本发明涉及有机物质提取,特别涉及一种从千里光中提取化合物的方法及其应用。
背景技术:
1、由烟草花叶病毒(tobacco mosa i c v i rus,tmv)引起的花叶病是烟草生产上分布最广、发生最为普遍的一类病害,除烟草之外,tmv还可以侵染番茄、辣椒、马铃薯等多种茄科植物,其寄主范围广,65科超过885种植物均可受其侵染,烟草及其他农作物感染tmv后,叶片叶绿素被破坏,光合作用减弱,生长受抑制,造成植株生长延缓,畸形、矮化,甚至死亡。目前在实践中只有少数抗病毒药物可用,几乎没有任何药剂可以完全有效的控制tmv。
2、而化学农药的滥用会导致及生态环境恶化和生物多样性水平降低等一系列问题,同时危害着人类的健康,而传统农艺措施对植物病毒病的防治效果甚微,投入也较高。因此开发高效、低毒的新型抗tmv药剂迫在眉睫。植物是活性化合物的宝库,其产生的次生代谢物超过40万种,其中不乏植物长期进化对抗外界病原物侵染的防御物质。从植物宝库中发掘高效、具有不同作用机制的抗tmv化学防御物质,是一条可行的开发植物病毒抑制剂的研究路线。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种从千里光中提取化合物的方法及其应用,从千里光中分离出生物碱类化合物3-吲哚甲醛和单萜类化合物香茅醇的制备方法和在抗烟草花叶病毒药物应用,解决缺少高效、低毒的新型抗tmv药剂的问题。
2、本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:
3、一种从千里光中提取化合物的方法,从千里光中提取化合物3-吲哚甲醛和香茅醇。
4、进一步的,包括如下步骤:
5、步骤一、以千里光地上部分为原料,干燥后粉碎,采用95%乙醇回流提取3次,减压浓缩至浸膏状;
6、步骤二、将乙醇提取物用蒸馏水溶解后用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取三次得到萃取物,乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱分离;
7、步骤三、以石油醚~乙酸乙酯在体积比为50:1-1:1的范围内进行梯度洗脱,得到七个流份fr1~fr7;
8、步骤四、选取fr6经硅胶柱层析,以石油醚~乙酸乙酯在体积比为30:1~2:1的范围内进行梯度洗脱,得到fr6.1~fr6.19;
9、步骤五、选取fr6.17采用葡聚糖凝胶色谱划段,通过半制备液相色谱分析后用葡聚糖凝胶色谱纯化得到3-吲哚甲醛;
10、步骤六、选取fr5采用mci小孔树脂除色素,以甲醇~水在体积比为20%~100%的范围内进行梯度洗脱,90%部分采用葡聚糖凝胶色谱划段,经硅胶柱层析,以石油醚~乙酸乙酯在体积比为100:1~5:1的范围内进行梯度洗脱,得到香茅醇。
11、进一步的,步骤二中的硅胶粒度为100-200目。
12、进一步的,步骤五中,划段时所使用的葡聚糖凝胶色谱为体积比为1:1的氯仿~甲醇,纯化时所使用的葡聚糖凝胶色谱为甲醇。
13、进一步的,步骤六中所使用的葡聚糖凝胶色谱为甲醇。
14、本发明所述的化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中应用。
15、综上所述,本发明具有以下有益效果:
16、本发明提出了从千里光中分离出生物碱类化合物3-吲哚甲醛和单萜类化合物香茅醇的制备方法和在抗烟草花叶病毒药物应用,经活性测试表明,3-吲哚甲醛对烟草花叶病毒初侵染的保护作用最强,香茅醇对感染tmv的心叶烟治疗作用最强,均高于阳性对照组宁南霉素的抑制率。3-吲哚甲醛和香茅醇结构简单,且具有较好的抗毒活性,提取分离和后续的人工合成容易实现可作为抗烟草花叶病毒的先导化合物,用于抗烟草花叶病毒药物制剂研发。
1.一种从千里光中提取化合物的方法,其特征在于:从千里光中提取化合物3-吲哚甲醛和香茅醇。
2.根据权利要求1所述的一种从千里光中提取化合物的方法,其特征在于:包括如下步骤:
3.根据权利要求2所述的一种从千里光中提取化合物的方法,其特征在于:步骤二中的硅胶粒度为100-200目。
4.根据权利要求2所述的一种从千里光中提取化合物的方法,其特征在于:步骤五中,划段时所使用的葡聚糖凝胶色谱为体积比为1:1的氯仿~甲醇,纯化时所使用的葡聚糖凝胶色谱为甲醇。
5.根据权利要求2所述的一种从千里光中提取化合物的方法,其特征在于:步骤六中所使用的葡聚糖凝胶色谱为甲醇。
6.根据权利要求1所述的方法提取到的化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中应用。