一种解淀粉芽孢杆菌培养基的制作方法

1.本发明属于微生物培养领域，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌培养基。


背景技术：

2.解淀粉芽抱杆菌具有提高农作物产量、抑制植物病原菌和线虫生长的功能。它能够定殖在植物根系周围，产生多种抗菌和诱导植物系统抗性的物质，对多种植物病菌有较强的抑制作用。可用于多种作物的病害防治，具有良好的防治效果。同时，解淀粉芽孢杆菌可以促进作物生长发育、增加作物产量和改善品质。
3.对于解淀粉芽孢杆菌的实际应用来说，较高的产孢率能够使其更好地应用于工业化生产微生物菌剂中，优化培养方法对于培养解淀粉芽孢杆菌十分必要。解淀粉芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌亲缘关系较近，在培养解淀粉芽孢杆菌时，不同的解淀粉芽孢杆菌菌株对培养基成分及培养条件要求不同，但是总体来说维持在一定的范围内，在基本培养基中能够良好地生长，其培养温度一般为30-37℃，培养液ph为中性，180-300r/min。现有技术中对于解淀粉芽孢杆菌的培养方法的优化还体现在培养基优化中。
4.中国专利申请cn202111287521.6公开了一种解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)培养基及其应用，属于微生物发酵领域。利用乳糖、山梨醇为碳源，尿素、硫酸铵为氮源，大规模进行解淀粉芽孢杆菌液体发酵，代谢产物1-脱氧野尻霉素可达到6g/l以上；通过介入补料控制溶氧之后1-脱氧野尻霉素可达10g/l以上。利用该培养基进行解淀粉芽孢杆菌发酵，1-脱氧野尻霉素产量高，且该培养基配方简单，便宜易得安全环保，发酵工艺简单可控，发酵周期短，有利于工业化扩大生产。
5.中国专利申请cn201610638964 .8提供了一种产抑菌活性物质的解淀粉芽孢杆菌培养基，该培养基由如下组分组成：蔗糖25-35g、谷氨酸钠2-6g、硫酸铵2-6g、马铃薯淀粉废水1l。该培养基能使得解淀粉芽孢杆菌分泌抑菌活性物质；培养基成分简单，成本低廉。
6.但以上培养基对于解淀粉芽孢杆菌的产孢率效果均不明确，且对于活性物质分泌的促进作用有进一步提升的空间。


技术实现要素：

7.为了解决上述问题，本发明提供了一种用于培养解淀粉芽孢杆菌的专用培养基。
8.本发明中培养基的成分如无特别说明，均为本领域一般认定的成分。如：生物素又称维生素h、辅酶r，是水溶性维生素，也属于维生素b族，b7。如：蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，为本领域常见的培养基组分。
9.一方面，本发明提供了一种培养基。
10.所述的培养基用于培养解淀粉芽孢杆菌，所述的培养基中的碳源包括乳糖、淀粉和麦芽糖；所述的培养基中的氮源包括甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和精氨酸；所述的培养基中还包括生物素。
11.所述的乳糖含量为10-20g/l，所述的淀粉的含量为10-20g/l，所述的麦芽糖的含
量为15-25g/l。
12.所述甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和精氨酸的用量比为1：1：1：1，添加量为8-10g/l。
13.所述的生物素的添加量为6-10g/l；优选为6-8g/l；进一步优选为8g/l。
14.所述的培养基中还包括蛋白胨、硫酸镁和磷酸二氢钾。
15.所述的蛋白胨的含量为10g/l。所述的硫酸镁含量为2g/l。所述的磷酸二氢钾的含量为3-5g/l。
16.优选地，所述培养基每1l成分如下：进一步优选地，所述培养基每1l成分如下：在一些实施例中，所述培养基每1l成分如下：
所述的培养基调节至ph中性。
17.另一方面，本发明提供了前述培养基在培养解淀粉芽孢杆菌中的应用。
18.优选地，所述的解淀粉芽孢杆菌保藏号为cgmcc 1.10901。
19.再一方面，本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌培养物。
20.所述的培养物通过前述的培养基培养解淀粉芽孢杆菌制备。
21.再一方面，本发明提供了一种微生物菌剂。
22.所述的微生物菌剂中包括前述的解淀粉芽孢杆菌培养物。
23.或者，所述的微生物菌剂通过前述的解淀粉芽孢杆菌培养物进行制备。
24.本发明的有益效果：本发明提供的培养基用于培养解淀粉芽孢杆菌时，能够促进解淀粉芽孢杆菌的生长，并提高芽孢率，同时培养物中杂菌率较低。
附图说明
25.图1为实施例4-6培养的解淀粉芽孢杆菌的生长曲线。
具体实施方式
26.下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
27.实施例1-3用于培养解淀粉芽孢杆菌的培养基每1l培养基中成分如下：
其中，乳糖购自西安拉维亚生物科技有限公司；蛋白胨购自四川宝顺生物技术有限公司；氨基酸购于上海皓鸿生物医药科技有限公司；生物素购自山东汇恒生物科技有限公司。
28.实施例4-6一种解淀粉芽孢杆菌的培养方法采用实施例1-3的培养基分别培养解淀粉芽孢杆菌，对应实施例4-6，具体采用的解淀粉芽孢杆菌为现有菌种cgmcc 1.10901，将种子液分别接种入实施例1-3的培养基，30℃好氧培养（溶氧＞20%），300r/min，培养时间48h，分别于24h、30h、36h、42h、48h测定产孢率（稀释计数），结果如下：48h测定杂菌率结果如下：各实施例的生长曲线图见图1。
29.对比例1-6参照实施例1设置对比例1-6，培养基具体成分如下：
产孢率结果如下：48h测定杂菌率结果如下：48h测定活菌数结果如下：


技术特征：
1.一种培养基，其特征在于，所述的培养基用于培养解淀粉芽孢杆菌，所述培养基中的碳源包括乳糖、淀粉和麦芽糖；所述培养基中的氮源包括甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和精氨酸；所述培养基中还包括生物素。2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的乳糖含量为10-20g/l，所述的淀粉含量为10-20g/l，所述的麦芽糖含量为15-25g/l。3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和精氨酸的用量比为1：1：1：1，添加量为8-10g/l。4.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的生物素添加量为6-10g/l。5.根据权利要求4所述的培养基，其特征在于，所述的生物素添加量为6-8g/l。6.根据权利要求5所述的培养基，其特征在于，所述的生物素添加量为8g/l。7.根据权利要求6所述的培养基，其特征在于，还包括蛋白胨、硫酸镁和磷酸二氢钾。8.根据权利要求7所述的培养基，其特征在于，蛋白胨的含量为10g/l。9.根据权利要求8所述的培养基，其特征在于，硫酸镁含量为2g/l。10.根据权利要求9所述的培养基，其特征在于，磷酸二氢钾的含量为3-5g/l。11.根据权利要求10所述的培养基，其特征在于，每1l成分如下：乳糖10-20g，淀粉10-20g，麦芽糖15-25g，氮源8-10g，蛋白胨10g，硫酸镁2g，磷酸二氢钾3-5g，生物素6-10g；所述的氮源为甘氨酸：丙氨酸：异亮氨酸：精氨酸用量比1：1：1：1的混合物。12.根据权利要求11所述的培养基，其特征在于，每1l成分如下：乳糖15g，淀粉15g，麦芽糖15g，氮源8-10g，蛋白胨10g，硫酸镁2g，磷酸二氢钾3-5g，生物素8g；所述的氮源为甘氨酸：丙氨酸：异亮氨酸：精氨酸用量比1：1：1：1的混合物。13.根据权利要求12所述的培养基，其特征在于，每1l成分如下：乳糖15g，淀粉15g，麦芽糖15g，氮源10g，蛋白胨10g，硫酸镁2g，磷酸二氢钾5g，生物素8g；所述的氮源为甘氨酸：丙氨酸：异亮氨酸：精氨酸用量比1：1：1：1的混合物。14.权利要求1-13任一项所述的培养基在培养解淀粉芽孢杆菌中的应用。15.一种解淀粉芽孢杆菌培养物，其特征在于，通过权利要求1-13任一项所述的培养基培养解淀粉芽孢杆菌制备。16.一种微生物菌剂，其特征在于，包括权利要求15所述的培养物。

技术总结
本发明涉及微生物培养领域，具体提供一种培养基，用于培养解淀粉芽孢杆菌，所述培养基中的碳源包括乳糖、淀粉和麦芽糖；氮源包括甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和精氨酸；所述培养基中还包括生物素。本发明提供的培养基能够促进解淀粉芽孢杆菌的生长，并提高芽孢率，同时培养物中杂菌率较低。物中杂菌率较低。物中杂菌率较低。


技术研发人员：吴春峰 王萌 孙明宾 隋晓琳 于军
受保护的技术使用者：烟台泓源生物肥料有限公司
技术研发日：2022.07.11
技术公布日：2022/8/12