家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段和家蚕羧肽酶抑制剂及其应用

本发明涉及生物医药领域，具体涉及家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段、家蚕羧肽酶抑制剂，还涉及家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段和家蚕羧肽酶抑制剂在治疗胃癌中的应用。

背景技术：

1、胃癌为起源于胃黏膜上皮的常见恶性肿瘤，威胁全人类健康与生命。早期胃癌在经治疗后预后较好，而晚期胃癌预后则较差。在胃癌治疗时，通常伴随患者的是化疗药物高毒副作用所带来的痛苦。已有研究表明多种昆虫中含有的抗菌肽，斑蝥素等生物活性物质能够发挥抗癌功能，而且相较于化疗药物，这类生物活性物质成药后毒副作用更小。

2、家蚕作为一种模式生物，在全基因组测序完成后越来越多基因的功能被研究，但是具有药用功效基因少见报道，因此挖掘家蚕来源物质的抗肿瘤药物对家蚕开发具有重要意义。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段；本发明的目的之二在于提供所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段在制备治疗胃癌的药物中的应用；本发明的目的之三在于提供含有所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的多肽；本发明的目的之四在于提供所述多肽在制备治疗胃癌的药物中的应用；本发明的目的之五在于提供所述家蚕羧肽酶抑制剂在制备胃癌相关因子表达抑制剂中的应用。

2、为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、1、家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段，所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的氨基酸序列如下：酪氨酸-甘氨酸-缬氨酸-丝氨酸。

4、2、所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段在制备治疗胃癌的药物中的应用。

5、本发明优选的，所述药物能够抑制胃癌细胞增殖。

6、3、含有所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的多肽。

7、本发明优选的，所述多肽的氨基酸序列如seq id no.2所示。

8、4、所述多肽在制备治疗胃癌的药物中的应用。

9、本发明优选的，所述胃癌为分化或未分化胃癌细胞。

10、本发明优选的，所述胃癌为mkn45细胞、sgc7901细胞或hgc27细胞。

11、本发明优选的，所述治疗胃癌为抑制胃癌细胞增殖。

12、5、所述家蚕羧肽酶抑制剂在制备胃癌相关因子表达抑制剂中的应用，所述胃癌相关因子为编码sh结构域基因、生长因子受体结合蛋白2、鸟苷酸交换因子、raf蛋白、c-myc蛋白或周期蛋白cdk2，cdk4，cyclin d1和cyclin e1。

13、本发明的有益效果在于：本发明公开了构建了家蚕羧肽酶抑制剂基因重组表达载体，并获得重组蛋白。该重组蛋白能够显著抑制mkn45和sgc7901两株胃癌细胞系的增殖，在第三天时，10微克每毫升的家蚕羧肽酶抑制剂添加组对于胃癌细胞的抑制率能够达到25％。通过检测影响胃癌细胞增殖的相关通路蛋白，发现部分胃癌细胞能够通过自磷酸化激活下游蛋白如mapk/erk通路相关蛋白而快速增殖，而在加入家蚕羧肽酶抑制剂进行培养后，由egf/egfr启动的mapk/erk通路促进原癌基因c-myc表达这一通路受到抑制，进而影响相关细胞周期蛋白表达，抑制胃癌细胞增殖。随后通过对家蚕羧肽酶抑制剂和表皮生长因子受体进行分子对接和虚拟筛选，我们筛选到一条与既有小分子抑制剂在受体中作用位置重叠的多肽。合成多肽后，对其进行抑制胃癌细胞增殖活性测定，发现其具有抑制胃癌细胞增殖的能力，因此该多肽为家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段，也能作为胃癌的候选药物，为胃癌的治疗提供了新的药物，为昆虫来源物质抗肿瘤药物的开发提供了可能性。

技术特征：

1.家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段，其特征在于：所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的氨基酸序列如下：酪氨酸-甘氨酸-缬氨酸-丝氨酸。

2.权利要求1所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段在制备治疗胃癌的药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，所述药物能够抑制胃癌细胞增殖。

4.含有权利要求1所述家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的多肽。

5.根据权利要求4所述的多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列如seq id no.2所示。

6.权利要求4或5所述多肽在制备治疗胃癌的药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述胃癌为分化或未分化胃癌细胞。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述胃癌为mkn45细胞、sgc7901细胞或hgc27细胞。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述治疗胃癌为抑制胃癌细胞增殖。

10.权利要求4或5所述家蚕羧肽酶抑制剂在制备胃癌相关因子表达抑制剂中的应用，其特征在于：所述胃癌相关因子为编码sh结构域基因、生长因子受体结合蛋白2、鸟苷酸交换因子、raf蛋白、c-myc蛋白或周期蛋白cdk2，cdk4，cyclin d1和cyclin e1。

技术总结
本发明公开了家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段和家蚕羧肽酶抑制剂及其应用，家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的氨基酸序列为酪氨酸‑甘氨酸‑缬氨酸‑丝氨酸，家蚕羧肽酶抑制剂的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，有效肽段与小分子抑制剂tak‑285位置重叠，研究发现有效肽段与家蚕羧肽酶抑制剂均可显著抑制胃癌细胞的增殖，能够作为胃癌的医药用途，为胃癌的治疗提供了新的药物，为昆虫来源物质抗肿瘤药物的开发提供了可能性。

技术研发人员：赵萍,叶俊宏,夏庆友
受保护的技术使用者：西南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11