对2型大麻素受体具有亲和力的[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶衍生物的制作方法

对2型大麻素受体具有亲和力的[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶衍生物
[0001]
本技术是pct国际申请日为2017年6月20日，pct国际申请号为 pct/ep2017/064994、中国国家申请号为201780036295.x、发明名称为《对 2型大麻素受体具有亲和力的[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶衍生物》的申请的分案申请。
[0002]
本发明涉及对2型大麻素(cb2)受体具有亲和力的新型[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶衍生物、其制备及其诊断和治疗用途。
[0003]
本发明特别涉及式(i)的化合物，
[0004][0005]
其中
[0006]
r1是选自苯基和[1，2，5]二唑基的环，其中所述环被选自以下的一个取代基取代：卤代磺酰基、卤代磺酰基烷基、异硫氰基烷基、异硫氰基 (isothiocyanato)、氨基烷基二硫基烷基、羟基烷基二硫基(disulfanyl)烷基、羟基烷基二硫基、氨基烷基二硫基、卤素、烷基、吡啶基二硫基烷基、苯并三唑基磺酰基烷基、二羟基烷基二硫基烷基和吡啶基二硫基，并且任选地进一步被氰基取代；
[0007]
r2和r3独立地选自氢、羟基、卤素、巯基、巯基氮杂环丁烷基、叠氮基、异硫氰基和烷基二硫基；
[0008]
条件是r1、r2和r3中的至少一个是包括以下的基团：磺酰基、异硫氰基、二硫基、巯基或叠氮基；
[0009]
r4是烷基或苯基卤代烷基；并且
[0010]
n是0或1；
[0011]
或其药用盐或酯。
[0012]
已经发现了对于大麻素cb2受体具有高亲和力和极大选择性的新型 [1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶衍生物。这些化合物对于cb2受体的活性具有调节作用。术语
‘
调节作用’尤其意指激动剂、拮抗剂和/或反向激动剂作用。
[0013]
大麻素受体2的激动剂可用于哺乳动物的治疗和/或预防。式(i)的化合物特别可用于治疗或预防例如疼痛(pain)、动脉粥样硬化(atherosclerosis)、老年性黄斑变性(age-related macular degeneration)、糖尿病性视网膜病变 (diabetic retinopathy)、青光眼(glaucoma)、糖尿病(diabetes mellitus)、炎症 (inflammation)、炎性肠病
(inflammatory bowel disease)、缺血再灌注损伤 (ischemia-reperfusion injury)、急性肝功能衰竭(acute liver failure)、肝纤维化(liver fibrosis)、肺纤维化(lung fibrosis)、肾纤维化(kidney fibrosis)、系统性纤维化(systemic fibrosis)、急性同种异体移植排斥(acute allograftrejection)、慢性同种异体移植肾病(chronic allograft nephropathy)、糖尿病性肾病(diabetic nephropathy)、肾小球性肾病(glomerulonephropathy)、心肌病(cardiomyopathy)、心力衰竭(heart failure)、心肌缺血/梗死(myocardialischemia/infarction)、系统性硬化病(systemic sclerosis)、热伤(thermal injury)、烧伤(burning)、增生性瘢痕(hypertrophic scars)、瘢痕瘤(keloids)、牙龈炎发热(gingivitis pyrexia)、肝硬化或肿瘤(liver cirrhosis or tumors)、骨量调节 (regulation of bone mass)、神经变性(neurodegeneration)、卒中(stroke)、暂时性局部缺血发作(transient ischemic attack)或葡萄膜炎(uveitis)。
[0014]
大麻素受体2的反向激动剂可用于哺乳动物的治疗和/或预防。
[0015]
式(i)的化合物特别可用于治疗或预防疼痛、神经性疼痛、哮喘、骨质疏松、炎症、精神疾病、精神病、肿瘤、脑炎、疟疾、变态反应、免疫性病症、关节炎、胃肠道病症、精神异常、类风湿性关节炎、精神病和变态反应。
[0016]
大麻素受体是一类细胞膜受体，属于g蛋白-偶联受体超家族。目前存在两种已知亚型，称为大麻素受体1(cb1)和大麻素受体2(cb2)。cb1 受体主要表达在中枢神经(即杏仁核小脑，海马体)系统中并且在外周中以较少量表达。由cnr2基因编码的cb2主要在免疫系统的细胞，如巨噬细胞和t-细胞上(ashton，j.c.等curr neuropharmacol 2007，5(2)，73-80； miller，a.m.等br j pharmacol 2008，153(2)，299-308；centonze，d.，等 curr pharm des 2008，14(23)，2370-42)，和在胃肠系统中(wright，k.l. 等br j pharmacol 2008，153(2)，263-70)外周表达。cb2受体还广泛分布于脑中，其中它主要发现于小胶质细胞而非神经元上(cabral，g.a.等br jpharmacol 2008，153(2)：240-51)。
[0017]
大麻素受体2的调节剂可用于哺乳动物的治疗和/或预防。
[0018]
在过去十年对cb2受体激动剂的兴趣稳步上升(目前30-40件专利申请/年)，这是由于以下事实所致，即早期化合物中的多种已显示在大量人类疾病的临床前模型中具有有益作用，这些疾病包括慢性疼痛(beltramo， m.mini rev med chem 2009，9(1)，11-25)，动脉粥样硬化(mach，f.等jneuroendocrinol 2008，20suppl 1，53-7)，骨量调节(bab，i.等br jpharmacol 2008，153(2)，182-8)，神经性炎症(cabral，g.a.等j leukoc biol2005，78(6)，1192-7)，缺血/再灌注损伤(pacher，p.等br j pharmacol 2008， 153(2)，252-62)，系统性纤维化(akhmetshina，a.等artritis rheum 2009， 60(4)，1129-36；garcia-gonzalez，e.等rheumatology(oxford)2009，48(9)， 1050-6)，肝纤维化(julien，b.等gastroenterology 2005，128(3)，742-55； munoz-luque，j.等j pharmacol exp ther 2008，324(2)，475-83)。
[0019]
缺血/再灌注(i/r)损伤是在病症如卒中、心肌梗死、心肺分流术 (cardiopulmonary bypass)及其他血管外科手术和器官移植中发生的组织损伤的主要原因，以及使得多种病因学的循环性休克的过程复杂化的终末器官损伤的主要机制。所有这些病症的特征在于正常血压供应破坏，这导致不足的血液氧合。再氧合例如再灌注是用于恢复正常组织氧合的终极治疗。然而，来自血液的氧和营养的缺乏产生其中循环恢复导致
进一步组织损伤的病况。再灌注损伤的损害部分地是由于受损组织的炎性反应。由新回血携带至该区域的白血球响应于组织损伤而释放许多炎性因子如白介素以及自由基。恢复的血流在细胞内重新引入氧，其损害细胞蛋白、dna 和质膜。
[0020]
远端缺血预处理(ripc)代表利用身体内源性保护能力对抗由于缺血和再灌注引起的损伤的策略。其描述了其中一个器官或组织的短暂非致死性缺血和再灌注对于远端器官或组织中的“致死性”缺血再灌注损伤的后续发作(subsequent episode)提供抗性的一种非常有趣的现象。尽管已经提出多种假说，但是器官或组织的短暂缺血和再灌注借以提供保护的确切机制在当前是未知的。
[0021]
体液假说提出，在远端器官或组织中产生的内源性物质(如腺苷、缓激肽、阿片类、cgrp、内源性大麻素、血管紧缩素i或一些还没有被鉴别的体液因子的其他物质)进入血流并在靶组织中激活其相应受体，并由此募集在缺血预适应中涉及的心肌保护的各种细胞内途径。
[0022]
近期数据表明，内源性大麻素及其受体，特别是cb2可能涉及预适应并且通过下调炎性反应而有助于预防再灌注损伤(pacher，p.等br jpharmacol 2008，153(2)，252-62)。具体地，利用cb2工具激动剂的近期研究证实了此构思对于减少心脏(defer，n.等faseb j 2009，23(7)，2120-30)、大脑(zhang，m.等j cereb blood flow metab 2007，27(7)，1387-96)、肝脏 (batkai，s.等faseb j 2007，21(8)，1788-800)和肾脏(feizi，a.等exp toxicolpathol 2008，60(4-5)，405-10)中的i/r损伤的功效。
[0023]
此外，在过去的几年内，越来越多的文献表明，cb2在亚慢性和慢性情形中也可以令人感兴趣。cb1和cb2的特异性上调已经显示在与纤维化相关的慢性疾病的动物模型(garcia-gonzalez，e.等rheumatology (oxford)2009，48(9)，1050-6；yang，y.y.等liver int 2009，29(5)，678-85)中与肌纤维母细胞(负责纤维化进展的细胞)中的cb2的相关表达是有关的。
[0024]
cb2受体通过选择性cb2激动剂的激活事实上已经显示在扩散性系统硬化病中发挥抗纤维化作用(garcia-gonzalez，e.等rheumatology (oxford)2009，48(9)，1050-6)并且cb2受体已经在实验性皮肤纤维化 (akhmetshina，a.等arthritis rheum 2009，60(4)，1129-36)和肝脏病理生理学，包括与慢性肝病相关的纤维发生(fibrogenesis)(lotersztajn，s.等 gastroenterol clin biol 2007，31(3)，255-8；mallat，a.等expert opin thertargets 2007，11(3)，403-9；lotersztajn，s.等br j pharmacol 2008，153(2)， 286-9)中作为关键靶标出现。
[0025]
大麻素受体2的反向激动剂可用于哺乳动物的治疗和/或预防。
[0026]
式(i)的化合物特别可用于治疗或预防疼痛、神经性疼痛、哮喘、骨质疏松、炎症、精神疾病、精神病、肿瘤、脑炎、疟疾、变态反应、免疫性病症、关节炎、胃肠道病症、精神异常、类风湿性关节炎、精神病和变态反应。
[0027]
在过去十年对cb2受体配体的兴趣稳步上升(目前30-40件专利申请/ 年)。不同来源的证据支持这样的观点：通过cb2受体的脂内源性大麻素信号传导代表哺乳动物保护性医疗设备的一个方面(pacher，p.prog lipidres 2011，50，193)。通过选择性cb2受体激动剂或反向激动剂/拮抗剂(取决于疾病及其阶段)对其的调节在大量疾病中保持唯一的治疗潜能。对于 cb2反向激动剂/拮抗剂，对于很多病理状况显示了治疗可能性：所述病理状况
包括疼痛(pasquini，s.j med chem 2012，55(11)：5391)，神经性疼痛(garcia-gutierrez，m.s.br j pharmacol 2012，165(4)：951)，精神病症 (garcia-gutierrez，m.s.br j pharmacol 2012，165(4)：951)，精神病 (garcia-gutierrez，m.s.br j pharmacol 2012，165(4)：951)，骨质疏松和炎症(sophocleous，a.calcif tissue int 2008，82(suppl.1)：abst oc18)，精神疾病和精神病(garcia-gutierrez，m.s.br j pharmacol 2012，165(4)：951)，肿瘤(preet，a.cancer prev res 2011，4：65)，脑炎和疟疾(zimmer，a.wo2011045068)，变态反应和炎症(ueda，y.life sci 2007，80(5)：414)，脑炎和疟疾(zimmer，wo 2011045068)，哮喘(lunn，c.a.j pharmacol exp ther2006，316(2)：780)，免疫性病症(fakhfouri，g.neuropharmacology 2012， 63(4)：653)，类风湿性关节炎(chackalamannil，s.us 7776889)，关节炎 (lunn，c.a.j pharmacol exp ther 2006，316(2)：780)，和胃肠道病症(barth， f.fr 2887550)。
[0028]
本发明的化合物结合和调节cb2受体并且具有较低的cb1受体活性。
[0029]
本发明的化合物含有官能团如磺酰氟、异氰酸酯、硫醇、叠氮化物和甲基二硫基，其可以任选地用于与cb2受体形成共价键。作为共价改性剂的这样的小有机分子可用于检测和定位靶标、用于成像和用于治疗用途(比较，例如adebayo a adeniyi，ramesh muthusamy&mahmoud es soliman， expert opin.drug discov.(2016)11(1)：79-90)。
[0030]
在本说明书中，术语“烷基”，单独或组合地，表示具有1至8个碳原子的直链或支链烷基，特别是具有1至6个碳原子的直链或支链烷基，更特别是具有1至4个碳原子的直链或支链烷基。直链和支链c
1-c8烷基的实例为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、异构的戊基、异构的己基、异构的庚基和异构的辛基，特别是甲基、乙基、丙基、丁基和戊基。烷基的特别的实例是甲基、乙基和叔丁基。
[0031]
术语“卤素”或“卤代”，单独或组合地，表示氟、氯、溴或碘，并特别是氟、氯或溴，更特别是氟和氯。术语“卤代”，与另一基团组合地表示所述基团被至少一个卤素取代，特别是被一至五个卤素，特别是一至四个卤素，即一、二、三或四个卤素取代。
[0032]
术语“卤代烷基”，单独或组合地，表示被至少一个卤素取代，特别是被一至五个卤素，特别是一至三个卤素取代的烷基基团。特别的“卤代烷基”是二氟甲基。
[0033]
术语“羟基(hydroxyl)”和“羟基(hydroxy)”，单独或组合地，表示-oh基团。
[0034]
术语“氨基”，单独或组合地，表示伯氨基(-nh2)，仲氨基(-nh-)，或叔氨基(-n-)。
[0035]
术语“磺酰基”，单独或组合地，意指-so2基团。
[0036]
术语“二硫基”，单独或组合地，意指-s-s-基团。
[0037]
术语“异硫氰基”，单独或组合地，意指-n＝c＝s基团。
[0038]
术语“巯基(thiohydroxyl)”或“巯基(thiohydroxy)”，单独或组合地，意指
ꢀ‑
sh基团。
[0039]
术语“叠氮基”，单独或组合地，表示-n3基团。
[0040]
术语“药用盐”是指保持游离碱或游离酸的生物有效性和性质的那些盐，它们不是生物学上或其他方面不适宜的。所述盐用无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，特别是盐酸，以及有机酸如乙酸、丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、 n-乙酰基半胱氨酸形成。此外，这些盐可以通过将无机碱或有机碱加入游离酸而制备。得自无机碱的
盐包括，但是不限于，钠、钾、锂、铵、钙、镁盐。得自有机碱的盐包括，但是不限于以下物质的盐：伯、仲和叔胺，取代的胺，包括天然存在的取代的胺、环状胺和碱性离子交换树脂，如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、 n-乙基哌啶、哌啶、聚胺树脂。式(i)的化合物也可以以两性离子的形式存在。特别优选的式(i)的化合物的药用盐是盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和甲磺酸的盐。
[0041]
″
药用酯
″
表示通式(i)的化合物可以在官能团处衍生化以提供衍生物，其能够体内转化回母体化合物。这种化合物的实例包括生理上可接受的和易代谢的酯衍生物，如甲氧基甲酯，甲硫基甲酯和新戊酰基氧基甲酯。此外，类似于易代谢的酯的、能够在体内产生通式(i)的母体化合物的、通式 (i)化合物的生理上可接受的任何等同物均在本发明的范围内。
[0042]
如果原料之一或式(i)化合物含有一个或多个在一个或多个反应步骤的反应条件下不稳定或具有反应性的官能团，则可以应用本领域公知的方法在关键步骤之前引入合适的保护基(如例如t.w.greene和p.g.m.wuts 在“protective groups in organic chemistry”，第3版，1999，wiley，new york 中所述)。这样的保护基可以在合成的稍后阶段使用文献中所述的标准方法除去。保护基的实例是叔丁氧羰基(boc)，氨基甲酸9-芴基甲酯(fmoc)，氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙酯(teoc)，苄氧羰基(cbz)和对甲氧基苄氧基羰基(moz)。
[0043]
式(i)化合物可以含有几个不对称中心，并且其存在形式可以是光学纯对映异构体，对映异构体的混合物，如例如外消旋物，非对映异构体的混合物，非对映异构体外消旋物或非对映异构体外消旋物的混合物。
[0044]
术语“不对称碳原子”表示具有四个不同取代基的碳原子。根据 cahn-ingold-prelog协定，不对称碳原子可以为“r”或“s”构型。
[0045]
本发明特别涉及式(i)的化合物，其中
[0046]
r1是选自苯基和[1，2，5]二唑基的环，其中所述环被选自以下的一个取代基取代：卤代磺酰基、卤代磺酰基烷基、异硫氰基烷基、异硫氰基、氨基烷基二硫基烷基、羟基烷基二硫基烷基、羟基烷基二硫基、氨基烷基二硫基、卤素和烷基；
[0047]
r2和r3独立地选自氢、羟基、卤素、巯基、巯基氮杂环丁烷基、叠氮基、异硫氰基和烷基二硫基；
[0048]
条件是r1、r2和r3中的至少一个是包括以下的基团：磺酰基、异硫氰基、二硫基、巯基或叠氮基；
[0049]
r4是烷基或苯基卤代烷基；并且
[0050]
n是0或1；
[0051]
或其药用盐或酯。
[0052]
本发明还涉及：
[0053]
一种式(i)的化合物，其中r1是选自苯基和[1，2，5]二唑基的环，其中所述环被选自以下的一个取代基取代：卤代磺酰基、卤代磺酰基烷基、异硫氰基烷基、异硫氰基、卤素和烷基；
[0054]
一种式(i)的化合物，其中r1是选自苯基和[1，2，5]二唑基的环，其中所述环被选自以下的一个取代基取代：氟磺酰基、氟磺酰基甲基、异硫氰基甲基、异硫氰基、氯和甲
基；
[0055]
一种式(i)的化合物，其中r1是氟磺酰基苯基、氟磺酰基甲基苯基、异硫氰基甲基苯基、异硫氰基苯基、氯苯基和甲基[1，2，5]二唑基；
[0056]
一种式(i)的化合物，其中r2是氢并且r3是羟基、巯基、叠氮基、异硫氰基或甲基二硫基，或r2和r3二者同时为氟；
[0057]
一种式(i)的化合物，其中r4是叔丁基或苯基二氟甲基；和
[0058]
一种式(i)的化合物，其中n是1；
[0059]
一种式(i)的化合物，其中r1是选自苯基和[1，2，5]二唑基的环，其中所述环被选自以下的一个取代基取代：卤代磺酰基、卤代磺酰基烷基、异硫氰基烷基、异硫氰基、卤素、烷基、羟基烷基二硫基烷基、吡啶基二硫基烷基、二羟基烷基二硫基烷基，并且任选地进一步被氰基取代。
[0060]
一种式(i)的化合物，其中r1是选自苯基和[1，2，5]二唑基的环，其中所述环被选自以下的一个取代基取代：氟磺酰基、氟磺酰基甲基、异硫氰基甲基、异硫氰基、氯、甲基、羟乙基二硫基乙基、氟磺酰基乙基、吡啶基二硫基乙基、二羟乙基二硫基乙基，并且任选地进一步被氰基取代；和
[0061]
一种式(i)的化合物，其中r1是氟磺酰基苯基、氟磺酰基甲基苯基、异硫氰基甲基苯基、异硫氰基苯基、氯苯基、甲基[1，2，5]二唑基、羟乙基二硫基乙基苯基、氟磺酰基乙基苯基、吡啶基二硫基乙基苯基、二羟乙基二硫基乙基苯基或(氟磺酰基)(氰基)苯基。
[0062]
本发明还涉及式(i)的化合物，所述化合物选自：
[0063]
2-({5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯-1-磺酰氟；
[0064]
(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基]甲基}苯基)甲磺酰氟；
[0065]
[2-({5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯基]甲磺酰氟；
[0066]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0067]
(3s)-1-(5-叔丁基-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇；
[0068]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[(2-异硫氰基苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0069]
2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3
‑ꢀ
基]甲基}苯-1-磺酰氟；
[0070]
2-{[(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基}苯基)甲基]二硫基}乙-1-胺；
[0071]
2-{[(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基}苯基)甲基]二硫基}乙-1-醇；
[0072]
2-[(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基}苯基)二硫基]乙-1-醇；
[0073]
2-[(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基}苯基)二硫基]乙-1-胺；
[0074]
2-{[2-({5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯基]二硫基}乙-1-胺；
[0075]
2-({[2-({5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯基]甲基}二硫基)乙-1-胺；
[0076]
2-({5-[二氟(苯基)甲基]-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯-1-磺酰氟；
[0077]
2-({5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯-1-磺酰氟；
[0078]
[2-({5-[二氟(苯基)甲基]-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯基]甲磺酰氟；
[0079]
[2-({5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯基]甲磺酰氟；
[0080]
(3s)-1-(5-[二氟(苯基)甲基]-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇；
[0081]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0082]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[(2-异硫氰基苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0083]
1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇；
[0084]
1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}氮杂环丁烷-3-硫醇；
[0085]
(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇；
[0086]
(3r)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇；
[0087]
(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7
‑ꢀ
基}吡咯烷-3-硫醇；
[0088]
(3r)-1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7
‑ꢀ
基}吡咯烷-3-硫醇
[0089]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0090]
5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0091]
5-叔丁基-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0092]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并
[4，5-d]嘧啶；
[0093]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-[3-(甲基二硫基)吡咯烷-1-基]-3-[(4-甲基
ꢀ‑
1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0094]
3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-7-[3-(甲基二硫基)吡咯烷-1
‑ꢀ
基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0095]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-[二氟(苯基)甲基]-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑
ꢀ‑
3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0096]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0097]
3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0098]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0099]
2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基]甲基]苯磺酰氟；
[0100]
2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]甲基二硫基]乙醇；
[0101]
2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3
‑ꢀ
基]甲基]苯磺酰氟；
[0102]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0103]
2-[2-[2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇；
[0104]
2-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇；
[0105]
3-[[2-[2-(苯并三唑-1-基磺酰基)乙基]苯基]甲基]-5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0106]
2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]乙磺酰氟；
[0107]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0108]
2-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙胺；
[0109]
2-[2-[2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙胺；
[0110]
3-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]丙-1，2-二醇；
[0111]
2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]二硫基]乙醇；
[0112]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-(吡啶-2-基二硫基)苯基]甲基] 三唑并[4，5-d]嘧啶；和
[0113]
2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]-3
‑ꢀ
乙炔基苯磺酰氟。
[0114]
本发明还涉及式(i)的化合物，所述化合物选自：
[0115]
2-({5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基}甲基)苯-1-磺酰氟；
[0116]
(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基]甲基}苯基)甲磺酰氟；
[0117]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0118]
(3s)-1-(5-叔丁基-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇；
[0119]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[(2-异硫氰基苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0120]
2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3
‑ꢀ
基]甲基}苯-1-磺酰氟；
[0121]
1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇；
[0122]
(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇；
[0123]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0124]
5-叔丁基-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0125]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-[3-(甲基二硫基)吡咯烷-1-基]-3-[(4-甲基
ꢀ‑
1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0126]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0127]
2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3
‑ꢀ
基]甲基]苯磺酰氟；
[0128]
2-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇；
[0129]
2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]乙磺酰氟；
[0130]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶；
[0131]
3-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]丙-1，2-二醇；和
[0132]
2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]-3
‑ꢀ
乙炔基苯磺酰氟。
[0133]
本发明的式(i)的化合物的制备可以以顺序或收敛合成路线进行。本发明的化合物的合成在以下方案中显示。对于进行反应和所得产物的纯化所需的技巧对于本领域技术人员是已知的。除非有相反指示，在这些方法的以下描述中使用的取代基和索引具有前文所给出的含义。更具体地，式(i) 的化合物可以通过以下给出的方法、通过实施例中给出的方法或通过类似方法制备。用于单独反应步骤的适当反应条件对于本领域技术人员是已知的。而且，对于影响所述反应的文献中描述的反应条件，参见例如： comprehensive organic transformations：a guide to functional grouppreparations(有机转化大全：官能团制备指南)，第2版，richard c.larock. john wiley&sons，newyork，ny.1999)。我们发现在溶剂存在或不存在下很方便地进行反应。对于要采用的溶剂的性质没有特别限制，只要其对所涉及的反应或试剂没有不利影响并且其可以溶解这些试剂，至少达到一定程度。所描述的反应可以在宽范围的温度下发生，并且精确的反应温度对于本发明不是关键的。在-78℃至回流的温度范围内合宜地进行所描述的反应。反应所需的时间也可以宽泛地变化，其取决于许多因素，尤其是反应温度和试剂的性质。然而，0.5小时至几天的时间段通常将足以生成所述的中间体和化合物。反应顺序不限于在这些方案中展示的顺序，然而，取决于起始物料及其各自的反应性，反应步骤的顺序可以自由改变。起始物料要么可商购获得，要么可以通过与以下所给出的方法类似的方法、通过在本说明书中或实施例中所引述的文献中所描述的方法或者通过本领域已知的方法制备。
[0134]
方案1
[0135][0136]
a)卤化物ii要么可商购获得，要么可以根据本领域已知的方法合成。这些卤化物ii便利地与叠氮化钠在合适溶剂如乙腈、乙醇或dmf中反应，得到叠氮化物衍生物iii。备选的优选条件包括使用溶剂如dma、nmp 或dmso，甚至更优选的是nmp和dmso。在极性非质子溶剂如nmp 和dmso中，烷基化通常可以在比例如在乙腈中更低的温度下进行，通常在室温至40℃(例如对于bncl、1-氯-2-(氯甲基)苯或pmb-c1正是如此；这当然取决于卤化物ii的反
应性)并且因此提供更好的过程安全窗口(警告有机叠氮化物当然已知是潜在危险的并且过程安全性总是必须小心评估)。因为其提高叠氮化钠的溶解性，所以加入水可以是有利的，并且因为其有助于溶解nan3的硬块，所以提供更稳健的动力学曲线。它还可以导致最终叠氮化物反应混合物的更好的可滤性。例如当在小通道反应器中以连续方式进行以下环加成时，可能需要过滤反应混合物。不分离叠氮化物并且将其溶液最佳地引入下一步骤。这也避免了其分离，这样的分离也可能导致安全问题。
[0137]
b)三唑衍生物iv可以在适当碱如甲醇钠或乙醇钠存在下，在合适溶剂如甲醇、乙醇或dmf中，通过叠氮化物衍生物iii与2-氰基乙酰胺的[3+2] 环加成来制备。备选的优选条件包括使叠氮化物与2-氰基乙酰胺在溶剂如 nmp或dmso中，在氢氧化钠存在下反应。分批工艺通常在室温至50℃，优选在室温至40℃(警告，过程安全性总是必须小心评估)进行。环加成过程也可修改成连续方式(对于相关文献，例如，参见org.process res.dev.， 2009，13(6)，pp 1401-1406)并且在这种情况下，反应温度可以升高高于 50℃，例如(但不限于)50℃至90℃，优选地60℃至70℃。
[0138]
c)三唑衍生物v可以在碱如diea、dmap、吡啶等存在下通过iv 与酰基卤的酰化作用获得。已观察到双酰化和腈副产物的形成。当例如在作为溶剂的吡啶中工作时，这些可以是显著的。然而，当代替吡啶而使用 dma或nmp，优选地dma作为溶剂时，这些可以被最小化。优选的条件包括在50-100℃，优选地75-85℃，使用1.0-2当量的吡啶和新戊酰氯，优选地1.0至1.5当量，优选地约1.5当量。这些高沸点极性溶剂还可以缩短以下环化步骤，这大大地简化该过程。
[0139]
d)三唑并嘧啶衍生物vi可以在有或没有溶剂如甲醇、乙醇、二烷和甲苯的情况下在碱如khco3、na2co3和水存在下通过三唑衍生物v的分子内环化作用来制备。备选的优选条件包括使用dma或nmp作为溶剂，优选地使用dma。反应可以在khco3存在下在130-170℃，优选地 140至160℃进行。化合物vi可以作为互变异构体或互变异构体的混合物存在，例如：
[0140][0141]
任选地氨基酰胺iv可以与腈r
4-cn在碱如k2co3存在下在溶剂如 dmf中，优先地在接近溶剂的沸点的温度下反应，以直接得到嘧啶酮vi。
[0142]
e)氯化物vii可以在适当碱如n，n-二乙基苯胺、二甲基吡啶或吡啶存在下通过与氯化试剂如pocl3、socl2或(cocl)2的反应获得。备选的优选条件包括使用vilsmeier试剂作为氯化剂。其还可以通过使草酰氯与dmf反应原位产生。氯化可以例如在乙腈、dcm或acoet中，优选在 dcm中进行。这些条件允许温和的反应温度并且例如避免在后处理时过量pocl3的猝灭。粗产物可以被引入到下一步骤中。
[0143]
f)氯化物vii在适当碱如三乙胺、diea或dbu存在下在合适溶剂如乙腈、甲醇、甲苯或dmf中与胺亲核试剂合宜地反应，得到三唑并-嘧啶衍生物i。
[0144]
这些衍生物可以是最终化合物，然而，优选地当r
1-ch2＝取代的苄基基团如对甲氧基苄基时，这些基团可以利用tfa、can、氢化作用等切割，以得到衍生物i(r
1-ch2＝h)。r
1-ch2＝苄基表示合适的备选保护基。其避免使用pmb-cl(用于相应的叠氮化物中间体iii的制备)，已知pmb-cl具有一些热稳定性问题(参见例如organic process research&development2005，9，1009-1012)以及根据供应商而质量不同。苄基基团可以同样例如在酸存在下在标准氢解条件下切割。当使用hcl时，衍生物i(r
1-ch2＝h) 可以潜在地作为盐被分离。
[0145]
三唑衍生物i(r
1-ch2＝h)在合适碱如diea、dbu、k2co3、或cs2co3存在下在溶剂如dmf、二烷或甲苯中，与卤化物(或磺酸酯如甲磺酸酯、全氟丁磺酸酯或甲苯磺酸酯)合宜地反应，或者备选地在适当溶剂如thf、 dcm、甲苯中，在使用合适重氮二羧酸酯(dead、diad等)和膦如pbu3或pph3的mitsunobu反应条件下与醇合宜地反应，得到最终的三唑并-嘧啶衍生物i。
[0146]
如果起始材料、式ii的化合物、步骤c)中使用的酰化试剂或步骤f) 中使用的胺中的一种含有一个或多个在一个或多个反应步骤的反应条件下不稳定或具有反应性的官能团，则可以利用本领域公知方法在关键步骤之前引入适当的保护基团(p)(如例如t.w.greene等人，protective groupsin organic chemistry，john wiley&sons inc.new york 1999，第3版所述的)。这样的保护基团可以在合成的较后阶段使用本领域中已知的标准方法去除。
[0147]
如果式ii至vii的一个或多个化合物、步骤d)中使用的酰化试剂或步骤f)中使用的胺含有手性中心，则可以作为非对映异构体或对映异构体的混合物获得式i的三唑并嘧啶，其可以通过本领域中公知的方法，例如 (手性)hplc或结晶来分离。外消旋化合物可以例如经由非对映异构盐通过结晶或通过特定色谱方法使用手性吸附剂或手性洗脱剂分离对映体而分离为其对映体。
[0148]
本发明还涉及一种用于制备式(i)的化合物的方法，所述方法包括式(a) 的化合物
[0149][0150]
在式(b)的化合物和碱存在下反应，
[0151][0152]
其中r1至r4和n如上所定义。
[0153]
在本发明的方法中，所述碱例如是三乙胺、diea或dbu。
[0154]
在本发明的方法中，可以使用溶剂，其可以例如选自乙腈、甲醇、甲苯和dmf。
[0155]
因此本发明还涉及根据本发明的方法制备的式(i)的化合物。
[0156]
本发明的另一实施方案提供药物组合物或药物，其包含本发明的化合物和治疗惰性载体，稀释剂或赋形剂，以及使用本发明的化合物制备这种组合物和药物的方法。在一个实例中，可以将式(i)化合物通过如下配制：在环境温度在合适的ph，并以期望的纯度程度，与生理学上可接受的载体即在所采用的剂量和浓度对接受者无毒的载体混合成盖仑给药形式。制剂的ph主要取决于具体的用途和化合物的浓度，但是优选在约3至约8 范围内的任意处。在一个实例中，将式(i)化合物在乙酸盐缓冲液中在ph 5 配制。在另一个实施方案中，式(i)化合物是无菌的。可以将化合物例如作为固体或无定形组合物，作为冻干的制剂或作为水溶液储存。
[0157]
以与良好医疗实践相一致的方式将组合物配制，定剂量，和给药。在此考虑的因素包括所治疗的具体病症，所治疗的具体哺乳动物，个体患者的临床状况，病症的原因，药剂的输送位置，给药方法，给药的时间安排，和执业医师已知的其他因素。
[0158]
本发明的化合物可以通过任何合适的方式给药，包括口服、局部(包括经颊和舌下)、直肠、阴道、经皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外和鼻内，并且，如果需要局部治疗，则病灶内给药。肠胃外输液包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。
[0159]
本发明的化合物可以以任何方便的给药形式给药，例如，片剂、散剂、胶囊、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴剂等。这样的组合物可以含有药物制剂中的常规组分，例如，稀释剂、载体、ph调节剂、甜味剂、填充剂及其他活性剂。
[0160]
典型的制剂通过混合本发明的化合物和载体或赋形剂来制备。合适的载体和赋形剂是本领域技术人员公知的并详述于，例如，ansel，howardc.，等，ansel’s pharmaceutical dosage forms and drug delivery systems. philadelphia：lippincott，williams&wilkins，2004；gennaro，alfonso r.，等remington：the science and practice of pharmacy.philadelphia： lippincott，williams&wilkins，2000；和rowe，raymond c.handbook ofpharmaceutical excipients.chicago，pharmaceutical press，2005中。制剂还可以包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂(opaquing agent)、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、增味剂、稀释剂及其他已知添加剂，以提供药物(即，本发明的化合物或其药物组合物)的精致呈现或协助制备药物产品(即，药品)。
[0161]
本发明因此还涉及：
[0162]
式(i)的化合物，其用作治疗活性物质；
[0163]
一种药物组合物，其包含式(i)的化合物和治疗惰性载体；
[0164]
式(i)的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗或预防疼痛、神经性疼痛、动脉粥样硬化、老年性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、青光眼、糖尿病、炎症、炎性肠病、缺血再灌注损伤、急性肝功能衰竭、肝纤维化、肺纤维化、肾纤维化、系统性纤维化、急性同种异体移植排斥、慢性同种异体移植肾病、糖尿病性肾病、肾小球性肾病、心肌病、心力衰竭、心肌缺血/梗死、系统性硬化病、热伤、烧伤、增生性瘢痕、瘢痕瘤、牙龈炎发热、肝硬化或肿瘤、骨量调节、神经变性、卒中、暂时性局部缺血发作、葡萄膜炎、哮喘、骨质疏松、精神疾
病、精神病、肿瘤、脑炎、疟疾、变态反应、免疫性病症、关节炎、胃肠道病症、类风湿性关节炎或变态反应；
[0165]
一种式(i)的化合物，其用于治疗或预防疼痛、神经性疼痛、动脉粥样硬化、老年性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、青光眼、糖尿病、炎症、炎性肠病、缺血再灌注损伤、急性肝功能衰竭、肝纤维化、肺纤维化、肾纤维化、系统性纤维化、急性同种异体移植排斥、慢性同种异体移植肾病、糖尿病性肾病、肾小球性肾病、心肌病、心力衰竭、心肌缺血/梗死、系统性硬化病、热伤、烧伤、增生性瘢痕、瘢痕瘤、牙龈炎发热、肝硬化或肿瘤、骨量调节、神经变性、卒中、暂时性局部缺血发作、葡萄膜炎、哮喘、骨质疏松、精神疾病、精神病、肿瘤、脑炎、疟疾、变态反应、免疫性病症、关节炎、胃肠道病症、类风湿性关节炎或变态反应；
[0166]
一种用于治疗或预防疼痛、神经性疼痛、动脉粥样硬化、老年性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、青光眼、糖尿病、炎症、炎性肠病、缺血再灌注损伤、急性肝功能衰竭、肝纤维化、肺纤维化、肾纤维化、系统性纤维化、急性同种异体移植排斥、慢性同种异体移植肾病、糖尿病性肾病、肾小球性肾病、心肌病、心力衰竭、心肌缺血/梗死、系统性硬化病、热伤、烧伤、增生性瘢痕、瘢痕瘤、牙龈炎发热、肝硬化或肿瘤、骨量调节、神经变性、卒中、暂时性局部缺血发作、葡萄膜炎、哮喘、骨质疏松、精神疾病、精神病、肿瘤、脑炎、疟疾、变态反应、免疫性病症、关节炎、胃肠道病症、类风湿性关节炎或变态反应的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的式(i)的化合物；和
[0167]
式(i)的化合物用于对cb2受体进行检测或成像的用途。
[0168]
现在将利用以下实施例描述本发明，所述实施例不具有限制特性。
实施例
[0169]
缩写
[0170]
ms＝质谱；can＝硝酸高铈铵；can＝化学文摘服务编号；ac＝乙酰基；diea＝n，n-二异丙基乙胺；dbu＝1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯； dmf＝二甲基甲酰胺；hplc＝lc＝高效液相色谱；hrms＝高分辨率质谱；mecn＝乙腈；nbs＝n-溴代琥珀酰亚胺；ncs＝n-氯代琥珀酰亚胺； nmr数据以相对于内部四甲基硅烷以百万分一为单位(δ)报告，并且参比来自样品溶剂(d
6-dmso，除非另有说明)的氘锁场信号；偶合常数(j)以赫兹(hertz)记；thf＝四氢呋喃；tfa＝三氟乙酸；dcm＝二氯甲烷。
[0171]
实施例1
[0172]
2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯磺酰氟
[0173]
[0174]
a)2-(溴甲基)苯-1-磺酰氟
[0175][0176]
将苯基甲基磺酰氟(cas 444-31-5，350mg，2.01mmol，1当量)、nbs (429mg，2.41mmol，1.2当量)和aibn(33mg，0.20mmol，0.1当量)在 mecn(2.00ml)中的混合物回流过夜。将溶剂除去并加入甲苯(5ml)。悬浮液用硅藻土(celite)过滤(用另外的甲苯漂洗)并将滤液浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的1.5％etoac)得到2-(溴甲基)苯-1-磺酰氟(407 mg，1.6mmol，80％收率)，为无色固体。hrms(ei+)251.9251(m+)。
[0177]
b)2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟
[0178]
在室温，将(3s)-1-(5-叔丁基-3h-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇 (cas 1433946-74-7，50mg，0.19mmol，1.0当量)和2-(溴甲基)苯-1-磺酰氟(53mg，0.21mmol，1.1当量)溶解于dmf(1.0ml)中。然后加入net3(40 μl，0.29mmol，1.5当量)并将反应混合物搅拌1h。将混合物用etoac(20 ml)稀释，用5％licl水溶液(2x2ml)和盐水(1x5ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(etoac/己烷/acoh 5∶5∶1)得到 2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(23mg，0.053mmol，28％收率)，为无色油状物。hrms(esi+)435.1607 (m+h
+
)。
[0179]
实施例2
[0180]
(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基]甲基}苯基)甲磺酰氟
[0181][0182]
a)邻甲苯基甲磺酰氟
[0183][0184]
将1-(氯甲基)-2-甲基苯(cas 552-45-4，3.35g，23.8mmol，1.00当量) 和硫脲(1.81g，23.8mmol，1.00当量)与etoh(24ml)合并并回流1h。将溶剂除去以留下无色固体。加入mecn(34.3ml)和hcl水溶液(2m， 6.9ml)并将其搅拌直至大多数固体溶解。然后以使得温度不上升高于 23℃(内部温度，用冰浴冷却)的速率分部分加入ncs(12.7g，95.1mmol， 4当量)。在添加完成之后，将冷却浴移除并将黄色混合物搅拌30分钟。然后将其倒入含有水(100ml)的加料漏斗中，在乙醚辅助下对转移进行定量。然后水相用二乙醚(3x50ml)萃取。合并的有机物用饱和nahco3水溶液(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩，得
到5.84 g的粗制物料，将其溶解于丙酮∶水的3∶1混合物(100ml)中。加入氟化钾 (2.77g，47.6mmol，2当量)。在搅拌过夜之后，混合物用水(300ml)稀释并用乙醚(3x 100ml)萃取。合并的有机物用饱和nahco3水溶液(30ml)、水(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的5％etoac)得到邻甲苯基甲磺酰氟(2.04g，10.8 mmol，45.5％收率)，为无色油状物，过夜固化。hrms(ei+)188.0303(m
+
)。
[0185]
b)(2-(溴甲基)苯基)甲磺酰氟
[0186][0187]
将邻甲苯基甲磺酰氟(188mg，1.00mmol，1当量)、nbs(196mg，1.10 mmol，1.1当量)和过氧化苯甲酰(32.3mg，0.10mmol，0.1当量)与ccl
4 (5.00ml)合并并回流3h。溶剂除去和二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的15％ch2cl2)得到(2-(溴甲基)苯基)甲磺酰氟，为无色固体(213mg， 0.750mmol，纯度94％(6％起始物料)，71％收率)。hrms(ei+)265.9410 (m
+
)。
[0188]
c)(2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基]甲基}苯基)甲磺酰氟
[0189]
以类似于对于合成2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(实施例1，步骤b)所述的程序，由5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶 (cas 1438465-59-8，50mg，0.18mmol)和(2-(溴甲基)苯基)甲磺酰氟制备标题化合物并分离，为无色油状物(15mg，0.032mmol，18％收率)。hrms (esi+)469.1624(m+h
+
)。
[0190]
实施例3
[0191]
[2-({5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基}甲基)苯基]甲磺酰氟
[0192][0193]
以类似于对于合成2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(实施例1，步骤b)所述的程序，由(3s)-1-(5
‑ꢀ
叔丁基-3h-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇(cas 1433946-74-7，55 mg，0.21mmol，1.0当量)和(2-(溴甲基)苯基)甲磺酰氟制备标题化合物并分离，为无色油状物(31mg，0.069mmol，33％收率)。hrms(esi+)449.1767 (m+h
+
)。
[0194]
实施例4
[0195]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0196][0197]
a)1-(叠氮基甲基)-2-(氯甲基)苯
[0198][0199]
将邻二氯甲基苯(cas 612-12-4，3.23g，18.4mmol，1.00当量)溶解于dmso(18.4ml)中并加入nan3(1.20g，18.4mmol，1.00当量)。在2h 之后，将反应混合物用水(200ml)稀释并用etoac(3x70ml)萃取。有机相用盐水(2x20ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的重复急骤色谱法(在己烷中的2％etoac)得到1-(叠氮基甲基)-2-(氯甲基)苯 (520mg，2.86mmol，15.5％收率)，为无色油状物。1h nmr(400mhz，cdcl3) δ＝7.48-7.32(m，4h)，4.68(s，2h)，4.53(s，2h)。
13
c nmr(101mhz， cdcl3)δ＝136.0，134.3，130.8，130.2，129.4，129.2，52.1，43.6。
[0200]
b)1-(氯甲基)-2-(异硫氰基甲基)苯
[0201][0202]
在室温，将1-(叠氮基甲基)-2-(氯甲基)苯(421mg，2.32mmol，1.00 当量)和三苯基膦(669mg，2.55mmol，1.10当量)溶解于chcl3(4.65ml) 中。加入cs2(1.19ml，19.7mmol，8.50mmol)并将其搅拌1h。将混合物直接经过二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的2％etoac)，得到1-(氯甲基)-2-(异硫氰基甲基)苯(114mg，0.577mmol，24.9％收率)，为无色油状物。 hrms(ei+)197.0054(m
+
)。
[0203]
c)5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0204]
以类似于对于合成2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(实施例1，步骤b)所述的程序，由5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶 (cas 1438465-59-8，56mg，0.20mmol)和1-(氯甲基)-2-(异硫氰基甲基)苯制备标题化合物并分离，为无色油状物(37mg，0.083mmol，42％收率)。 hrms(esi+)444.1772(m+h
+
)。
[0205]
实施例5
[0206]
(3s)-1-(5-叔丁基-3-{[2-(异硫氰基甲基)苯基]甲基}-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇
[0207][0208]
以类似于对于合成2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(实施例1，步骤b)所述的程序，由(3s)-1-(5
‑ꢀ
叔丁基-3h-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇(cas 1433946-74-7，57 mg，0.22mmol，1.0当量)和1-(氯甲基)-2-(异硫氰基甲基)苯制备标题化合物并分离，为无色油状物(45mg，0.106mmol，49％收率)。hrms(esi+) 424.1916(m+h
+
)。
[0209]
实施例6
[0210]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[(2-异硫氰基苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0211][0212]
以类似于对于合成2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(实施例1，步骤b)所述的程序，由5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶 (cas 1438465-59-8，45mg，0.16mmol)和1-溴甲基-2-异硫氰基苯(cas108288-40-0)制备标题化合物并分离，为无色油状物(20mg，0.047mmol， 29％收率)。hrms(esi+)430.1621(m+h
+
)。
[0213]
实施例7
[0214]
2-{[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3
‑ꢀ
基]甲基}苯-1-磺酰氟
[0215]
[0216]
以类似于对于合成2-[[5-叔丁基-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟(实施例1，步骤b)所述的程序，由5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶 (cas 1438465-59-8，60mg，0.21mmol)和2-(溴甲基)苯-1-磺酰氟制备标题化合物并分离，为无色油状物(33mg，0.072mmol，34％收率)。hrms(esi+) 455.1470(m+h
+
)。
[0217]
实施例8
[0218]
1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇
[0219][0220]
a)1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯
[0221][0222]
将1-[5-叔丁基-3-(2-氯-苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基]-吡咯烷-3-醇(cas 1433362-08-3，154mg，0.398mmol，1.00当量)和net3(111μl， 0.796mmol，2.00当量)溶解于ch2cl2(1.80ml)中并冷却至0℃。然后加入作为在ch2cl2(0.40ml)中的溶液的mscl(62μl，0.80mmol，2.0当量)。在40min之后，将反应混合物用水稀释并用ch2cl2萃取。将合并的有机物浓缩并使剩余物经过二氧化硅上的急骤色谱法(在ch2cl2中的5％ etoac)，得到1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7
‑ꢀ
基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(170mg，0.366mmol，92％收率)，为无色油状物。 hrms(esi+)465.1469(m+h
+
)。
[0223]
b)s-(1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯
[0224][0225]
将1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(361mg，0.776mmol，1.00当量)溶解于dmf(7.76ml) 中，加入硫代乙酸钾(887mg，7.76mmol，10.0当量)并将其在50℃搅拌 2h。在冷却至室温之后，将混合物用水稀释并用etoac萃取。有机物用稀nahco3水溶液和盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(梯度，在己烷中的10％至20％etoac)得到s-(1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯(345mg，0.735mmol，95％收率)，为无色固体。hrms(esi+)445.1579 (m+h
+
)。
[0226]
c)1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基} 吡咯烷-3-硫醇
[0227]
将s-(1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯(109mg，0.245mmol，1.00当量)溶解于meoh和 thf的1∶1混合物(2.40ml)中。加入k2co3(203mg，1.47mmol，6当量) 并将其搅拌15min。将反应混合物用水稀释(50ml)并用etoac(3x20ml) 萃取。有机物用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(ch2cl2∶己烷∶meoh 50∶50∶1)得到1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇(86mg，0.21mmol， 87％收率)，为无色油状物。hrms(esi+)403.1468(m+h
+
)。
[0228]
实施例9
[0229]
1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}氮杂环丁烷-3-硫醇
[0230][0231]
将5-(叔丁基)-7-氯-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(cas 1433362-85-6，20mg，59.5μmol)、氮杂环丁烷-3-硫醇盐酸盐(cas 179337-60-1，11.2mg，89.2μmol)和dipea(23.1mg，30.5μl，178μmol) 在乙腈(3ml)中的悬浮液在环境温度搅拌18h。在减压下将溶剂除去并将剩余物通过制备型tlc(硅胶，2.0mm，3∶1庚烷∶etoac)纯化，得到标题化合物(11mg，48％)，为无色半固体油状物。hrms(esi+)389.1297 (m+h
+
)。
[0232]
实施例10
[0233]
(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇或对映体
[0234][0235]
a)3-((5-(叔丁基)-7-氯-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)-4-甲基
ꢀ‑
1，2，5-二唑
[0236][0237]
将5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7(4h)-酮(cas 1919022-49-3，235mg，0.812mmol，1.00当量) 和一滴的dmf溶解于ch2cl2(2.71ml)中。加入草酰氯(80μl，0，89mmol， 1.1当量)并将反应混合物在室温搅拌过夜。添加硅藻土并将溶剂除去。二氧化硅上的急骤色谱法(在ch2cl2的0.5％meoh)得到3-((5-(叔丁基)-7-氯
ꢀ‑
3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)-4-甲基-1，2，5-二唑(230mg， 0.757mmol，92％收率)，为无色固体。hrms(maldi+)308.1021(m
+
)。
[0238]
b)吡咯烷-3-基甲磺酸酯盐酸盐
[0239][0240]
将3-甲磺酰基氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(cas 141699-57-2，768mg， 2.89mmol，1.00当量)溶解于et2o(8.7ml)中并加入hcl(在二烷中的4 m，8.68ml，17.4mmol，6当量)。将混合物搅拌过夜，浓缩并且剩余物在没有进一步纯化下使用。
[0241]
c)1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯
[0242][0243]
在室温，将3-((5-(叔丁基)-7-氯-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)-4-甲基-1，2，5-二唑(300mg，0.98mmol，1.00当量)溶解于ch2cl
2 (4.87ml)中并加入吡咯烷-3-基甲磺酸酯盐酸盐(216mg，1.07mmol，1.10 当量)。然后加入net3(272μl，1.95mmol，2.00当量)并将其搅拌30分钟。加入硅藻土并将溶剂蒸发。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的50％ etoac)得到1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(426mg，0.89mmol，91％收率)，为无色油状物。hrms(esi+)437.1715(m+h
+
)。
[0244]
d)s-(1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯
[0245][0246]
将1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(147mg，0.337mmol，1.0当量)和硫代乙酸钾(385mg，3.37mmol，10.0当量)与dmf(1.8ml)合并并加热至 50℃持续2h。将反应混合物冷却至室温并用etoac(50ml)稀释。有机相用水(10ml)、5％licl水溶液(10ml)和盐水(10ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的15％etoac)得到 s-(1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯(107mg，0.257mmol，76％收率)。 hrms(esi+)417.1813(m+h
+
)。
[0247]
e)s-[(3s)-1-[5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]三唑并[4，5-d] 嘧啶-7-基]吡咯烷-3-基]硫代乙酸酯
[0248][0249]
使外消旋s-(1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯(107mg， 0.257mmol)经过通过手性hplc的分离，得到标题化合物(25mg，0.06 mmol，23％)。
[0250]
f)(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇
[0251]
将s-[(3s)-1-[5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基]吡咯烷-3-基]硫代乙酸酯(25mg，0.06mmol)和k2co
3 (45.6mg，330μmol)在thf(3ml)、水(1ml)和甲醇(1ml)中的混合物在环境温度搅拌72h。将反应混合物倒入水(30ml)中并用etoac(2x30ml) 萃取。合并的萃取液用水/盐水(1∶1)洗涤，用na2so4干燥并在减压下浓缩。粗制物料通过制备型tlc(硅胶，1.0mm，1∶1庚烷/etoac)纯化，得到标题化合物(12mg，52％收率)，为无色固体。ms(esi)：m/z＝374.1[m]
+
[0252]
实施例11
[0253]
(3r)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇或对映体
[0254][0255]
a)s-[(3r)-1-[5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基]吡咯烷-3-基]硫代乙酸酯
[0256]
[0257]
使外消旋s-(1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯(107mg， 0.257mm0l)经过通过手性hplc的分离，得到标题化合物(33mg，0.08 mmol，31％)。
[0258]
b)(3r)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇
[0259]
以类似于在实施例10(步骤f)中所述的程序，将s-[(3r)-1-[5-叔丁基
ꢀ‑
3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基]吡咯烷-3-基]硫代乙酸酯水解，获得标题化合物(14mg，61％)，为无色固体。ms(esi)：m/z ＝374.1[m]
+
[0260]
实施例12
[0261]
(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7
‑ꢀ
基}吡咯烷-3-硫醇或对映体
[0262][0263]
以类似于对于合成(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇(实施例10，步骤a， c-f)所述的程序，由5-叔丁基-7-氯-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(cas 1433362-85-6)制备标题化合物(11mg，60％)，为无色固体。1h nmr (300mhz，cdcl3)δ＝1.20-1.32(m，1h)1.36(s，9h)2.17-2.50(m，2h) 3.87-4.20(m，2h)4.25-4.61(m，2h)5.86(s，2h)7.14-7.25(m，3h)7.38
ꢀ‑
7.41(m，1h)。
[0264]
实施例13
[0265]
(3r)-1-{5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7
‑ꢀ
基}吡咯烷-3-硫醇或对映体
[0266][0267]
以类似于对于合成(3s)-1-{5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基}吡咯烷-3-硫醇(实施例10，步骤c-f) 所述的程序，由5-叔丁基-7-氯-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶 (cas 1433362-85-6)制
备标题化合物(12mg，60％)，为无色固体。1h nmr (300mhz，cdcl3)δ＝1.21-1.32(m，1h)1.36(s，9h)2.19-2.39(m，2h) 3.87-4.22(m，2h)4.27-4.61(m，2h)5.86(s，2h)7.13-7.25(m，3h)7.38
ꢀ‑
7.40(m，1h)。
[0268]
实施例14
[0269]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0270][0271]
将1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(194mg，0.444mmol，1.00当量)溶解于dmf(3.70ml)中并加入nan3(144mg，2.22mmol，5当量)。将反应混合物在90℃搅拌1h。在冷却至室温之后，将混合物用水稀释并用etoac 萃取。合并的有机物用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的20％etoac)得到7-(3-叠氮基吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d] 嘧啶(153mg，0.399mmol，90％收率)，为无色油状物。hrms(esi+) 384.2005(m+h+)。
[0272]
实施例15
[0273]
5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0274][0275]
a)1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-胺
[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(33mg，0.083mmol，63％收率)，为无色油状物。hrms(esi+) 400.1665(m+h
+
)。
[0284]
实施例17
[0285]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(2-氯苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0286][0287]
以类似于对于合成7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基
ꢀ‑
1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例14)所述的程序，由1-(5-(叔丁基)-3-(2-氯苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯制备标题化合物并分离，为无色油状物。hrms(esi+) 412.1763(m+h
+
)。
[0288]
实施例18
[0289]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-[3-(甲基二硫基)吡咯烷-1-基]-3-[(4-甲基
ꢀ‑
1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0290][0291]
a)5-氨基-1-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺
[0292][0293]
将5-氨基-1-(2-氯苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(cas 93444-91-8，2.01 g，15.2mmol，1.0当量)和dipea(0.27ml，1.52mmol，0.1当量)溶解于 dmso(9.7ml)中并分部分加入nan3(1.04g，15.9mmol，1.05当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜。在第二反应容器中，将氰基乙酰胺(1.91g， 22.8mmol，1.5当量)溶解于dmso(7.8ml)和水(1.2ml)中。然后缓慢地加入32％naoh水溶液(1.4ml，15.2ml，1.0当量)(放热)并将混合物搅拌15min。缓慢地
加入之前制备的有机叠氮化物溶液(放热)并将反应混合物在室温搅拌过夜。缓慢地加入水(20ml)(放热)。将所得的悬浮液冷却至 0℃并搅拌1h。过滤(用水洗涤，2x 5ml)并干燥，得到5-氨基-1-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(2.0g，9.0mmol，59％收率)，为米黄色固体。
[0294]
b)5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3] 三唑并[4，5-d]嘧啶-7(4h)-酮
[0295][0296]
将5-氨基-1-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺 (1.50g，6.72mmol，1.00当量)、2，2-二氟-2-苯基乙腈(1.60g，10.5mmol， 1.56当量)和k2co3(4.64g，33.6mmol，5.00当量)与dmf(19.2ml)合并并加热至90℃过夜。将反应混合物冷却至室温并倒入冰水中。加入hcl 水溶液(1m)直至ph＝3并将其用etoac(3x 100ml)萃取。合并的有机物用5％licl水溶液和盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩以留下褐色油状物。剩余物用2-proh捣碎并过滤，得到浅黄色固体(1.45g)。将滤液浓缩并在二氧化硅上进行色谱(ch2cl2∶丙酮9∶1+1％meoh)。将含产物的级分合并，浓缩并将剩余物用2-proh再次捣碎，得到另一批的5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
7(4h)-酮(合并后为1.72g，4.79mmol，71％收率)。hrms(esi+)360.1015 (m+h+)。
[0297]
c)3-((7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)-4-甲基-1，2，5-二唑
[0298][0299]
将5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3] 三唑并[4，5-d]嘧啶-7(4h)-酮(112mg，0.237mmol，1.00当量)溶解于ch2cl
2 (790μl)中并加入一滴dmf。逐滴加入草酰氯(42μl，0.474mmol，2.00 当量)并将混合物加热至回流达1.5h。将反应混合物冷却至室温并用 etoac(30ml)稀释。有机相用水和盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的20％etoac)得到3-((7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)-4-甲基-1，2，5-二唑(80mg，0.21mmol，89％收率)，为无色油状物。hrms(esi+)378.0677 (m+h
+
)。
[0300]
d)1-(5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3] 三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯
[0301][0302]
将3-((7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)-4-甲基-1，2，5-二唑(151mg，0.401mmol，1.00当量)与吡咯烷-3-基甲磺酸酯盐酸盐(97mg，0.48mmol，1.2当量)和ch2cl2(1.34ml)合并。加入net3(112μl，0.802mmol，2.00当量)并将混合物搅拌30分钟。加入硅藻土并将溶剂除去。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的50％etoac)得到1-(5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(165mg，0.326mmol，81％收率)。hrms(esi+)507.1374(m+h+)。
[0303]
e)s-(1-(5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯
[0304][0305]
以类似于对于合成s-(1-(5-(叔丁基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基)硫代乙酸酯(实施例10，步骤f)所述的程序，由1-(5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基) 甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(92mg， 0.182mmol)合成标题化合物并分离，为浅褐色蜡状物(80mg，0.164 mmol，91％收率)。1h nmr(300mhz，氯仿-d)δ＝7.70-7.62(m，2h)，7.42
ꢀ‑
7.35(m，3h)，5.90(s，2h)，4.61(dd，j＝12.2，6.2，0.5h)，4.34-4.08(m，3h)， 3.89(td，j＝7.0，2.9，1h)，3.76(dd，j＝12.5，4.7，0.5h)，2.63-2.39(m，1h)， 2.36(s，1.5h)，2.34(s，1.5h)，2.34(s，3h)，2.24-2.01(m，1h)，旋转异构体的混合物。
[0306]
f)1-(5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3] 三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-硫醇
g)所述的程序，由5-氨基-1-(2-氯苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(cas 93444-91-8)制备标题化合物并分离，为无色油状物。hrms(esi+) 519.0995(m+h+)。
[0315]
实施例20
[0316]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-[二氟(苯基)甲基]-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑
ꢀ‑
3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0317][0318]
以类似于对于合成7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基
ꢀ‑
1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例14)所述的程序，由1-(5-(二氟(苯基)甲基)-3-((4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基)-3h-[1，2，3] 三唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(66mg，0.13mmol，1.0当量) 制备标题化合物并分离，为无色固体(54mg，0.12mmol，91％收率)。hrms (esi+)454.1661(m+h
+
)。
[0319]
实施例21
[0320]
7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0321][0322]
以类似于对于合成7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-叔丁基-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例14)所述的程序，由1-(3-(2-氯苄基)-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7
‑ꢀ
基)吡咯烷-3-基甲磺酸酯(64mg，0.12mmol，1.0当量)制备标题化合物并分离，为无色固体(47mg，0.098mmol，82％收率)。hrms(esi+)482.1412 (m+h+)。
[0323]
实施例22
[0324]
3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0325][0326]
将7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(31mg，0.064mmol，1.0当量)和cs2(39 μl，0.64mmol，10当量)溶解于thf(322μl)中并加入pph3(20mg，0.77 mmol，1.2当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜。加入硅藻土并将溶剂除去。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的25％etoac)得到3-[(2-氯苯基) 甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶(16mg，0.032mmol，50％收率)，为无色油状物。hrms(esi+) 498.1069(m+h
+
)。
[0327]
实施例23
[0328]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基)甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0329][0330]
以类似于对于合成3-[(2-氯苯基)甲基]-5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3-异硫氰基吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例22)所述的程序，由 7-(3-叠氮基吡咯烷-1-基)-5-[二氟(苯基)甲基]-3-[(4-甲基-1，2，5-二唑-3-基) 甲基]-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(39mg，0.086mmol，1.0当量)制备标题化合物并分离，为无色油状物(18mg，0.038mmol，45％收率)。hrms(esi+) 470.1314(m+h
+
)。
[0331]
实施例24
[0332]
2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
3-基]甲基]苯磺酰氟
[0333][0334]
a)5-氨基-1-(2-(苄硫基)苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺
[0335][0336]
以类似于对于5-氨基-1-(2-乙烯基苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(实施例27，步骤a)所述的程序，由邻苄基巯基苄氯(cas 4521-46-4，3.39g， 13.6mmol，1.00当量)、叠氮化钠(930mg，14.3mmol，1.05当量)和2-氰基乙酰胺(1.72g，20.4mmol，1.50当量)制备标题化合物并分离，为无色固体(4.03g，11.9mmol，87％)。hrms(esi+)362.1051(m+na
+
)。
[0337]
b)3-(2-(苄硫基)苄基)-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7(4h)-酮
[0338][0339]
将5-氨基-1-(2-(苄硫基)苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(679mg，2.00 mmol，1.00当量)与dmf(4ml)、2，2-二氟-2-苯基乙腈(459mg，3.00mmol， 1.50当量)和k2co3(1.38g，10.0mmol，5.00当量)合并并加热至90℃过夜。在冷却至室温之后，加入水。过滤沉淀，得到不纯的物料。通过二氧化硅上的急骤色谱法(在甲苯中的20％丙酮)的进一步纯化，得到标题化合物，为黄色固体(406mg，0.854mmol，43％)。hrms(esi+)479.1347 (m+h
+
)。
[0340]
c)2-((7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基) 苯-1-磺酰氟
[0341]
[0342]
将3-(2-(苄硫基)苄基)-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7(4h)-酮(150mg，0.315mmol，1.00当量)与mecn(6.4ml)、acoh (80μl)和水(0.16ml)合并并冷却至-13℃(冰水nacl，外部温度)。加入1，3
‑ꢀ
二氯-5，5-二甲基乙内酰脲(124mg，0.631mmol，2.00当量)并将其在相同温度下搅拌1.5h。然后将反应混合物用ch2cl2(100ml)稀释，用盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。将粗制物料溶解于丙酮(1.0ml)和水(50 μl)的混合物中。在室温加入氟化钾(92mg，1.6mmol，5.0当量)并将其搅拌过夜。反应混合物用ch2cl2(100ml)稀释，过滤，用mgso4干燥，再次过滤并浓缩。将剩余物再溶解于ch2cl2(1.6ml)中。加入dmf(25μl， 0.32mmol，1.0当量)，接着加入草酰氯(56μl，0.63mmol，2.0当量)。将反应混合物在回流下搅拌过夜。当tlc分析指示不完全转化时，加入另一部分的草酰氯(56μl，0.63mmol，2.0当量)并在回流下继续搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，用etoac(100ml)稀释，用半饱和碳酸氢钠水溶液、5％licl水溶液和盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac至15％至20％)得到标题化合物，为黄色油状物(48mg，0.11mmol，3个步骤后为33％)。hrms(esi+) 454.0352(m+h
+
)。
[0343]
d)2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯磺酰氟
[0344][0345]
将2-((7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基) 苯-1-磺酰氟(20mg，0.044mmol，1.0当量)与(s)-吡咯烷-3-醇(4.2mg，0.048 mmol，1.1当量)和ch2cl2(0.2ml)合并。加入三乙胺(9.2μl，0.066mmol， 1.5当量)。在室温下30min之后，将反应混合物用etoac(50ml)稀释，用5％licl水溶液和盐水(2x)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的50％etoac)得到标题化合物，为无色油状物(16mg，0.032mmol，72％)。hrms(esi+)505.1261(m+h
+
)。
[0346]
实施例25
[0347]
2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]甲基二硫基]乙醇
[0348][0349]
a)s-2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苄基苯甲酸硫醇酯(benzothioate)
[0350][0351]
将s-2-(碘甲基)苄基苯甲酸硫醇酯(160mg，0.435mmol，1.05当量) 和5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶 (cas 1438465-59-8，117mg，0.414mmol，1.00当量)溶解于dmf(0.8ml) 中。加入net3(87μl，0.62mmol，1.5当量)并将其在室温搅拌过夜。反应混合物用etoac(80ml)稀释，用5％licl水溶液(3x 10ml)、盐水(10ml) 洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的5％etoac至20％)得到标题化合物，为无色油状物(90mg，0.172mmol， 42％)。hrms(esi+)523.2083(m+h+)。
[0352]
b)2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]甲基二硫基]乙醇
[0353]
将s-2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d] 嘧啶-3-基)甲基)苄基苯甲酸硫醇酯(34mg，0.065mmol，1.0当量)溶解于 meoh(1ml)和thf(0.8ml)的混合物中。加入k2co3(45mg，0.33mmol， 5.0当量)并对其进行搅拌直至tlc指示起始物料完全转化。然后混合物用 etoac(50ml)稀释，用hcl水溶液(0.5m)、水和盐水(各自10ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。在-78℃将剩余物溶解于ch2cl2(0.2ml) 中并加入苯并三唑(7.7mg，0.065mmol，1.0当量)和1-氯苯并三唑(15mg， 0.095mmol，1.5当量)在ch2cl2(0.65ml)中的溶液。将溶液温热至-20℃并在该温度保持20min。加入巯基乙醇在ch2cl2中的溶液(0.5m，0.21ml， 0.11mmol，1.6当量)。将溶液在-20℃保持30min。通过添加硫代硫酸钠
·
5h2o(16mg，0.065mmol，1.0当量)在水(0.4ml)和饱和碳酸氢钠溶液 (0.4ml)中的溶液来猝灭反应并将其在0℃搅拌10min。加入水(5ml)并且将水相用ch2cl2(3x2ml)萃取。合并的有机物用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的5％etoac至25％)
得到被苯并三唑污染的产物。二氧化硅上的第二次急骤色谱法(在ch2cl2中的7.5％ etoac)得到标题化合物，为无色油状物(7.0mg，0.014mmol，两个步骤后为22％)。hrms(esi+)495.1808(m+h
+
)。
[0354]
实施例26
[0355]
2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3
‑ꢀ
基]甲基]苯磺酰氟
[0356][0357]
将2-((7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基) 苯-1-磺酰氟(10mg，0.022mmol，1.0当量)和3，3-二氟吡咯烷盐酸盐(3.3 mg，0.023mmol，1.05当量)与ch2cl2(0.1ml)合并。加入三乙胺(7μl， 0.46mmol，2.1当量)。在30min之后，将混合物直接经过急骤色谱法，得到标题化合物，为无色泡沫(10mg，0.019mmol，87％)。
[0358]
实施例27
[0359]
5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0360][0361]
a)5-氨基-1-(2-乙烯基苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺
[0362][0363]
在室温，将叠氮化钠(0.852g，13.1mmol，1.05当量)分部分加入氯甲基苯乙烯(cas 22570-84-9，1.91g，12.5mmol，1.00当量)和dipea(0.22 ml，1.3mmol，0.10当量)在dmso
(12.5ml)中的溶液中并搅拌1.5h。然后将悬浮液转移至2-氰基乙酰胺(1.58g，18.7mmol，1.50当量)和20％aq. naoh(2.25ml，12.5mmol，1.00当量)在dmso(12.5ml)中的溶液并将所得混合物在室温搅拌3.5h。在用冰浴冷却的同时加入水(100ml)。在 20min之后，对悬浮液进行过滤。滤饼用水(3x40ml)、etoh(2x20ml) 和二乙醚(2x20ml)洗涤，得到标题化合物，为无色固体(2.23g，9.15mmol， 73％)。1h nmr(300mhz，丙酮-d6)δ7.63-7.56(m，1h)，7.38-7.23(m， 2h)，7.17(dd，j＝17.3，11.0hz，1h)，7.02(s，1h)，6.90-6.81(m，1h)，6.41(s， 1h)，5.97(s，2h)，5.75(dd，j＝17.3，1.4hz，1h)，5.54(s，2h)，5.38(dd，j＝ 11.1，1.3hz，1h)。
[0364]
b)5-(二氟(苯基)甲基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
ꢀ‑
7(4h)-酮
[0365][0366]
将2，2-二氟-2-苯基乙腈(629mg，4.11mmol，2.00当量)和k2co3(1.42 g，10.3mmol，5.00当量)加入5-氨基-1-(2-乙烯基苄基)-1h-1，2，3-三唑-4
‑ꢀ
甲酰胺(500mg，2.06mmol，1.00当量)在dmf(6.9ml)中的溶液。将烧瓶盖上盖并置于预加热至80℃的油浴中。在3h之后，加入另外的2，2-二氟-2-苯基乙腈(157mg，1.03mmol，0.50当量)并将混合物在80℃搅拌过夜。在冷却至室温之后，加入水(10ml)和2m hcl水溶液(5.2ml)。将所得的悬浮液搅拌20min然后过滤。滤饼用水(30ml)、etoh(30ml)和乙醚(30ml)洗涤，并干燥，得到标题化合物，为无色固体(357mg，0.941 mmol，46％)。hrms(esi+)380.1319(m+h+)。
[0367]
c)7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d] 嘧啶
[0368][0369]
将pocl3(0.36ml，3.9mmol，2.0当量)加入5-(二氟(苯基)甲基)-3-(2
‑ꢀ
乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-7(4h)-酮(0.74g，2.0mmol，1.0 当量)和dmf(cat.)在甲苯(14.8ml)和mecn(14.8ml)的混合物中的溶液。将所得的混合物在80℃搅拌6h。加入另外的pocl3(0.37ml，4.0mmol， 1.0当量)并将混合物在80℃搅拌过夜。在冷却至室温之后，加入etoac (80ml)。溶液用水(30ml)和盐水(30ml)洗涤。有机物用mgso4干燥并且过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac)得到标题化合物(617mg，1.55mmol，80％)，为黄色固体。hrms(esi+)398.0986 (m+h+)。
[0370]
d)5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0371][0372]
将三乙胺(70μl，0.50mmol，2.5当量)加入7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(80mg，0.20mmol，1.0 当量)和3，3-二氟吡咯烷盐酸盐(35mg，0.24mmol，1.2当量)在ch2cl2(2ml) 中的混合物。将所得的混合物在室温搅拌过夜。将挥发物移除并使剩余物经过二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac)，得到标题化合物 (91mg，0.19mmol，97％)，为无色油状物。hrms(esi+)469.1758(m+h+)。
[0373]
e)s-2-((5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯乙基硫代乙酸酯
[0374][0375]
将5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(20mg，0.043mmol，1.0当量)与dmf (0.7ml)、硫代乙酸(0.012ml，0.17mmol，4.0当量)和bi2o3(0.2mg，0.4 μmol，0.01当量)合并并将混合物用氮气冲洗。加入brccl3(0.4μl，4μmol， 0.1当量)并将混合物用家用灯泡(15w)辐照过夜。在加入etoac和水之后，分离各个层。有机层用5％licl水溶液和盐水洗涤。有机物用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10-40％etoac)得到标题化合物(10mg，0.018mmol，43％)。hrms(esi+)567.1549(m+na
+
)。
[0376]
f)2-(2-((5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇
[0377][0378]
将k2co3(37mg，0.26mmol，2.0当量)加入s-2-((5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯乙基硫代乙酸酯(72mg，0.13mmol，1.0当量)在meoh(1.0ml)和thf (0.2ml)的混合物中的溶液。将所得的反应混合物搅拌24h。加入etoac (30ml)。有机物用2m hcl水溶液(20ml)、水(20ml)和盐水(20ml)洗涤。在用mgso4干燥并过滤之后，将溶剂除去，得到标题化合物(64mg，0.13 mmol，96％)，将其以原样用于后续反应。
[0379]
g)5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0380]
在-78℃，将2-(2-((5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(20mg，0.040 mmol，1.0当量)加入1-氯苯并三唑(9.2mg，0.060mmol，1.5当量)和苯并三唑(4.7mg，0.040mmol，1.0当量)在ch2cl2(0.4ml)中的溶液并在-20℃搅拌1h。在-20℃加入吡啶-2-硫醇(6.6mg，0.060mmol，1.5当量)并将混合物搅拌6h。混合物用na2s2o3水溶液和饱和nahco3水溶液猝灭。将有机层分离并且水相用ch2cl2(3x10ml)萃取。将合并的有机物浓缩并使剩余物经过制备型tlc(在己烷中的20％etoac)纯化，得到标题化合物 (6.5mg，0.001mmol，27％)，为无色油状物。hrms(esi+)612.1613 (m+h+)。
[0381]
实施例28
[0382]
2-[2-[2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇
[0383][0384]
将碘(30mg，0.12mmol，3.0当量)分部分地加入2-巯基乙醇(0.014ml， 0.20mmol，5.0当量)、吡啶(0.019ml，0.24mmol，6.0当量)和2-(2-((5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基) 甲基)苯基)乙硫醇(20mg，
0.040mmol，1.0当量)在ch2cl2(0.3ml)和 meoh(0.1ml)中的溶液。将所得的混合物在室温搅拌2h。加入etoac (20ml)并将溶液用盐水(10ml)洗涤。有机物用mgso4干燥，过滤并浓缩。制备型tlc(在ch2cl2中的5％etoac)得到标题化合物(9mg，0.02mmol， 39％)。hrms(esi+)579.1613(m+h
+
)。
[0385]
实施例29
[0386]
2-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇
[0387][0388]
a)5-(叔丁基)-7-氯-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0389][0390]
将5-氨基-1-(2-乙烯基苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(1.00g，4.11 mmol，1.00当量)溶解于二甲基乙酰胺(3.4ml)中。加入吡啶(0.499ml， 6.17mmol，1.50当量)和新戊酰氯(0.759ml，6.17mmol，1.50当量)。将所得的混合物在85℃搅拌5.5h，之后加入khco3(2.06g，20.6mmol， 5.00当量)。将温度升高至155℃并将其搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。加入水并将所得的悬浮液过滤。滤饼用乙醇和乙醚洗涤，并干燥，得到中间体三唑并嘧啶酮(1.22g)。将中间体与mecn(11.4ml)、pocl
3 (0.74ml，7.9mmol，2.0当量)和n，n-二乙基苯胺(0.63ml，4.0mmol，1.0 当量)合并。所得的混合物在80℃搅拌过夜。在冷却至室温之后，加入 etoac(80ml)。溶液用水(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac)得到标题化合物，为黄色固体(847mg，2.58mmol，两个步骤后为63％)。hrms(esi+) 328.1327(m+h
+
)。
[0391]
b)5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0392][0393]
将5-(叔丁基)-7-氯-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(847 mg，2.58mmol，1.00当量)和3，3-二氟吡咯烷盐酸盐(445mg，3.10mmol， 1.20当量)与ch2cl2(25ml)合并。加入三乙胺(0.90ml，6.5mmo1，2.5当量)并将所得的混合物在室温搅拌过夜。将挥发物移除并使剩余物经过二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac)，得到标题化合物，为无色油状物(968mg，2.43mmol，94％)。hrms(esi+)399.2101(esi+h
+
)。
[0394]
c)s-2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯乙基硫代乙酸酯
[0395][0396]
将aibn(21mg，0.13mmol，0.10当量)加入5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(500mg，1.26 mmol，1.0当量)和硫代乙酸(0.90ml，13mmol，10当量)在甲苯(5ml)中的溶液。将混合物用氮气吹洗10min并在回流温度下加热过夜。加入另外的aibn(21mg，0.13mmol，0.10当量)并将混合物回流另外的10h。在冷却至室温之后，加入etoac(100ml)。溶液用饱和碳酸氢钠水溶液(2x 40ml)和盐水(40ml)洗涤。有机物用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac)得到标题化合物(393mg，0.828 mmol，66％)。
[0397]
d)2-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d] 嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇
[0398][0399]
将s-2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d] 嘧啶-3-基)甲基)苯乙基硫代乙酸酯(100mg，0.211mmol，1.00当量)溶解于 meoh(4.0ml)和thf(1.0ml)中。加入k2co3(58mg，0.42mmol，2.0 当量)并将混合物搅拌过夜。加入etoac(40ml)并将溶液用2m hcl水溶液(20ml)、水(20ml)和盐水(20ml)洗涤。有机物用mgso4干燥，过滤并浓缩。粗制硫醇在未经进一步纯化下用于后续反应。
[0400]
e)2-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基] 甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇
[0401]
将碘(35mg，0.14mmol，3.0当量)分部分地加入2-巯基乙醇(0.016ml， 0.23mmol，5.0当量)、吡啶(0.022ml，0.28mmol，6.0当量)和2-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(20mg，0.046mmol，1.0当量)在ch2cl2(0.3ml)和meoh (0.1ml)中的溶液。将所得的混合物在室温搅拌8h。加入etoac(20ml) 并将溶液用盐水(10ml)洗涤。有机物用mgso4干燥，过滤并浓缩。制备型tlc(在ch2cl2中的5％etoac)得到标题化合物(4mg，0.008mmol， 17％)。hrms(esi+)509.1962(m+h+)。
[0402]
实施例30
[0403]
3-[[2-[2-(苯并三唑-1-基磺酰基)乙基]苯基]甲基]-5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶
[0404][0405]
在-78℃，将2-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(15mg，0.035mmol，1.0当量)加入在ch2cl2(0.3ml)中的n-氯苯并三唑(8.0mg，0.052mmol，1.5当量) 和苯并三唑(4.1mg，0.035mmol，1.0当量)并搅拌1h。然后在-20℃加入2-巯基乙醇(7μl，0.1mmol，1.5当量)并将混合物温热至室温。
通过加入 na2s2o3水溶液和饱和nahco3水溶液猝灭反应。分离各个相并且水相用 ch2cl2(3x10ml)萃取。合并的有机层在真空下浓缩并且使剩余物经过制备型tlc(在己烷中的20％etoac)，得到标题化合物(2mg，3μmol，10％)。 hrms(esi+)582.2206(m+h
+
)。
[0406]
实施例31
[0407]
2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]乙磺酰氟
[0408][0409]
在0℃，将n-氯代琥珀酰亚胺(20mg，0.15mmol，4.0当量)缓慢地加入s-2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯乙基硫代乙酸酯(18mg，0.037mmol，1.0当量)在mecn (0.6ml)和2m hcl水溶液(0.12ml，0.24mmol，6.5当量)的混合物中的溶液。将所得的溶液搅拌40min。加入etoac(20ml)和饱和nahco
3 (20ml)并分离各个层。有机相用盐水(20ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩，得到粗制磺酰氯，将其溶解于丙酮(0.5ml)和水(0.025ml)的混合物中。加入氟化钾(10mg，0.18mmol，5.0当量)并将混合物在室温搅拌 6.5h。加入etoac(20ml)。有机物用水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，用 mgso4干燥，过滤并浓缩。制备型tlc(在己烷中的20％etoac)得到标题化合物(9mg，0.02mmol，53％)。hrms(esi+)483.1780(m+h
+
)。
[0410]
实施例32
[0411]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶
[0412][0413]
以类似于对于合成5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例 27，步骤g)所述的程序，
由2-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(20mg，0.046 mmol，1.0当量)、吡啶-2-硫醇(26mg，0.23mmol，5.0当量)、碘(35mg， 0.14mmol，3.0当量)和吡啶(0.022ml，0.28mmol，6.0当量)在ch2cl
2 (0.3ml)中制备标题化合物并通过制备型tlc分离(6mg，0.01mmol， 24％)。hrms(esi+)542.1972(m+h
+
)。
[0414]
实施例33
[0415]
2-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙胺
[0416][0417]
以类似于对于合成5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例 27，步骤g)所述的程序，由2-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(30mg，0.069 mmol，1.0当量)、2-氨基乙硫醇(27mg，0.35mmol，5.0当量)、碘(53mg， 0.21mmol，3.0当量)和吡啶(0.034ml，0.42mmol，6.0当量)在ch2cl
2 (1.0ml)和meoh(0.3ml)中制备标题化合物并通过制备型tlc(在 ch2cl2中的20％meoh，1％net3)分离，为油状物(5.5mg，0.008mmol， 16％)。hrms(esi+)508.2118(m+h
+
)。
[0418]
实施例34
[0419]
2-[2-[2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙胺
[0420][0421]
以类似于对于合成5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-]
‑ꢀ
基)-3-[[2-[2-(吡啶-2-基二硫基)乙基]苯基]甲基]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例 27，步骤g)所述的程序，由2-(2-((5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]
嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(20mg，0.040 mmol，1.0当量)、2-氨基乙硫醇(15mg，0.20mmol，5.0当量)、碘(30mg， 0.12mmol，3.0当量)和吡啶(0.019ml，0.24mmol，6.0当量)在ch2cl
2 (0.5ml)和meoh(0.2ml)中制备标题化合物并通过制备型tlc(在 ch2cl2中的20％meoh，1％net3)分离，为油状物(4.5mg，0.008mmol， 20％)。hrms(esi+)578.1774(m+h
+
)。
[0422]
实施例35
[0423]
3-[2-[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]丙-1，2-二醇
[0424][0425]
以类似于对于合成2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并 [4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]甲基二硫基]乙醇(实施例25，步骤b)所述的程序，由s-2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d] 嘧啶-3-基)甲基)苄基苯甲酸硫醇酯(25mg，0.058mmol，1.0当量)和硫代甘油(9.4mg，0.087mmol，1.5当量)制备标题化合物并通过制备型tlc(在 ch2cl2中的40％etoac)分离，为无色油状物(22mg，0.041mmol，71％)。 hrms(esi+)539.2070(m+h
+
)。
[0426]
实施例36
[0427]
2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基] 苯基]二硫基]乙醇
[0428][0429]
a)5-氨基-1-(2-碘苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺
[0430][0431]
以类似于对于合成5-氨基-1-(2-乙烯基苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺 (实施例27，步骤a)所述的程序，由2-碘苄基甲磺酸酯(cas 183789-20-0， 6.67g，21.4mmol，1.00当量)制备标题化合物并分离，为无色固体(6.32g， 18.4mmol，86％)。hrms(esi+)344.0010(m+h+)。
[0432]
b)5-(叔丁基)-3-(2-碘苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-7(4h)-酮
[0433][0434]
将5-氨基-1-(2-碘苄基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(0.500g，1.46mmol， 1.00当量)溶解于二甲基乙酰胺(2.4ml)中。加入吡啶(0.18ml，2.2mmol， 1.5当量)和新戊酰氯(0.27ml，2.2mmol，1.5当量)并将混合物在85℃搅拌4h。加入khco3(1.01g，7.29mmol，5.0当量)并将混合物在155℃搅拌过夜。将溶液冷却至室温。加入水(100ml)并将所得的悬浮液过滤。滤饼用水(50ml)、etoh(50ml)和二乙醚(50ml)洗涤，并干燥，得到标题化合物(120mg，0.293mmol，20％)，为无色固体。hrms(esi+)410.0467 (m+h+)。
[0435]
c)5-(叔丁基)-7-氯-3-(2-碘苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶
[0436][0437]
以类似于对于合成7-氯-5-(二氟(苯基)甲基)-3-(2-乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例27，步骤c)所述的程序，由5-(叔丁基)-3-(2-碘苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-7(4h)-酮(180mg，0.440 mmol，1.00当量)制备标题化合物并分离，为无色固体(130mg，0.304mmol，69％)。hrms(esi+)428.0128(m+h
+
)。
[0438]
d)5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2-碘苄基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-b]吡啶
[0439][0440]
以类似于对于合成5-(二氟(苯基)甲基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2
‑ꢀ
乙烯基苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(实施例27，步骤d)所述的程序，由5-(叔丁基)-7-氯-3-(2-碘苄基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶(128mg， 0.299mmol，1.00当量)制备标题化合物并分离，为无色油状物(148mg， 0.299mmol，99％)。hrms(esi+)409.0908(m+h+)。
[0441]
e)s-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b] 吡啶-3-基)甲基)苯基)硫代乙酸酯
[0442][0443]
将5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-(2-碘苄基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-b]吡啶(20mg，0.040mmol，1.0当量)溶解于甲苯(0.4ml)中并用氮气吹洗。加入碘化铜(0.8mg，4μmol，0.1当量)、1，10-菲咯啉(1.5mg，8.0 μmol，0.2当量)和硫代乙酸钾(6.9mg，0.060mmol，1.5当量)并将混合物在100℃搅拌19h。加入水(20ml)和etoac(20ml)并将混合物搅拌5 min。分离各个相并且水层用etoac(3x10ml)萃取。合并的有机层用 mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的10％etoac)得到标题化合物(17mg，0.038mmol，95％)。hrms(esi+)447.1771 (m+h
+
)。
[0444]
f)2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶
ꢀ‑
3-基)甲基)苯硫醇
[0445]
[0446]
以类似于对于合成2-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)甲基)苯基)乙硫醇(实施例29，步骤d)所述的程序，由s-(2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-3-基)甲基)苯基)硫代乙酸酯(61mg，0.14mmol，1.0当量) 制备标题化合物并作为粗制物料(53mg)分离以在未经纯化下用于后续步骤。
[0447]
g)2-[[2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]二硫基]乙醇
[0448]
以类似于对于合成2-[2-[2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇(实施例28)所述的程序，由粗制2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-b]吡啶-3-基)甲基)苯硫醇(20mg，0.049mmol，1.0当量)和巯基乙醇制备标题化合物并通过制备型tlc(在ch2cl2中的10％etoac)分离(11 mg，0.023mmol，46％)。hrms(esi+)481.1645(m+h+)。
[0449]
实施例37
[0450]
5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3-[[2-(吡啶-2-基二硫基)苯基]甲基] 三唑并[4，5-d]嘧啶
[0451]
以类似于对于合成2-[2-[2-[[5-[二氟(苯基)甲基]-7-(3，3-二氟吡咯烷-1
‑ꢀ
基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]苯基]乙基二硫基]乙醇(实施例28)所述的程序，由粗制2-((5-(叔丁基)-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并 [4，5-b]吡啶-3-基)甲基)苯硫醇(30mg，0.063mmol，1.0当量)和2-巯基吡啶制备标题化合物并通过制备型tlc(在己烷中的20％etoac)分离(20mg， 0.034mmol，46％)。hrms(esi+)584.1312(m+h+)。
[0452]
实施例38
[0453]
2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]-3
‑ꢀ
乙炔基苯磺酰氟
[0454][0455]
a)3-溴-2-甲基苯-1-磺酰氟
[0456][0457]
将3-溴-2-甲基-苯磺酰氯(cas 886501-61-7，727mg，2.70mmol.1.00 当量)溶解于丙酮(8.5ml)和水(0.5ml)中。加入氟化钾(783mg，13.5 mmol，5.00当量)并将混合物在室温搅拌过夜。在氮气流中除去大多数丙酮。将剩余物分配在etoac(100ml)和水(20ml)之间。抛弃水相。有机相用盐水(20ml)洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩，得到无色固体(628 mg，
2.48mmol，92％)。hrms(maldi+)251.9250(m
+
)。
[0458]
b)2-甲基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1-磺酰氟
[0459][0460]
将3-溴-2-甲基苯-1-磺酰氟(628mg，2.48mmol，1.00当量)、pd(pph3)cl
2 (174mg，0.25mmol，0.10当量)和cui(71mg，0.37mmol，0.15当量)放入25ml梨形烧瓶中。在抽真空并且用氮气回填(2x)后，加入mecn (12.4ml)，接着加入dipea(867μl，4.96mmol，2.00当量)。将氮气鼓泡通过黑色溶液达5分钟，然后加入tms-乙炔(696μl，4.96mmol，2.00 当量)。将烧瓶盖上盖并放入预热的油浴(50℃)中。在3h之后，加入另外的tms-乙炔(2.00当量)并在50℃继续搅拌过夜。在24h之后，将混合物冷却至室温，用硅藻土过滤并分配在水和etoac之间。水相用etoac(3x 20ml)萃取。合并的有机物用水和盐水洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的0.7％etoac)得到褐色油状物，其在静置后固化(纯度94％，610mg，2.12mmol，85％)。nmr分析表明大约6％残留起始物料。hrms(maldi+)270.0541(m+)。
[0461]
c)2-(溴甲基)-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1-磺酰氟
[0462][0463]
将2-甲基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1-磺酰氟(26mg，0.096 mmol，1.00当量)与nbs(86mg，0.48mmol，5.00当量)、aibn(2mg， 0.012mmol，0.13当量)和mecn(0.5ml)合并。将混合物在80℃搅拌过夜。将挥发物移除并将剩余物通过制备型tlc分离，得到标题化合物，为无色油状物(15mg，0.043mmol，48％)。hrms(maldi+)370.9543 (m+na
+
)。(注：反应从未达到完成，如果加入更多的nbs/aibn同样也未达到)。
[0464]
d)2-[[5-叔丁基-7-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]甲基]-3-乙炔基苯磺酰氟
[0465]
将2-(溴甲基)-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯-1-磺酰氟(30mg，0.086 mmol，1.00当量)与dmf(0.4ml)、三甲胺(18μl，0.13mmol，1.5当量) 和5-叔丁基-7-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)-3h-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶(cas 1438465-59-8，27mg，0.095mmol，1.1当量)合并。在30min之后，将混合物用etoac(100ml)稀释，用5％licl水溶液(2x 20ml)和盐水(20ml) 洗涤，用mgso4干燥，过滤并浓缩。二氧化硅上的急骤色谱法(在己烷中的5％etoac)得到两种区域异构体烷基化产物的混合物(14mg)。将混合物溶解于thf(0.5ml)中并加入三甲胺三氢氟酸盐(8.2mg，在0.1ml thf 中，0.051mmol，2.0当量)。在4h之后，将混合物用etoac(15ml)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水(各自3ml)洗涤。用mgso4干燥，过滤并浓缩，得到粗制物料，将其通过ptlc(在己烷中的25％etoac)纯化，得到标题化合物，为无色油状物(5mg，0.011mmol，两个步骤后为13％)。 hrms(esi+)479.1474(m+h
+
)。
[0466]
实施例39
[0467]
药理学试验
[0468]
进行以下试验以确定式(i)的化合物的活性：
[0469]
放射性配体结合测定
[0470]
使用建议量的表达人cnr1或cnr2受体的人胚胎肾(hek)细胞的膜制品(perkinelmer)各自分别结合1.5或2.6nm[3h]-cp-55，940(perkinelmer)作为放射性配体来确定本发明化合物对大麻素受体的亲和性。在总体积为0.2ml的结合缓冲液(对于cb1受体：50mm tris，5mm mgcl2、 2.5mm edta，和0.5％(wt/vol)无脂肪酸bsa，ph 7.4，和对于cb2受体：50mm tris，5mm mgcl2、2.5mm egta，和0.1％(wt/vol)无脂肪酸 bsa，ph 7.4)中进行结合，在30℃振荡1h。通过经涂布有0.5％聚氮丙啶的微过滤板(unifilter gf/b过滤板；packard)快速过滤将反应终止。对于ki使用非线性回归分析(activity base，id business solution，limited) 来分析结合的放射性，从饱和试验确定对于[3h]cp55，940的kd值。式(i) 化合物显示对于cb2受体的优异亲和性，其中亲和性低于10μm，更特别地为1nm至3μm并且最特别地为1nm至100nm。
[0471]
在上述测定(ki)中，根据式(i)的化合物具有的活性特别地为0.5nm至 10μm，更特别地为0.5nm至3μm并且最特别地为0.5nm至100nm。
[0472]
所有化合物都是cb2结合剂，其中ki值低于3um并且在相应的测定中相对于cb1具有至少3倍的选择性。
trf检测试剂盒(roche diagnostics)，通过加入 50μl裂解试剂(tris，nacl，1.5％triton x100，2.5％np40，10％nan3) 和50μl检测溶液(20μm mab alexa700-camp 1∶1，和48μm钌
ꢀ‑
2-aha-camp)终止测定，并且室温振荡2h。通过装备有nd：yag激光器作为激发源的trf读出器(evotec technologies gmbh)测量时间分辨能量转移。将平板测量两次，在355nm激发和分别在730(带宽30nm)或 645nm(带宽75nm)以100ns的延迟和100ns的栅极(gate)发射，总暴露时间是10s。fret信号的计算如下：fret＝ t730-alexa730-p(t645-b645)，p＝ru730-b730/ru645-b645，其中t730 是在730nm测量的测试孔，t645是在645nm测量的测试孔，b730和 b645是分别在730nm和645nm的缓冲液对照。camp含量从跨度为10 μm至0.13nm camp的标准曲线的函数来测定。
[0476]
使用activity base分析(id business solution，limited)测定ec
50
值。从该测定产生的宽范围的大麻素激动剂的ec
50
值与科学文献中公开的值相吻合。
[0477]
β-抑制蛋白易位测定-pathhunter
tm
(discoverx)
[0478]
pathhunter
tm
β-抑制蛋白cho-k1 cnr1细胞系(目录号#93-0200c2) 和β-抑制蛋白cho-k1 cnr2细胞系(目录号#93-0706c2)购自discoverx corporation。将该细胞系改造以表达融合至β-抑制蛋白的β-半乳糖苷酶 ea片段和融合至靶受体的prolink互补肽。pathhunter
tm
蛋白质互补测定 (discoverx corporation#93-0001)根据制造商方案进行。在20μl细胞铺板试剂2(discoverx#93-0563r2a)中，在384孔板(corning costar#3707，白色，透明底部)中对测定板接种，含有7500个(cnr1)和10000个(cnr2) 细胞。在37℃(5％co2，95％相对湿度)温育过夜之后，加入5μl的试验化合物(1％终dmso浓度)并在30℃继续温育90min。然后加入检测试剂(12μl)并在室温继续温育60min。然后利用victor3v读数器(perkin elmer) 分析板的化学发光信号。
[0479]
实施例a
[0480]
可以以常规方式制备含有下列成分的薄膜包衣片剂：
[0481]
成分每片核：
ꢀꢀ
式(i)的化合物10.0mg200.0mg微晶纤维素23.5mg43.5mg含水乳糖60.0mg70.0mg聚维酮(povidone)k3012.5mg15.0mg淀粉羟乙酸钠12.5mg17.0mg硬脂酸镁1.5mg4.5mg(核重)120.0mg350.0mg薄膜包衣：
ꢀꢀ
羟丙基甲基纤维素3.5mg7.0mg聚乙二醇60000.8mg1.6mg滑石1.3mg2.6mg氧化铁(黄)0.8mg1.6mg二氧化钛0.8mg1.6mg
[0482]
筛分活性成分，并将活性成分与微晶纤维素混和，并将混合物用聚乙烯吡咯烷酮
的水溶液制粒。然后将颗粒与淀粉羟乙酸钠和硬脂酸镁混和并且压制，分别获得120或350mg的核。将所述核用上述薄膜包衣的水溶液/悬浮液包衣。
[0483]
实施例b
[0484]
可以以常规方式制备含有下列成分的胶囊：
[0485]
成分每片式(i)的化合物25.0mg乳糖150.0mg玉米淀粉20.0mg滑石5.0mg
[0486]
筛分各组分并混合和填充到2号胶囊中。
[0487]
实施例c
[0488]
注射液可以具有下列组成：
[0489]
式(i)的化合物3.0mg聚乙二醇400150.0mg乙酸适量加至ph 5.0注射液用水加至1.0ml
[0490]
将活性成分溶解于聚乙二醇400和注射用水(一部分)的混合物中。通过加入乙酸将ph调到5.0。加入余量的水将体积调到1.0ml。将溶液过滤，使用适当过量装入小瓶中并灭菌。