一种改造的芋螺多肽及其制备方法和应用与流程

本发明属于化妆品制备，具体涉及一种改造的芋螺多肽及其制备方法和应用。

背景技术：

1、目前医美行业广泛使用肉毒杆菌(botox)进行皮肤抗皱。其抗皱机理是通过阻断神经与肌肉之间的信号传递，减少肌肉牵拉而引起的动态表情纹。然而，并非所有人在注射botox后均可达到除皱的效果，同时还可能伴有面部肌肉麻痹无力，肌肉萎缩，吞咽困难等不良反应。因此改造、合成新型的肽类祛皱产品具有广阔的应用前景。

2、芋螺毒素是从芋螺属(conus)的毒液中分离纯化出的一组生物活性多肽，又称芋螺肽。芋螺毒素大多由10～40个氨基酸残基组成，含有一个或多个二硫键，具有分子质量小、作用靶点专一及活性强等优点。它们能特异性地作用于电压门控离子通道和配体门控离子通道，是离子通道研究的重要分子探针，也是开发新型药物的模板。

3、根据芋螺毒素的药理学作用靶点，可分为α、μ、ω、κ、δ、ψ、σ、ρ、γ、加压素、惊厥剂和睡眠肽等药理家族。其中μ-芋螺毒素能专一阻断电压门控钠离子通道，进而抑制动作电位的产生。μ-芋螺毒素的二硫键骨架连接方式为“c1-c4，c2-c5，c3-c6”，目前已分离到20多种μ-芋螺毒素，它们主要作用于骨骼肌钠通道nav1.4，同时也可以作用于脑钠通道nav1.2，心肌钠通道nav1.5和痛觉相关钠通道nav1.7，nav1.8。

4、μ-芋螺毒素在骨骼肌钠通道nav1.4上的显著的效果，可以发挥非常强效的肌肉松弛作用，即迅速的抗皱效果。目前已经有商品化的芋螺抗皱多肽—xep-018。在各种抗衰老的个人护理品中均可应用，例如：眼部护理，可明显去除眼部皱纹和眼角鱼尾纹；面部护理，可明显去除前额由于肌肉收缩而产生的皱纹。

5、目前，现有的μ-芋螺多肽用于药品、化妆品等产品时存在如下缺陷：

6、(1)对骨骼肌钠通道nav1.4的过度抑制导致面部肌肉僵硬瘫痪；

7、(2)对于骨骼肌、心肌钠通道的抑制造成的正常膜电信号的紊乱，产生严重不良反应。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种改造的芋螺多肽及其制备方法和应用，本发明的改造的芋螺多肽可以避免对骨骼肌钠通道nav1.4的过度抑制导致面部肌肉僵硬瘫痪，同时，还显著降低了对心肌钠通道、脑钠通道抑制的风险。

2、本发明提供了一种改造的芋螺多肽，所述改造的芋螺多肽的氨基酸序列如seq idno.1所示。

3、优选的，所述改造的芋螺多肽的n端经乙酰化修饰。

4、优选的，所述改造的芋螺多肽的等电点为9.01；所述改造的芋螺多肽的相对分子质量为2496.92da。

5、本发明还提供了上述方案所述的改造的芋螺多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用固相合成的方法或原核重组表达的方法合成改造的芋螺多肽。

6、本发明还提供了上述方案所述的改造的芋螺多肽或者所述的制备方法制备得到的改造的芋螺多肽在制备抗皱和/或祛皱的产品中的应用。

7、本发明还提供了上述方案所述的改造的芋螺多肽或者所述的制备方法制备得到的改造的芋螺多肽在制备钠离子通道抑制产品中的应用。

8、优选的，所述产品包括化妆品和/或药品。

9、优选的，所述钠离子通道包括骨骼肌钠离子通道、心肌钠离子通道和脑钠离子通道中的一种或几种。

10、本发明还提供了一种抗皱和/或祛皱的化妆品，包括上述方案所述的改造的芋螺多肽或者所述的制备方法制备得到的改造的芋螺多肽。

11、优选的，所述化妆品还包括化妆品辅料和/或其他化妆品原料；所述化妆品辅料包括保湿剂、乳化剂、矿物油、植物油、增稠剂、ph调节剂和防腐剂中的一种或几种；所述其他化妆品原料包括其他多肽物质、植物提取物、细胞因子和维生素中的一种或几种。

12、本发明提供了一种改造的芋螺多肽，所述改造的芋螺多肽的氨基酸序列如seq idno.1所示。本发明的改造的芋螺多肽是在野生型的μ-芋螺多肽(μ-conotoxin)piiia的基础上进行氨基酸残基改造，具体是对野生型μ-芋螺多肽piiia上选择和骨骼肌nav1.4通道有相互作用的第2位、第12位精氨酸r同时改造为丙氨酸a；同时为了保持等电点稳定和靶点专一，将第1、15位谷氨酰胺q改造为天冬酰胺n，第3位亮氨酸改造为异亮氨酸，第17位赖氨酸k改造为精氨酸r，进而得到设计改造的芋螺多肽yuluo19。本发明在野生型的μ-芋螺多肽piiia上进行氨基酸残基改造，适度弱化了μ-芋螺多肽对钠通道的阻滞作用，同时兼顾在酸性和碱性条件下保持稳定，保持了等电点稳定和靶点专一。本发明提供的改造的芋螺多肽兼具稳定、生产成本低等特点。经过改造和修饰后的芋螺多肽保持了较强的抗皱功能，采用改造后的芋螺多肽可以避免对骨骼肌钠通道nav1.4的过度抑制导致面部肌肉僵硬瘫痪，同时，还显著降低了对心肌钠通道、脑钠通道抑制的风险，易于透膜吸收。

技术特征：

1.一种改造的芋螺多肽，其特征在于，所述改造的芋螺多肽的氨基酸序列如seq idno.1所示。

2.根据权利要求1所述的改造的芋螺多肽，其特征在于，所述改造的芋螺多肽的n端经乙酰化修饰。

3.根据权利要求1所述的改造的芋螺多肽，其特征在于，所述改造的芋螺多肽的等电点为9.01；所述改造的芋螺多肽的相对分子质量为2496.92da。

4.权利要求1～3任意一项所述的改造的芋螺多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用固相合成的方法或原核重组表达的方法合成改造的芋螺多肽。

5.权利要求1～3任意一项所述的改造的芋螺多肽或者权利要求4所述的制备方法制备得到的改造的芋螺多肽在制备抗皱和/或祛皱的产品中的应用。

6.权利要求1～3任意一项所述的改造的芋螺多肽或者权利要求4所述的制备方法制备得到的改造的芋螺多肽在制备钠离子通道抑制产品中的应用。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述产品包括化妆品和/或药品。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述钠离子通道包括骨骼肌钠离子通道、心肌钠离子通道和脑钠离子通道中的一种或几种。

9.一种抗皱和/或祛皱的化妆品，包括权利要求1～3任意一项所述的改造的芋螺多肽或者权利要求4所述的制备方法制备得到的改造的芋螺多肽。

10.根据权利要求9所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品还包括化妆品辅料和/或其他化妆品原料；所述化妆品辅料包括保湿剂、乳化剂、矿物油、植物油、增稠剂、ph调节剂和防腐剂中的一种或几种；所述其他化妆品原料包括其他多肽物质、植物提取物、细胞因子和维生素中的一种或几种。

技术总结
本发明提供了一种改造的芋螺多肽及其制备方法和应用，属于化妆品制备技术领域。本发明在野生型的μ‑芋螺多肽PIIIA的基础上进行氨基酸残基改造，适度弱化了μ‑芋螺多肽对钠通道的阻滞作用，同时兼顾在酸性和碱性条件下保持稳定，保持了等电点稳定和靶点专一。本发明提供的改造的芋螺多肽兼具稳定、生产成本低等特点。经过改造和修饰后的芋螺多肽保持了较强的抗皱功能，采用改造后的芋螺多肽可以避免对骨骼肌钠通道Nav1.4的过度抑制导致面部肌肉僵硬瘫痪，同时，还显著降低了对心肌钠通道、脑钠通道抑制的风险，易于透膜吸收。

技术研发人员：赖仞,魏辅文,王爱丽,周文良
受保护的技术使用者：南方海洋科学与工程广东省实验室（广州）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12