活化素B在促进透明质酸合成中的应用的制作方法

活化素b在促进透明质酸合成中的应用
技术领域
1.本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及活化素b在促进透明质酸合成中的应用。


背景技术：

2.成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。在结缔组织中，成纤维细胞的主要功能是合成各种纤维和基质成分。成纤维细胞还以其功能静止状态
‑‑
纤维细胞的形式存在，二者在一定条件下可以互相转变。不同类型的结缔组织含成纤维细胞的数量不同。
3.皮肤由表皮、真皮和皮下组织以及附属器官组成，其中皮肤的真皮是一种结缔组织，由大量的纤维、细胞外基质以及各种细胞构成，其中正常皮肤真皮中成纤维细胞数量较多，其在皮肤的正常代谢过程中具有重要作用。皮肤真皮中的成纤维细胞在正常状态下，主要合成皮肤真皮的胶原纤维和弹性纤维，以及皮肤真皮的中基质成分：蛋白聚糖和黏连蛋白等。皮肤真皮组织结构成分随着皮肤的衰老和创伤发生不同的成分结构变化，而成纤维细胞在其中扮演重要的作用，因此在不同情况下调节成纤维细胞的生物学行为就及其重要。
4.活化素是近年来发现的一组重要的细胞因子，因具有广泛的生理作用而逐渐成为研究热点。序列分析表明，人活化素基因有4种：inhβa、inhβb、inhβc和inhβe，这4中基因的外显子数不同。首先在人类中inhβa是最复杂的，包含7个外显子，inhβb基因仅包含两个外显子；其次人类inhβa基因7个外显子被认为是可变剪接并引发3种不同的act a 蛋白变体，称为 x1、x2 和 x3 1.。活化素根据 βa、βb、βc、βe亚单位的结合形式不同，分别形成活化素a、活化素b、活化素c和活化素e四种分子结构，活化素c和活化素e研究非常少。
5.目前利用基因敲除小鼠模型，研究发现βa-和βb-亚基在生理上具有独立性和独立作用，而且配体-受体相互作用的评估表明，激活素亚型之间同种型之间的受体亲和力存也在显着差异
2.。研究发现活化素-βa缺陷小鼠发育至足月，但在24 小时内死亡出生。其没有胡须和下门牙，并且在包括腭裂在内的次级腭部有缺陷，这表明活化素-βa必须在颅面发育过程中发挥作用
3.。活化素-βb亚基基因破坏导致眼睑发育和女性生殖缺陷
4.。在皮肤伤口愈合过程中活化素-βa和βb mrna表达的位置也不同，活化素-βa mrna 主要由肉芽组织的间充质细胞表达，活化素-βa mrna主要在增生性的角质形成细胞中高表达 5.。
6.活化素-βa-和βb亚基的差异不仅仅局限于表达模式的差异，还是在功能上是不同的。研究发现当用活化素-βb亚基基因的相应成熟区域弥补βa亚基基因的成熟区域缺失的小鼠，虽然βa亚基空小鼠中的一些缺陷被挽救并且小鼠存活下来，但它们表现出各种缺陷，包括性腺功能减退症，以及体重，预期寿命，女性生育能力和毛发生长的减少
6.。这些缺陷归因于βa-和βb亚基的非重叠功能。研究发现活化素 a 促进了小鼠和人成纤维细胞中 i 型胶原的表达
7.，而我们研究发现活化素 b并不调节小鼠成纤维细胞中 i 型胶原的表达，因此认为不同的激活素具有不重叠的功能。而活化素 b对成纤维细胞的作用目前上不清楚。
7.[1] billings pc, bizzaro c, yang e, chung j, mundy c, pacifici m. human and mouse activin genes: divergent expression of activin a protein variants and identification of a novel heparan sulfate-binding domain in activin b. plos one. 2020 feb 19;15(2):e0229254. doi: 10.1371/journal.pone.0229254. pmid: 32074129; pmcid: pmc7029874.[2] thompson tb, cook rw, chapman sc, jardetzky ts, woodruff tk. beta a versus beta b: is it merely a matter of expression. mol cell endocrinol. 2004 oct 15;225(1-2):9-17. doi: 10.1016/j.mce.2004.02.007. pmid: 15451562.[3] matzuk mm, kumar tr, vassalli a, bickenbach jr, roop dr, jaenisch r, bradley a. functional analysis of activins during mammalian development. nature. 1995 mar 23;374(6520):354-6. doi: 10.1038/374354a0. pmid: 7885473.[4] vassalli a, matzuk mm, gardner ha, lee kf, jaenisch r. activin/inhibin beta b subunit gene disruption leads to defects in eyelid development and female reproduction. genes dev. 1994 feb 15;8(4):414-27. doi: 10.1101/gad.8.4.414. pmid: 8125256.[5] beer hd, gassmann mg, munz b, steiling h, engelhardt f, bleuel k, werner s. expression and function of keratinocyte growth factor and activin in skin morphogenesis and cutaneous wound repair. j investig dermatol symp proc. 2000 dec;5(1):34-9. doi: 10.1046/j.1087-0024.2000.00009.x. pmid: 11147673.[6] brown cw, houston-hawkins de, woodruff tk, matzuk mm. insertion of inhbb into the inhba locus rescues the inhba-null phenotype and reveals new activin functions. nat genet. 2000 aug;25(4):453-7. doi: 10.1038/78161. pmid: 10932194.[7] wietecha ms, pensalfini m, cangkrama m, m
ü
ller b, jin j, brinckmann j, mazza e, werner s. activin-mediated alterations of the fibroblast transcriptome and matrisome control the biomechanical properties of skin wounds. nat commun. 2020 may 25;11(1):2604. doi: 10.1038/s41467-020-16409-z. pmid: 32451392; pmcid: pmc7248062。


技术实现要素：

[0008]
本发明首次发现一种具有调节成纤维细胞合成透明质酸的细胞因子—活化素b，所述的活化素b能促进成纤维细胞合成透明质酸，可应用于制备具有透明质酸合成促进作用的医药品或化妆品。
[0009]
因此，本发明的第一个目的是提供活化素b在促进透明质酸合成中的应用。
[0010]
优选的，是提供活化素b在促进成纤维细胞合成透明质酸中的应用。
[0011]
本发明的第二个目的是提供活化素b在制备促进透明质酸合成的化妆品和/或药品中的应用。
[0012]
本发明的第三个目的是提供一种促进透明质酸合成的化妆品和/或药品，其含有
活化素b作为有效成分。
[0013]
优选的，所述的化妆品包括水剂型化妆品、乳剂型化妆品、霜剂型化妆品。
[0014]
优选的，所述水剂型化妆品包括化妆水或面贴膜液；所述乳剂型化妆品包括润肤乳液、护肤精华、眼部精华、睡眠面膜、补水啫喱或洁面乳；所述霜剂型化妆品包括护肤膏霜或眼霜。
[0015]
优选的，所述的药品包括内用医药品和外用医药品。
[0016]
优选的，所述的内用医药品的剂型包括粉末、散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳剂、糖浆剂、注射剂；所述的外用医药品的剂型包括洗剂、软膏剂、凝胶剂、酊剂、擦剂、醑剂、粉剂、油剂、糊剂、硬膏剂、涂膜剂、气雾剂。
[0017]
本发明首次发现一种具有调节成纤维细胞合成透明质酸的细胞因子—活化素b，所述的活化素b能促进成纤维细胞合成透明质酸，并且活化素b促进成纤维细胞合成透明质酸的量显著高于活化素 a，*p＜0.05。因此，活化素b可应用于制备具有透明质酸合成促进作用的医药品或化妆品，具有广阔的应用前景。
附图说明
[0018]
图1为活化素b促进成纤维细胞合成透明质酸的结果。
具体实施方式
[0019]
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0020]
实施例1按每孔1
×
105个人皮肤成纤维细胞的接种量接种于6孔板，细胞用dmem培养基无血清饥饿8小时，加入细胞有丝分裂抑制剂10 pm紫杉醇（paclitaxel）处理细胞72小时，之后分为对照组、活化素a组、活化素b组，对照组中加入pbs进行处理，活化素a组中加入终浓度为10 ng/ml活化素a进行处理，活化素b组中加入终浓度为10 ng/ml活化素b进行处理，培养24小时和48小时后，使用elisa检测细胞上清中透明质酸的含量，每组重复3次。结果见图1。
[0021]
由图1可知，虽然活化素 a也可以促进成纤维细胞合成透明质酸，但是活化素b促进成纤维细胞合成透明质酸的量显著高于活化素 a，*p＜0.05。
[0022]
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。