制备系统10包括片皮设备组11、切碎设备12、除杂设备组 13、提取设备组14。
[0113]
所述片皮设备组11用于对新鲜皮料除去表皮层和皮下脂肪层，采用第一有机溶剂
和水进行清洗，得到第一半成品。
[0114]
具体的，片皮设备组11包括切割机111、片皮机112和清洗装置113。
[0115]
所述切割机111用于对新鲜皮料进行切割处理，得到所述皮料条。所述切割机111用于将新鲜皮料切割为幅宽为20cm-35cm的皮料条。
[0116]
所述片皮机112用于除去所述皮料条的表皮层和皮下脂肪层，得到第一中间产物。
[0117]
所述清洗装置113用于采用所述第一有机溶剂和所述水对所述第一中间产物进行清洗得到所述第一半成品。
[0118]
所述切割机111具有切割投料口和切割出料口。所述片皮机112具有片皮投料口和片皮出料口。所述清洗装置113包括清洗槽、皮料条投料口、第一有机溶剂投料口、水投料口和皮料条出料口。所述皮料条投料口、所述第一有机溶剂投料口、所述水投料口和所述皮料条出料口均与所述清洗槽连通。所述皮料条投料口、所述第一有机溶剂投料口、所述水投料口和所述皮料条出料口为同一开口或不同开口。
[0119]
新鲜皮料从所述切割投料口投入所述切割机111，所述切割机111对所述牛皮进行切割后形成所述皮料条，所述皮料条从所述切割出料口输出；从所述切割出料口输出的所述皮料条从所述片皮投料口进入所述片皮机112，经过所述片皮机112处理后，得到所述第一中间产物，所述第一中间产物从所述片皮出料口输出；从所述片皮出料口输出的所述第一中间产物，从所述皮料条投料口进入所述清洗槽，再由所述第一有机溶剂投料口加入所述第一有机溶剂进行清洗，待清洗完毕后，除去所述第一有机溶剂，由所述水投料口加入水进行清洗，待清洗完毕后，除去水，得到所述第一半成品，所述第一半成品由所述皮料条出料口输出。
[0120]
在一些实施例中，所述皮料条投料口、所述第一有机溶剂投料口、所述水投料口和所述皮料条出料口为同一开口。在其他实施例中，所述皮料条投料口、所述第一有机溶剂投料口、所述水投料口和所述皮料条出料口也可以为不同开口。
[0121]
所述清洗装置113还可以包括出液口，所述出液口用于排出所述第一有机溶剂和所述水。
[0122]
所述切碎设备12用于将所述第一半成品搅碎成肉泥，得到第二半成品。所述肉泥为所述第二半成品。
[0123]
具体的，将所述第一半成品置于直立式切碎机后搅碎成肉泥。肉泥尺寸一般小于 0.5mm-3mm。
[0124]
所述除杂设备组13用于采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品。
[0125]
所述除杂设备组13包括第一清洗缸131a、第一除杂过滤设备131b、第二清洗缸132a、第二除杂过滤设备132b、第三清洗缸133a和第三除杂过滤设备133b。
[0126]
所述第一清洗缸131a用于将所述第二有机溶剂和所述第二半成品进行混合。所述第一除杂过滤设备131b用于对所述第一清洗缸131a中的混合物进行过滤，滤掉液体，得到第二中间产物。
[0127]
所述第二清洗缸132a用于将所述盐溶液和所述第二中间产物进行混合。所述第二除杂过滤设备132b用于对所述第二清洗缸132a中的混合物进行过滤，滤掉液体，得到第三中间产物。
[0128]
所述第三清洗缸133a用于将所述水和所述第三中间产物进行混合。所述第三除杂过滤设备133b用于对所述第三清洗缸133a中的混合物进行过滤，滤掉液体，得到所述第三半成品。
[0129]
所述第一清洗缸131a、所述第二清洗缸132a和所述第三清洗缸133a为同一清洗缸或不同清洗缸，所述第一除杂过滤设备131b、所述第二除杂过滤设备132b和所述第三除杂过滤设备133b同一除杂过滤设备或不同除杂过滤设备。
[0130]
如图3所示，所述第一清洗缸131a、所述第二清洗缸132a和所述第三清洗缸133a为同一清洗缸，所述第一除杂过滤设备131b、所述第二除杂过滤设备132b和所述第三除杂过滤设备133b同一除杂过滤设备。
[0131]
如图4所示，所述第一清洗缸131a、所述第二清洗缸132a和所述第三清洗缸133a为不同清洗缸，所述第一除杂过滤设备131b、所述第二除杂过滤设备132b和所述第三除杂过滤设备133b为不同除杂过滤设备。所述第一清洗缸131a、所述第一除杂过滤设备131b、所述第二清洗缸132a、所述第二除杂过滤设备132b、所述第三清洗缸133a和所述第三除杂过滤设备133b依次连接于所述切碎设备12和所述提取设备组14之间。
[0132]
所述除杂设备组13还包括计量器134。所述计量器134用于对加入所述第一清洗缸 131a的所述第二半成品、对加入所述第一清洗缸131a的所述第二有机溶剂、对加入所述第二清洗缸132a的所述盐溶液和对加入所述第三清洗缸133a的所述水进行质量计算。所述计量器134可以为秤。在其他实施例中，所述计量器134还可以用于对加入所述第一清洗缸131a的所述第二半成品、对加入所述第一清洗缸131a的所述第二有机溶剂、对加入所述第二清洗缸132a的所述盐溶液和对加入所述第三清洗缸133a的所述水进行体积计算。所述计量器134可以为量筒。需要说明的是，根据所述计量器134计算的质量或体积，可以通过质量和体积之间的关系，进行质量和体积的换算。
[0133]
进一步的，为适应于工业自动化生产的要求，所述除杂设备组13还可以包括处理器 135。所述处理器135用于控制所述第二有机溶剂与所述第二半成品的质量比，用于控制所述盐溶液与所述第二半成品的质量比，以及用于控制加入所述除杂设备的所述水与所述第二半成品的质量比。具体的，所述处理器135用于控制所述第二有机溶剂与所述第二半成品的质量比为0.5-3.5：1，用于控制所述盐溶液与所述第二半成品的质量比为0.5-3.5：1，以及用于控制加入所述除杂设备的所述水与所述第二半成品的质量比为2.5-7：1。
[0134]
所述提取设备组14用于对所述第三半成品进行预浸泡、软化以及酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液。具体的，在一些实施方式中，所述提取设备组14可以用于采用hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入软化溶液进行软化，软化过程的温度为20摄氏度-40摄氏度，ph值为2.5-4.5，加入第一组蛋白酶或者第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液。
[0135]
具体的，所述提取设备组14包括提取罐141、搅拌器142和提取液过滤设备143。
[0136]
所述提取罐141用于采用所述hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入所述软化溶液进行软化，加入所述第一组蛋白酶或者所述第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的所述酶解液为所述第四半成品。
[0137]
所述搅拌器142用于对所述提取罐141中的混合物进行搅拌。
[0138]
所述提取液过滤设备143用于对所述第四半成品进行过滤，得到的溶液为所述活性胶原提取液。
[0139]
所述提取设备组14还可以包括计量器144、温度计145和ph计146。
[0140]
所述计量器144用于对加入所述提取罐141的所述软化溶液的体积和所述第一组蛋白酶或第二组蛋白酶的质量进行计算。所述计量器144可以为量筒和秤。
[0141]
所述温度计145用于检测所述提取罐141内混合物的温度。
[0142]
所述ph计146用于检测所述提取罐141内混合物的ph值。
[0143]
进一步的，为适应于工业自动化生产的要求，所述提取设备组14还包括处理器147。所述处理器147用于控制所述软化溶液与所述预浸泡混合物的体积比、控制所述第一组蛋白酶与所述第三半成品的质量比、控制所述第二组蛋白酶与所述第三半成品的质量比、控制软化过程的ph值，以及控制软化过程的温度。具体的，在一种实施方式中，所述处理器147可以用于控制所述软化溶液与所述预浸泡混合物的体积比为20-60：1，所述第一组蛋白酶与所述第三半成品的质量比为4
‰‑
10
‰
：1，所述第二组蛋白酶与所述第三半成品的质量比为2
‰‑6‰
：1，控制加入所述软化溶液以保持ph值为2.5-4.5，以及控制软化过程的温度为20摄氏度-40摄氏度。
[0144]
所述提取设备组14还可以包括显示组件148，所述处理器147还用于控制所述显示组件148显示所述计量器144所计算的质量、所述温度计145所检测的温度和所述ph计 146所检测的ph值。
[0145]
所述提取液过滤设备143包括第一子设备1431和第二子设备1432。所述第一子设备 1431的滤袋的目数为30-50。所述第二子设备1432的滤袋的目数为150-300。所述第一子设备1431用于对所述第四半成品进行过滤，得到提取液半成品。所述第二子设备1432用于对所述提取液半成品进行过滤，得到所述活性胶原提取液。
[0146]
本技术还提供一种护肤品。所述护肤品包括活性胶原提取液、透明质酸钠、平衡剂、柔润剂、剂型调节剂、防腐剂和水。所述活性胶原提取液为如前所述的活性胶原提取液。所述护肤品还可以包括香料、精油和色料等。所述活性胶原提取液、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系为2份-10 份的所述活性胶原提取液、2份-6份的所述透明质酸钠、1份-4份所述平衡剂、100份-200 份的所述柔润剂、2份-20份的所述剂型调节剂、1份-4份的所述防腐剂和1760份-1900 份的水。可以对所述护肤品中组分份量的调整，使得所述护肤品具有多种产品形态，例如，护肤精华、护肤水、护肤乳、护肤凝胶、面膜、护肤霜或护肤膏等。
[0147]
在一些实施例中，所述活性胶原提取液、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为5份的所述活性胶原提取液、5份的所述透明质酸钠、2份所述平衡剂、150份的所述柔润剂、10份的所述剂型调节剂、2份的所述防腐剂和1800份的水。
[0148]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为8份的所述活性胶原提取液、6份的所述透明质酸钠、1份所述平衡剂、200份的所述柔润剂、5份的所述剂型调节剂、1份的所述防腐剂和1900份的水。
[0149]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为3份的所述活性胶原提取液、2份的所述透明质酸钠、4份所述平衡剂、100份的所述柔润剂、15份的所述剂型调节剂、3份的所述防腐剂和1850份的水。
[0150]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为6份的所述活性胶原提取液、3份的所述透明质酸钠、1份所述平衡剂、180份的所述柔润剂、20份的所述剂型调节剂、2份的所述防腐剂和1760份的水。
[0151]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为4份的所述活性胶原提取液、4份的所述透明质酸钠、4份所述平衡剂、120份的所述柔润剂、10份的所述剂型调节剂、2份的所述防腐剂和1900份的水。
[0152]
所述透明质酸钠为分子量为120万-150万、80万-100万、20万-40万和1万-10万道尔顿的透明质酸钠的一种或几种的组合。
[0153]
所述平衡剂包括甘草酸二钾、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠中的一种或几种的组合。所述平衡剂还可以包括三乙醇胺、甲基丙醇、氢氧化钾、氢氧化钠中的一种或几种的组合。
[0154]
所述剂型调节剂为羟乙基纤维素和黄原胶中的一种或两种的组合。
[0155]
所述防腐剂包括辛酰羟肟酸和乙基己基甘油中的一种或两种的组合。所述防腐剂还可包括羟苯甲酯、氯苯甘醚、安息香酸、山梨酸、水杨酸盐、羟基苯甲酸酯类、尼泊金、对氯间二甲苯酚、2，4，4
’‑
三氯代-n-碳酰苯胺、烷基三甲基氯化铵、烷基溴化喹啉、十六烷基氯化吡啶、乙醇、甲基二溴戊二腈和苯氧乙醇、双咪唑烷基脲和碘中的一种或几种的组合。
[0156]
所述活性胶原提取液的ph为3.5-5.5，所述护肤品的ph为4.5-7。
[0157]
本技术还提供一种护肤品的制备方法，包括：
[0158]
b21、提供活性胶原提取液、透明质酸钠、平衡剂、柔润剂、剂型调节剂、防腐剂和水，所述活性胶原提取液为如前所述的活性胶原提取液，所述活性胶原提取液、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系为2份-10份的所述活性胶原提取液、2份-6份的所述透明质酸钠、1份-4份所述平衡剂、100份-200份的所述柔润剂、2份-20份的所述剂型调节剂、1份-4份的所述防腐剂和 1760份-1900份的水；
[0159]
在一些实施例中，所述活性胶原提取液、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为5份的所述活性胶原提取液、5份的所述透明质酸钠、2份所述平衡剂、150份的所述柔润剂、10份的所述剂型调节剂、2份的所述防腐剂和1800份的水。
[0160]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为8份的所述活性胶原提取液、6份的所述透明质酸钠、1份所述平衡剂、200份的所述柔润剂、5份的所述剂型调节剂、1份的所述防腐剂和1900份的水。
[0161]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为3份的所述活性胶原提取液、2份的所述透明质酸
钠、4份所述平衡剂、100份的所述柔润剂、15份的所述剂型调节剂、3份的所述防腐剂和1850份的水。
[0162]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为6份的所述活性胶原提取液、3份的所述透明质酸钠、1份所述平衡剂、180份的所述柔润剂、20份的所述剂型调节剂、2份的所述防腐剂和1760份的水。
[0163]
在一些实施例中，所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述柔润剂、所述剂型调节剂、所述防腐剂和所述水的质量份数关系可以为4份的所述活性胶原提取液、4份的所述透明质酸钠、4份所述平衡剂、120份的所述柔润剂、10份的所述剂型调节剂、2份的所述防腐剂和1900份的水。
[0164]
所述透明质酸钠为分子量为120万-150万、80万-100万、20万-40万和1万-10万道尔顿的透明质酸钠的一种或几种的组合。
[0165]
所述平衡剂包括甘草酸二钾、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠中的一种或几种的组合。所述平衡剂还可以包括三乙醇胺、甲基丙醇、氢氧化钾、氢氧化钠中的一种或几种的组合。
[0166]
所述柔润剂为甘油、丁二醇、丙二醇、甘油辛酸酯、1,2-己二醇，甘油聚醚-26中的一种或几种。
[0167]
所述剂型调节剂为羟乙基纤维素和黄原胶中的一种或两种的组合。
[0168]
所述防腐剂包括辛酰羟肟酸和乙基己基甘油中的一种或两种的组合。所述防腐剂还可包括羟苯甲酯、氯苯甘醚、安息香酸、山梨酸、水杨酸盐、羟基苯甲酸酯类、尼泊金、对氯间二甲苯酚、2，4，4
’‑
三氯代-n-碳酰苯胺、烷基三甲基氯化铵、烷基溴化喹啉、十六烷基氯化吡啶、乙醇、甲基二溴戊二腈和苯氧乙醇、双咪唑烷基脲和碘中的一种或几种的组合。
[0169]
所述活性胶原提取液的ph为3.5-5.5，所述护肤品的ph为4.5-7。
[0170]
b22、根据所述质量份数关系将所述水的一部分、所述透明质酸钠、所述平衡剂、所述剂型调节剂在40摄氏度-60摄氏度混合搅拌，得到第一混合物。
[0171]
b23、根据所述质量份数关系将所述柔润剂和所述防腐剂加入所述第一混合物中，得到第二混合物。
[0172]
b24、待所述第二混合物冷却至室温，根据所述质量份数关系将所述活性胶原提取液加入所述第二混合物中搅拌，再加入所述水的另一部分进行搅拌，得到所述护肤品。
[0173]
请参阅表5，表5为本技术所提供的护肤品的制备方法所制备的护肤品的质量指标：
[0174][0175]
表5
[0176]
以下对采用本技术所提供的护肤品的制备方法的实施例b进行分析：
[0177]
实施例b：
[0178]
按比例将50.0kg纯化水、透明质酸钠100.0g(分子量为120万-150万的50.0g、分子量为20万-40万的25.0g和分子量1万-10万的25.0g)、甘草酸二钾100.0g、羟乙基纤维素100.0g和黄原胶100.0g依次投入搅拌罐后50摄氏度搅拌均质60min，然后再依次向罐内投入甘油3.5kg、丁二醇1kg、丙二醇0.5kg、1,2-己二醇0.6kg、甘油聚醚-26 1.0kg 和甘油辛酸酯7.0g，辛酰羟肟酸70.0g，再次搅拌均匀冷却至室温，加入实施例a制备的活性胶原提取液37.0kg，补足剩余水分6.3kg至100kg，搅拌均匀即得护肤品。
[0179]
其中，所述平衡剂为甘草酸二钾，所述剂型调节剂为羟乙基纤维素和黄原胶的组合，所述柔润剂为甘油、丁二醇1kg、丙二醇、1,2-己二醇、甘油辛酸酯和甘油聚醚-26的组合，所述防腐剂为辛酰羟肟酸。
[0180]
请参阅表6，表6为实施例b的护肤品的质量检测结果：
[0181][0182]
表6
[0183]
由此可知，本技术所提供的护肤品的制备方法所制备的护肤品符合质量标准。
[0184]
进一步的，对实施例b的护肤品进行保湿效果测试：
[0185]
为测试实施例b与对比例中制备得到的护肤的保湿效果，以小型玻璃板和医用透气胶带为仿角质层、表皮等生物材料，模拟在人皮肤上涂抹霜剂的过程，在制成的0.9cm
×
5.5cm 的模拟装置上涂抹0.2g的护肤液，放入25摄氏度的烘箱中，间隔5min精确称取模拟装置的质量，精密称量样品放置前的质量m1和放置后的质量m2，计算30min后的保湿率。
[0186]
请参阅表7，表7为实施例b的护肤品进行保湿效果测试结果。
[0187] 样品1样品2样品3对比例体外保湿率49.97％55.83％57.38％28.12％
[0188]
表7
[0189]
由表7中的数据可以得到，本实施例中制备的护肤液保湿补水效果较好，说明实施例的护肤液成分具有较好的补水保湿功效。
[0190]
进一步的，对实施例b的护肤品进行抗氧化效果测试：
[0191]
为测试实施例b与对比例中制备得到的护肤液的抗氧化效果，在市面上购买具有抗氧化功效的护肤品作为普通对照组。
[0192]
将dpph自由基溶于无水乙醇中配制成2
×
10-8
mol/l的dpph溶液。向试管中分别加入2ml护肤精华液，再加入2mldpph溶液，强烈振荡后放于暗处静置30min，无水乙醇为对照，于517nm处分别测定各反应液的吸光度值，计算各待测样品对dpph自由基的清除率。
[0193]
请参阅表8，表8为实施例b的护肤品进行抗氧化效果测试结果。
[0194] 样品1样品2样品3普通对照dpph自由基清除率78.19％82.16％85.19％71.92％
[0195]
表8
[0196]
由表8中的数据可以得到，本实施例中制备的护肤抗氧化效果较好，这说明胶原蛋
白与透明质酸钠等成分复配后具有较好的抗氧化功效，大小分子透明质酸钠复配后的效果更好。
[0197]
进一步的，对实施例b的护肤品进行酪氨酸酶抑制率测试：
[0198]
为测试实施例与对比例中制备得到的护肤液的酪氨酸酶抑制率效果，购买市面上宣称具有提亮肤色功效的产品作为普通对照组。测试方法参照上海日用化学品行业协会发布的团体标准“化妆品-酪氨酸酶活性抑制实验方法”进行测试。
[0199]
分别取1ml护肤液，0.9ml ph＝6.8的磷酸缓冲液和1ml 0.03％的酪氨酸于试管中，加入0.1ml酪氨酸酶水溶液(1070u/ml)，将溶液混合均匀，置于恒37摄氏度水浴中反应10分钟，加入2ml的左旋多巴溶液,控制每管反应时间为5分钟,用分光光度计测其475nm处的吸光度值a1。用等体积的磷酸缓冲液代替酪氨酸酶，测其吸光度值a2。用等体积的磷酸缓冲液代替护肤液，测其吸光度值a3。用等体积的磷酸缓冲液代替酪氨酸酶和护肤液，测其吸光度值a4。计算护肤液对酪氨酸酶的抑制率，抑制率(％)＝[1
‑ꢀ
(a1-a2/a3-a4)]
×
100％。
[0200]
请参阅表9，表9为实施例b的护肤品进行酪氨酸酶抑制率测试结果。
[0201] 样品1样品2样品3普通对照酪氨酸酶抑制率80.37％81.48％87.83％60.31％
[0202]
表9
[0203]
由表9中的数据可知道，本实施例中制备的护肤液样品酪氨酸酶抑制率效果较好，可起到美白、提亮肤色的功效。
[0204]
在本技术所提供的护肤品中，胶原提取液和透明质酸钠的大分子与小分子功能成分体系，使得大分子活性成分作用于皮肤表面及表皮层，小分子活性成分作用于真皮层，起到内外兼修的效果。护肤液的ph为4.5-7，即可为皮肤提供微弱酸环境抑制细菌生长，又可改善皮脂腺的分泌排泄。
[0205]
本技术一种活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法，在制备所述活性胶原提取液时，提供新鲜皮料，除去表皮层和皮下脂肪层，采用第一有机溶剂和水进行清洗，得到第一半成品；将所述第一半成品搅碎成肉泥，得到第二半成品；采用第二有机溶剂、盐溶液和水依次清洗所述第二半成品，得到第三半成品；以及采用hcl溶液对所述第三半成品进行预浸泡，得到预浸泡混合物，加入软化溶液进行软化，软化过程的温度为 20摄氏度-40摄氏度，ph值为2.5-4.5，加入第一组蛋白酶或者第二组蛋白酶进行酶解反应，通过酶解反应得到的酶解液为第四半成品，对所述第四半成品进行过滤得到的溶液为所述活性胶原提取液，整体制备过程无需低温条件，使得所述活性胶原提取液生产难度降低，从而实现了一种生产难度低的活性胶原提取液及制备方法、系统以及护肤品及制备方法。
[0206]
另外，目前大分子活性胶原的提取一般都是针对生物医疗领域，提取原组织材料来源需要符合动物源的法律法规严格要求，而且提取工艺复杂、繁琐，条件苛刻，提取成本高，仅可用于附加值高的生物医疗领域，具有较大的局限性，难以大规模生产及应用，而在化妆品领域普遍采用此复杂工艺制备活性胶原后作为有效成分添加到产品中，由于这些限制，活性胶原在化妆品/护肤品的大规模应用难度非常大。
[0207]
目前市面上的胶原蛋白类化妆品/护肤品产品多数为胶原蛋白多肽或水解胶原蛋白，鲜有以活性胶原基为主的护产品专利报道，尤其是以制备的活性胶原提取液为基础进行应用开发，而活性胶原由于其特殊的结构和功能特性在化妆品/护肤品应用在赋予产品
多重功效方面发挥重要作用，而且现有的化妆品/护肤品成分较为复杂多样，制备工艺较为繁琐。
[0208]
活性胶原水溶性较差，需要在酸性条件下溶解，而在酸性条件下会携带负电荷，使得胶原在化妆品/护肤品应用中的配伍存在一定问题，比如：在低于其等电点的溶液中，胶原呈现正电性而透明质酸钠则为负电性，两者共混时产生较强的静电吸引作用，产生絮状聚合物沉淀，导致相容性较差。目前，通常采用氯化钠或磷酸盐等强电解质充当平衡物质类解决此问题，但通常盐所需的添加量较多，这样使得溶液粘感、质地明显改变，而且溶液中水分子会和小分子盐产生水合作用，而水中oh-会与胶原以及透明质酸分子中的羟基形成氢键，破坏了原有胶原分子间氢键对胶原的三螺旋结构有一定的影响，进而影响其活性。
[0209]
本技术所提供的活性胶原提取工艺简单高效，可有效控制活性胶原原料的成本；以胶原为核心成分的护肤品成分精简、各成分配伍合理、相容性佳、均一稳定，制备方法简单，易于大规模工业化生产；护肤品温和不刺激，具有良好的皮肤修复功能，有效促进细胞增殖，能起到修护、营养肌肤、补水保湿、抗氧化、提亮肤色和紧致的功效。
[0210]
以上所述仅为本技术的实施方式，并非因此限制本技术的专利范围，凡是利用本技术说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本技术的专利保护范围内。