miRNA作为生物标志物在诊断卵巢癌中的应用的制作方法

本发明涉及生物医药，具体涉及mirna作为生物标志物在诊断卵巢癌中的应用。

背景技术：

1、卵巢癌是女性生殖器官常见的肿瘤之一，大约有1.4%的女性会患上这种病。卵巢癌发病率仅次于宫颈癌和宫体癌而列居第三位，约占女性全身恶性肿瘤的4%。但卵巢癌致死率位居各类妇科肿瘤的首位。由于卵巢癌临床早期无明显症状，加上鉴别卵巢癌法人组织类型及良恶性的难度，所以在卵巢癌行剖腹探查术中发现肿瘤局限于卵巢的患者比例很低，约为30％，而近70%的患者已扩散到子宫双侧附件，大网膜及盆腔各器官。换句话说，目前卵巢癌无论在诊断还是在治疗上都是难题。据临床资料统计，如果卵巢癌发现得早，90%的病人都能活下来；一旦癌细胞扩散到卵巢，卵巢癌的五年生存率就低于30%。

2、mirna是一种非编码小rna，其在许多肿瘤中存在异常表达。研究表明，mirna参与了这些相关肿瘤发生发展的相关基因的调控，是潜在的肿瘤诊断和预后判断的生物标志物。近年来，多项研究表明mirna在卵巢癌中有特定的表达并用于卵巢癌诊断。但是这些mirna的卵巢癌诊断敏感性和特异性都有待进一步提高。为了更好的服务卵巢癌患者的诊断，非常有必要开发诊断灵敏度和特异性理想的用于卵巢癌诊断产品的mirna为生物标志物，为卵巢癌患者的确诊和可靠治疗方案的选择更好地提供参考依据。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的缺陷，本发明提供了卵巢癌诊断敏感性和特异性比较理想的mirna作为生物标志物在诊断卵巢癌中的应用，协助临床医生判断提供生物样本的受试者是否患有卵巢癌，或者判断受试者是否存在患有卵巢癌的风险，便于迅速了解患者具体病情，及时制定针对性强的个体化精准医疗方案。

2、为了达到上述目的，本发明提供生物样本中mirna作为生物标志物在诊断卵巢癌中的应用，所述mirna为hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057、has-mir-1273g-3p和has-mir-642a-5p中的至少1种。

3、本发明人在研究过程中，通过对符合伦理要求的受试者的严格入组和评估，分别提取卵巢癌患者以及正常人的血浆外泌体中的mirna，结合基因芯片高通量筛选出血浆外泌体中表达差异显著的6条mirna(hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057、has-mir-1273g-3p和has-mir-642a-5p)，进一步通过q-pcr技术对大样本进行验证，结果表明6条mirna (hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057、has-mir-1273g-3p和has-mir-642a-5p)在卵巢癌患者的血浆外泌体中显著上调，且与卵巢癌组织具有较高的一致性，说明这6条mirna中的一条或几条可以作为卵巢癌生物标志物，进一步用于卵巢癌诊断产品的制备。

4、本发明还提供了生物样本中mirna作为生物标志物在开发和/或制备用于卵巢癌诊断用途产品中的应用，其特征在于，所述mirna为hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057、has-mir-1273g-3p和has-mir-642a-5p中的至少1种。

5、在其中一个实施例中，所述mirna包括hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116和hsa-mir-8057的联用。

6、在其中一个实施例中，所述mirna包括hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057和has-mir-1273g-3p的联用。

7、在其中一个实施例中，所述mirna包括hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057和has-mir-642a-5p的联用。

8、在其中一个实施例中，所述mirna包括hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057、has-mir-1273g-3p和has-mir-642a-5p的联用。

9、在其中一个实施例中，所述卵巢癌包括浆液性瘤、粘液性瘤、子宫内膜样瘤、透明细胞瘤、 纤维上皮瘤(又称勃勒纳瘤)、混合型上皮瘤等或转移性癌。

10、本发明还提供了一种用于诊断卵巢癌的产品，所述产品包括：用于检测受试者生物样本中所述mirna表达水平的试剂。

11、在其中一个实施例中，所述用于检测生物样本中所述mirna表达水平的试剂包括：提取血浆外泌体的试剂、提取血浆外泌体rna的试剂、rna反转录试剂和rna定量检测试剂。

12、在其中一个实施例中，所述生物样本为血浆。

13、本发明还提供了一种诊断卵巢癌的系统，该系统包括：

14、分析装置：用于检测待诊断对象生物样本中所述mirna的表达水平，输入评估模型进行诊断分析；

15、输出装置：用于输出上述诊断结果。

16、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

17、本发明提供了mirna作为生物标志物在诊断卵巢癌中的应用，协助临床医生判断提供生物样本的受试者是否患有卵巢癌，或者判断受试者是否存在患有卵巢癌的风险，便于临床医生迅速了解患者具体病情，及时制定针对性强的个体化精准医疗方案。

技术特征：

1.检测生物样本中mirna表达水平的试剂在制备用于卵巢癌的诊断用途的产品中的应用，其特征在于，所述mirna包括hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116和hsa-mir-8057。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述mirna为hsa-mir-6509-3p、hsa-mir-4772-3p、hsa-mir-3116、hsa-mir-8057、has-mir-1273g-3p和has-mir-642a-5p。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的应用，其特征在于，所述卵巢癌包括浆液性瘤、粘液性瘤、子宫内膜样瘤、透明细胞瘤、 纤维上皮瘤(又称勃勒纳瘤)、混合型上皮瘤等或转移性癌。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：收集血浆，提取血浆外泌体，提取血浆外泌体中的mirna，检测权利要求1-2中任一项所述mirna的表达水平。

5.一种用于卵巢癌的诊断用途的产品，其特征在于，该产品包括：用于检测生物样本中权利要求1-2中任一项所述mirna表达水平的试剂，所述用于检测生物样本中所述mirna表达水平的试剂包括：提取血浆外泌体的试剂、提取血浆外泌体rna的试剂、rna反转录试剂和rna定量检测试剂。

6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述生物样本为血浆。

7.一种诊断卵巢癌的系统，其特征在于，该系统包括：

技术总结
本发明公开了一种生物样本中miRNA作为生物标志物在诊断卵巢癌中的应用。所述miRNA为hsa‑miR‑6509‑3p、hsa‑miR‑4772‑3p、hsa‑miR‑3116、hsa‑miR‑8057、has‑miR‑1273g‑3p和has‑miR‑642a‑5p中的至少1种。该应用能够协助临床医生判断提供生物样本的受试者是否患有卵巢癌，或者判断受试者是否存在患有卵巢癌的风险，便于迅速了解患者具体病情，及时制定针对性强的个体化精准医疗方案。

技术研发人员：童云广,丁小青
受保护的技术使用者：杭州奥明医学检验实验室有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12