抗可卡因抗体或其功能性片段、检测可卡因的试剂和试剂盒的制作方法

本发明涉及抗体领域，具体而言，涉及抗可卡因抗体或其功能性片段、检测可卡因的试剂和试剂盒。

背景技术：

1、可卡因(cocaine，coc)是一种莨菪烷型生物碱，提炼自古柯叶，又称古柯碱，多呈白色晶体状，无臭，味苦而麻，是人类发现的第一种具有局麻作用的天然生物碱，为长效酯类局麻药，脂溶性高，穿透力强，对神经组织亲和性良好，产生良好的表面麻醉作用。在医学中，曾被用作局部麻醉药或血管收缩剂。

2、可卡因可增加警觉性，引起欣快感，使用后会感觉精力充沛，但其滥用会造成人体对药物的依赖型，长期小剂量滥用可导致人体慢性中毒，对消化系统、免疫系统、心血管系统和泌尿生殖系统都有损伤作用，尤其作为剂量依赖性肝毒素，可导致肝细胞坏死。长期使用量大者常觉得紧张、生病、无法放松、焦躁易怒、视力模糊、盗汗、耳鸣、抽筋、失去协调性，而导致人格异常或妄想性精神病症状，若突然停用，就会出现不安、焦虑、忽冷忽热、起鸡皮疙瘩、流泪、流涕、出汗、恶心、腹痛等，并可能发生严重的忧郁及昏昏欲睡现象即为成瘾发作症状。这种戒断反应的痛苦，反过来又促使吸毒者为避免这种痛苦而千方百计地维持吸毒状态，故国家将其列为管制药品，明令禁止非法使用。建立可卡因的快速检测方法，对于禁毒、毒物检测、刑事鉴定等具有非常重要的实践意义和应用价值。

3、目前，可卡因的检测方法主要有胶体金免疫层析法，具有快速，操作简单等优点，在滥用药物后24h内即可检出，其是基于抗体和抗原的特异性反应，同时利用胶体金对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法，而获得抗可卡因的抗体是研制胶体金免疫层析试纸的关键。

4、因此，本领域对于有效且特异性结合可卡因并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。

5、有鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供抗可卡因抗体或其功能性片段、检测可卡因的试剂和试剂盒。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明实施例提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括(a)～(c)中的任意一种：(a)hcdr1～3和lcdr1～3，hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:1、2和3所示或如seq id no:1、2和4所示；lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列依次如以下任意项所示：seq id no:5、7和8；seq id no:6、7和8；seq id no:5、7和9；seq id no:6、7和9；

4、(b)氨基酸序列如seq id no:10～14任一项所示的重链可变区和氨基酸序列如seq id no:21～24任一项所示的轻链可变区；

5、(c)氨基酸序列与(b)所示序列具有80％以上同一性的重链可变区和轻链可变区，且包括(a)所示序列的hcdr1～3和lcdr1～3。

6、第二方面，本发明实施例提供了一种抗体偶联物，其包括如前述实施例所述的抗体或其功能性片段。

7、第三方面，本发明实施例提供了一种试剂或试剂盒，其包括如前述实施例所述的抗体或其功能性片段或如前述实施例所述的抗体偶联物。

8、第四方面，本发明实施例提供了一种检测可卡因的方法，其包括：将如前述实施例所述的抗体或其功能性片段与待检测样品混合，使所述抗体或其功能性片段与待测样本中的可卡因接触，形成免疫复合物。

9、第五方面，本发明实施例提供了一种分离的核酸，其编码前述实施例所述的抗体或其功能性片段。

10、第六方面，本发明实施例提供了一种载体，其含有前述实施例所述的分离的核酸。

11、第七方面，本发明实施例提供了一种细胞，其含有前述实施例所述的分离的核酸或前述实施例所述的载体。

12、第八方面，本发明实施例提供了一种制备前述实施例所述的抗体或其功能性片段的方法，其包括：培养前述实施例所述的细胞。

13、本发明具有以下有益效果：

14、本发明公开的抗可卡因抗体包括上述重链互补决定区和轻链互补决定区，该抗体为可卡因的检测提供了重要的原料来源，具有提高的亲和力和活性。

技术特征：

1.一种抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括(a)～(c)中的任意一种：

2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段以kd＜8.75×10-08m的亲和力结合可卡因。

3.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；

4.根据权利要求1～3任一项所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述功能性片段选自所述抗体的f(ab’)2、fab’、fab、fv和scfv中的任意一种。

5.一种抗体偶联物，其特征在于，其包括如权利要求1～4任一项所述的抗体或其功能性片段；

6.一种试剂或试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1～4任一项所述的抗体或其功能性片段或如权利要求5所述的抗体偶联物。

7.一种检测可卡因的方法，其特征在于，其包括：

8.一种分离的核酸，其特征在于，其编码权利要求1～4任一项所述的抗体或其功能性片段。

9.一种载体，其特征在于，其含有权利要求8所述的核酸。

10.一种细胞，其特征在于，其含有权利要求8所述的核酸或权利要求9所述的载体。

11.一种制备权利要求1～4任一项所述的抗体或其功能性片段的方法，其特征在于，其包括：培养权利要求10所述的细胞。

技术总结
本发明公开了抗可卡因抗体或其功能性片段、检测可卡因的试剂和试剂盒，涉及抗体领域。本发明公开的抗可卡因抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区，该抗体为可卡因的检测提供了重要的原料来源，具有提高的亲和力和活性。

技术研发人员：孟媛,钟冬梅,覃文新,游辉,曹慧方
受保护的技术使用者：东莞市朋志生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11