转录抑制因子LsrR的应用及提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法

本发明涉及转录抑制因子lsrr的应用及提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，属于生物基因。

背景技术：

1、乳酸菌作为益生菌在胃肠道和炎症性疾病中的益处已引起越来越多的关注。作为解决不同疾病的肠道菌群失衡问题的一种策略，可以使用益生菌调节免疫反应。在植物乳杆菌细胞中发现的几种效应分子(如脂磷壁酸、pgn和糖蛋白)直接有助于细菌和宿主之间的通讯。此外，胞外多糖和荚膜多糖可能会屏蔽其他负面效应分子以发挥益生菌作用。植物乳杆菌产生的多糖与细菌宿主中的抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗菌和抗病毒生物功能有关。

2、恶劣的环境条件会诱导荚膜多糖(cps)和肽聚糖(pgn)的生物合成，从而提高抗逆性。将植物乳杆菌暴露于模拟胃肠液中表明，对胃酸和胆汁盐的耐受性可提高多糖合成并显着提高细菌存活率。此外，热休克、酸碱休克和高渗透压可上调与胞外多糖(eps)合成相关的基因表达。了解植物乳杆菌中多糖的产生对于提高它们的环境耐受性非常必要，将增强它们在人类宿主中的益生菌活性。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明公开了一种提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，所述方法包括敲除转录抑制因子lsrr的步骤，所述转录抑制因子lsrr编码氨基酸序列如seq id no：1所示的蛋白质。

2、进一步的：所述转录抑制因子lsrr的核苷酸序列如seq id no：2所示。

3、进一步的：通过构建转录抑制因子lsrr的敲除质粒并将其导入植物乳杆菌中，实现敲除转录抑制因子lsrr。

4、进一步的：所述环境胁迫为恶性温度条件、酸碱条件以及胆盐条件中的一种或者几种。

5、本发明还包括转录抑制因子lsrr用于提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的应用，通过敲除转录抑制因子lsrr提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性，所述转录抑制因子lsrr编码氨基酸序列如seq id no：1所示的蛋白质。所述转录抑制因子lsrr的核苷酸序列如seq idno：2所示。

6、有益效果：本发明鉴定了植物乳杆菌中的转录调控因子并阐明调控多糖合成的调控机制。将基因组数据挖掘与共沉淀分析相结合，以确定植物乳杆菌特有的调节蛋白。使用电泳迁移率变动分析(emsa)来评估该提议的调节剂与启动子dna的结合以催化多糖合成，并探讨了植物乳杆菌对胆汁盐、冻干、温度、ph和ai-2的反应机制。提供了一株环境胁迫耐受增强的植物乳杆菌，具体为植物乳杆菌lsrr敲除菌株，增强了植物乳杆菌对环境胁迫的耐受。

技术特征：

1.一种提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，其特征在于：所述方法包括敲除转录抑制因子lsrr的步骤，所述转录抑制因子lsrr编码氨基酸序列如seq id no：1所示的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，其特征在于：所述转录抑制因子lsrr的核苷酸序列如seq id no：2所示。

3.根据权利要求1所述的提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，其特征在于：通过构建转录抑制因子lsrr的敲除质粒并将其导入植物乳杆菌中，实现敲除转录抑制因子lsrr。

4.根据权利要求1所述的提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，其特征在于：所述环境胁迫为恶劣温度条件、酸碱条件以及胆盐条件中的一种或者几种。

5.转录抑制因子lsrr用于提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的应用，其特征在于，通过敲除转录抑制因子lsrr提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性，所述转录抑制因子lsrr编码氨基酸序列如seq id no：1所示的蛋白质。

6.根据权利要求5所述的转录抑制因子lsrr用于提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的应用，其特征在于，通过敲除转录抑制因子lsrr提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性，所述转录抑制因子lsrr的核苷酸序列如seq id no：2所示。

技术总结
本发明公开了一种提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，包括敲除转录抑制因子LsrR的步骤，通过构建转录抑制因子LsrR的敲除质粒并将其导入植物乳杆菌中，实现敲除转录抑制因子LsrR，所述环境胁迫为恶劣温度条件、酸碱条件以及胆盐条件中的一种或者几种。本发明鉴定了植物乳杆菌中的转录调控因子并阐明调控多糖合成的调控机制。将基因组数据挖掘与共沉淀共沉淀分析相结合，以确定植物乳杆菌特有的调节蛋白。使用电泳迁移率变动分析(EMSA)来评估该调节剂与启动子DNA的结合以催化多糖合成，并探讨了植物乳杆菌对胆汁盐、冻干、温度、pH和AI‑2的反应机制。提供了一株环境胁迫耐受增强的植物乳杆菌，具体为植物乳杆菌lsrR敲除菌株，增强了植物乳杆菌对环境胁迫的耐受。

技术研发人员：孟凡强,陆兆新,吕凤霞,周立邦
受保护的技术使用者：南京农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12