靶向PABPC4的siRNA及其在肝癌治疗中的应用

本发明属于生物医药领域，具体涉及靶向pabpc4的sirna及其在肝癌治疗中的应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、转录因子myc的异常活化可导致多种肿瘤的发生；其中，超过30％以上的肝细胞肝癌(hcc)表现出癌基因myc的异常活化；然而，特异性靶向myc的小分子抑制剂的开发至今没有获得成功。由于myc激活导致的基因表达失调是肿瘤形成的关键驱动因素，并可能对特定转录程序产生依赖，深度挖掘肝癌发生、发展过程中myc以来的关键分子和通路，寻找于myc异常活化相关联的协同致死策略，是实现myc特异的肝癌靶向治疗的新思路。

3、大多数真核mrna 3`端的poly(a)-尾在其稳定性、核转运和翻译中起着关键作用。这些作用在很大程度上是由poly(a)结合蛋白(pabps)介导的，pabpcs参与rna生物发生和转录翻译功能。人类细胞中共表达5种pabp蛋白，pabp1、pabpc3、pabp5、pabpc1l和ipabp。ipabp(又称pabpc4)是一种在活化的t细胞中表达上调的蛋白，也是一种在活化的血小板表面表达的蛋白，其mrna也在其他组织中表达。pabpc4蛋白在多种肿瘤中高表达，包括结肠癌、肺腺癌、三阴性乳腺癌和肝细胞肝癌。有研究证明pabpc4能够促进三阴性乳腺癌的生长和转移，但是，目前关于pabpc4在hcc中的作用机制探讨甚少。

技术实现思路

1、为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供靶向pabpc4的sirna及其在肝癌治疗中的应用，本发明通过高效抑制pabpc4表达水平，应用于肝癌治疗。

2、为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

3、本发明为了确认pabpc4蛋白水平与myc核染色的相关性，对85名肝癌患者的肿瘤样本进行了免疫组织化学染色，确定了pabpc4表达水平与myc的核阳性具有显著正相关性；其次，筛选了一系列针对pabpc4的sirna，转染肝癌细胞后，通过荧光定量pcr的方法检测sirna沉默pabpc4的效率，同时采用免疫组化染色、cck-8、western blot等实验方法检测sirna对肝癌细胞增殖、克隆的影响，结果显示多条sirna转染对pabpc4具有较高的沉默效率，可显著抑制myc和pabpc4高表达的肝癌细胞的增殖与克隆能力，即显著抑制myc高活性分子亚型肝癌的进展。

4、本发明的第一个方面，本发明提供了能够高效抑制pabpc4基因的sirna，其序列选自seq id no.1-2或3-4或5-6中的一组或多组。

5、本发明提供的sirna使肝癌细胞中pabpc4基因的表达水平下调50％以上。

6、优选的，当sirna的序列为seq id no.3-4时，抑制pabpc4基因表达效果更好。

7、本发明的第二个方面，提供一种靶向pabpc4基因的sirna在制备用于治疗肝癌的药物中的应用，所述sirna的序列选自seq id no.1-2或3-4或5-6中的一组或多组。

8、优选的，所述sirna的序列选自seq id no.3-4。

9、优选的，所述靶向pabpc4基因的sirna通过抑制肝癌细胞的增殖和克隆达到治疗肝癌的目的。

10、优选的，所述肝癌为myc高活性分子亚型肝癌。

11、发明的第三个方面，提供一种用于治疗肝癌的药物制剂，该药物制剂包括sirna或其核酸序列修饰物及载体，所述sirna或其核酸序列修饰物抑制pabpc4基因的表达；

12、所述sirna的序列选自seq id no.1-2或3-4或5-6中的一组或多组。

13、本发明提供的用于治疗肝癌(例如hcc)的药物制剂中，所述核酸序列修饰物是通过对所述sirna进行任意核苷酸的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或多种修饰而获得的。

14、优选的，所述载体选自病毒、纳米颗粒、胆固醇或脂质体。

15、优选的，所述肝癌为myc高活性分子亚型肝癌。

16、本发明的有益效果为：

17、本发明通过靶向pabpc4基因的sirna降低pabpc4表达水平，能够有效抑制肝癌细胞的增殖、克隆形成能力，对于开发新的抗myc和pabpc4高表达的肝癌基因药物和提高myc和pabpc4高表达的肝癌的治疗效果有重要的意义，具有显著的应用前景和经济价值。

技术特征：

1.一种sirna，其特征在于：该sirna抑制pabpc4基因的表达；

2.根据权利要求1所述的sirna，其特征在于：所述sirna使肝癌细胞中pabpc4基因的表达水平下调50％以上。

3.根据权利要求1所述的sirna，其特征在于：所述sirna的序列为seq id no.3-4。

4.靶向pabpc4基因的sirna在制备用于治疗肝癌的药物中的应用，所述sirna的序列选自seq id no.1-2或3-4或5-6中的一组或多组。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述sirna的序列选自seq id no.3-4。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述靶向pabpc4基因的sirna通过抑制肝癌细胞的增殖和克隆达到治疗肝癌的目的。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肝癌为myc高活性分子亚型肝癌。

8.一种用于治疗肝癌的药物制剂，其特征在于：该药物制剂包括sirna或其核酸序列修饰物及载体，所述sirna或其核酸序列修饰物抑制pabpc4基因的表达；

9.根据权利要求8所述的药物制剂，其特征在于：所述核酸序列修饰物是通过对所述sirna进行任意核苷酸的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或多种修饰而获得的；

10.根据权利要求8所述的药物制剂，其特征在于：所述肝癌为myc高活性分子亚型肝癌。

技术总结
本发明公开了靶向PABPC4的siRNA及其在肝癌治疗中的应用，属于生物医药领域。确定了PABPC4表达水平与MYC的核阳性具有显著相关性，筛选了一系列针对PABPC4的siRNA，转染肝癌细胞后，证实利用siRNA靶向抑制ABPC4的表达可显著抑制肝癌细胞的增殖与克隆能力，可显著抑制MYC和PABPC4高表达的，对于开发新的抗MYC和PABPC4高表达的肝癌基因药物和提高MYC和PABPC4高表达的肝癌的治疗效果有重要的意义，具有显著的应用前景和经济价值。

技术研发人员：袁得天,李石洋,张鹏,梁金媛
受保护的技术使用者：山东大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13