一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂及其制备方法与流程

本发明属于作物病害防治，具体涉及一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂及其制备和应用。

背景技术：

1、棉花黄萎病是由大丽轮枝菌(verticillium dahliae)引起的棉花土传维管束病害，病原菌通常侵染棉花根部，引起棉花根部乃至全株的病害，造成重大的经济损失，俗称“癌症”病害，国内外尚无理想的防治措施。棉花是新疆重要的经济作物，由于连年重茬连作和棉秆还田，土壤中病残体的积累量越来越大，作为土传病害，棉花黄萎病的发生逐年加重。调查显示，新疆棉花黄萎病发病田占比超过50％，黄萎病已成为制约新疆棉花生产的重要因素。国内外学者开展了大量研究，如培育抗性品种、作物轮作倒茬、开发土壤熏蒸剂和化学杀菌剂，以及最近兴起的微生物制剂。不幸地是，由于寄主抗性种质资源缺乏，还未有高抗的棉花品种；以枯草芽孢杆菌为核心的生防菌，受到土壤环境和气候的影响，防控效果不稳定；化学杀菌剂被迫选为防治棉花黄萎病的主要措施。然而，长期使用化学杀菌剂不仅对生态环境和人类健康构成威胁，还提高了棉花黄萎病菌的抗性。因此，迫切需要研发环境友好型措施来有效控制棉花黄萎病，生物防治以绿色环保，发展潜力大等优势被人们关注并且应用于实践中。研究应用较多的为枯草芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉等。

2、前期，本团队利用微生物组学方法，结合宏基因组测序技术，系统分析了健康土壤、健康棉株的内生和根际的微生物群落结构，微生物与病原菌之间的互作，与病害发生危害的关系。通过生态防治理论，将内生拮抗真菌与根际有益细菌进行组合，组成一个复合微生物组群，将之释放到土壤中，集促生、占位、拮抗、诱导免疫于一体，对于防治棉花黄萎病，提高棉花经济效益具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题为：如何提供一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂，制备方法。

2、本发明的技术方案为：一种复合微生物菌剂，包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌，所述镰刀菌保藏编号为cgmcc no.11314，该菌株已经在申请号为cn201610425079.1的专利中公开，本发明对哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌菌种的来源没有特殊限定。

3、进一步地，所述镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2～4︰3～5︰1～2︰1～2︰1～2。优选为2︰4︰1︰1︰1。

4、进一步地，所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于5×109cfu/g。

5、进一步地，所述生长辅料为壳聚糖或黄腐酸中的一种或它们的任意混合。

6、进一步地，所述干燥剂为膨润土或凹凸棒土中的一种或它们的任意混合。

7、本发明还公开了一种复合微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

8、(1)分别制备镰刀菌、哈茨木霉种子液和乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌种子液。

9、(2)将麦麸或玉米糁中的一种或它们的任意混合作为基质，控制含水量为30～50％，加入步骤(1)中制备的微生物种子液，微生物种子液的接菌量为20～50ml种子液/kg基质。

10、(3)将步骤(2)中添加了微生物种子液的基质进行发酵培养，培养温度为25～35℃，培养时间为5～7天，然后将发酵培养物在35～40℃烘干，粉碎，即获得微生物菌粉。

11、(4)将步骤(3)中的微生物菌粉与生长辅料、干燥剂混合，获得复合微生物菌剂。

12、本发明的复合微生物菌剂用于防治棉花黄萎病的用途，将复合微生物菌剂滴灌施用于棉花根部可以有效防治棉花黄萎病，提高棉花产量、改善纤维品质。具体方法如下：

13、将本发明的复合微生物菌剂在棉花黄萎病发病初期6月中下旬～7月初，滴灌施用于棉花根部，每次用量0.25～0.75kg/亩，施用1～2次，可以有效防治棉花黄萎病，提高棉花产量、改善纤维品质。

14、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

15、本发明的复合微生物菌剂中的镰刀菌、哈茨木霉对棉花黄萎病菌具有拮抗作用，乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌为土壤有益菌，其代谢产物中含有生长素、抗菌素、细胞分裂素等作物生长所必需的调节物质，此外还具有抑制黄萎病菌繁殖，功能菌的定殖和生长。

16、通过球镰刀菌、哈茨木霉拮抗真菌和乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌有益细菌的协同作用增强了对黄萎病菌的抑制效果，同时提高了土壤中微生物的多样性，使土壤微生态达到平衡，进而增强了棉花根系养分的吸收及利用效率，提高了根系活力，进一步提高棉花产量，改善纤维品质。

17、本发明的制备方法工艺简单，易于操作，制得的复合微生物菌剂对环境无污染、成本低。

技术特征：

1.一种复合微生物菌剂，其特征在于，包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌，所述镰刀菌保藏编号为cgmcc no.11314。

2.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2～4︰3～5︰1～2︰1～2︰1～2。

3.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2︰4︰1︰1︰1。

4.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述生长辅料为壳聚糖或黄腐酸中的一种或它们的任意混合。

5.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述干燥剂为膨润土或凹凸棒土中的一种或它们的任意混合。

6.根据权利要求1-5所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于5×109cfu/g。

7.权利要求1-5任一项所述的一种复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

8.权利要求1-5任一项所述的一种复合微生物菌剂用于防治棉花黄萎病的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，防治棉花黄萎病的方法为：将复合微生物菌剂在棉花黄萎病发病初期6月中下旬～7月初，滴灌施用于棉花根部，每次用量0.25～0.75kg/亩，施用1～2次。

技术总结
本发明公开了一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂及其制备方法，复合微生物菌剂包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌，所述镰刀菌保藏编号为CGMCC NO.11314。本发明的复合微生物菌剂中的镰刀菌、哈茨木霉对棉花黄萎病菌具有拮抗作用，乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌为土壤有益菌，其代谢产物中含有生长素、抗菌素、细胞分裂素等作物生长所必需的调节物质，此外还具有抑制黄萎病菌繁殖，功能菌的定殖和生长。

技术研发人员：张亚林,王大光,刘元元,车磊,梁伟,阿山·哈布旦,刘爱忠,冯鸿杰,冯自力,王宝霞,李应丽,张霞
受保护的技术使用者：精河县农业技术推广中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13