本发明属于疫苗,具体涉及一种自组装纳米颗粒蛋白、非洲猪瘟多价疫苗及其制备方法和应用。
背景技术:
1、接种疫苗是预防传染病最有效的武器,是人类健康的主要课题之一。疫苗一般通过激活适当的免疫反应来抵抗疾病,但传统疫苗的免疫原性低、稳定性差、需要连续多次免疫才能发挥效用,在实际应用中有一定的局限性。随着现代技术的发展,新型疫苗的研发已成为时下研究的热点,候选疫苗的数量正在逐步增加。
2、纳米颗粒疫苗近年来作为疫苗领域的研究热点,其赋予抗原超高的抗原递呈和免疫原性受到人们的广泛关注。纳米颗粒疫苗包括病毒样颗粒、自组装蛋白质、纳米胶束、脂质体、无机纳米颗粒和聚合物纳米材料。其中自组装蛋白质纳米颗粒是纳米颗粒疫苗中很有希望的候选材料。自组装蛋白质纳米颗粒的典型例子包括铁蛋白家族蛋白质、丙酮酸脱氢酶(e2)和病毒样颗粒(vlp),它们在纳米疫苗的开发中显示出巨大的潜力。但是,在作为疫苗佐剂的研究中,自组装蛋白在制备多价疫苗方面还有很大的提升空间。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种自组装纳米颗粒蛋白、非洲猪瘟多价疫苗及其制备方法和应用,本发明的自组装纳米颗粒蛋白能够用于制备多价疫苗。
2、本发明提供了一种自组装纳米颗粒蛋白,氨基酸序列如seq id no.1所示。
3、本发明还提供了一种纳米载体,所述纳米载体由所述自组装纳米颗粒蛋白的n末端连接共价键a得到;所述共价键a的氨基酸序列如seq id no.2所示。
4、优选的,所述自组装纳米颗粒蛋白和共价键a通过柔性氨基酸连接;所述柔性氨基酸的氨基酸序列如seq id no.3所示。
5、本发明还提供了上述方案所述的自组装纳米颗粒蛋白或者所述的纳米载体在制备纳米颗粒疫苗中的应用。
6、本发明还提供了一种免疫原性复合物,包括上述方案所述纳米载体和特征性抗原单元;所述特征性抗原单元由特征性抗原的n末端连接共价键b得到;所述共价键b能够和共价键a通过酰胺键结合。
7、优选的,所述特征性抗原和共价键b通过柔性氨基酸连接;所述柔性氨基酸的氨基酸序列如seq id no.3所示。
8、优选的,所述共价键b的氨基酸序列如seq id no.4所示。
9、优选的,所述特征性抗原包括第一特征性抗原、第二特征性抗原、第三特征性抗原和第四特征性抗原中的一种或几种;
10、所述第一特征性抗原的氨基酸序列如seq id no.5所示;
11、所述第二特征性抗原的氨基酸序列如seq id no.6所示;
12、所述第三特征性抗原的氨基酸序列如seq id no.7所示;
13、所述第四特征性抗原的氨基酸序列如seq id no.8所示;
14、当所述特征性抗原包括第一特征性抗原、第二特征性抗原、第三特征性抗原和第四特征性抗原中的两种以上时,每种特征性抗原分别和共价键b连接。
15、本发明还提供了上述方案所述免疫原性复合物的制备方法,包括以下步骤:
16、将纳米载体和特征性抗原单元混合,自组装得到免疫原性复合物。
17、本发明还提供了上述方案所述的免疫原性复合物或者所述制备方法制备得到的免疫原性复合物在制备纳米颗粒疫苗中的应用。
18、优选的,所述纳米颗粒疫苗包括非洲猪瘟纳米颗粒疫苗。
19、本发明还提供了一种纳米颗粒疫苗,包含上述方案所述的免疫原性复合物或者所述制备方法制备得到的免疫原性复合物。
20、本发明还提供了成套试剂盒,包含上述方案所述的纳米颗粒疫苗以及用于接种所述纳米颗粒疫苗的容器。
21、本发明提供了一种自组装纳米颗粒蛋白,氨基酸序列如seq id no.1所示。本发明的自组装纳米颗粒蛋白能够用于制备纳米颗粒疫苗,本发明的自组装纳米颗粒蛋白上允许引入目标抗原,并在不破坏抗原结合的情况下实现多价性,用以构建多价疫苗。
1.一种自组装纳米颗粒蛋白,其特征在于,氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.一种纳米载体,其特征在于,所述纳米载体由所述自组装纳米颗粒蛋白的n末端连接共价键a得到;所述共价键a的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.根据权利要求2所述的纳米载体,其特征在于,所述自组装纳米颗粒蛋白和共价键a通过柔性氨基酸连接;所述柔性氨基酸的氨基酸序列如seq id no.3所示。
4.权利要求1所述的自组装纳米颗粒蛋白或者权利要求2或3所述的纳米载体在制备纳米颗粒疫苗中的应用。
5.一种免疫原性复合物,包括权利要求2或3所述纳米载体和特征性抗原单元;所述特征性抗原单元由特征性抗原的n末端连接共价键b得到;所述共价键b能够和共价键a通过酰胺键结合。
6.根据权利要求5所述的免疫原性复合物,其特征在于,所述特征性抗原和共价键b通过柔性氨基酸连接;所述柔性氨基酸的氨基酸序列如seq id no.3所示。
7.根据权利要求5或6所述的免疫原性复合物,其特征在于,所述共价键b的氨基酸序列如seq id no.4所示。
8.根据权利要求5所述的免疫原性复合物,其特征在于,所述特征性抗原包括第一特征性抗原、第二特征性抗原、第三特征性抗原和第四特征性抗原中的一种或几种;
9.权利要求5~8任意一项所述免疫原性复合物的制备方法,包括以下步骤:
10.权利要求5~8任意一项所述的免疫原性复合物或者权利要求9所述制备方法制备得到的免疫原性复合物在制备纳米颗粒疫苗中的应用。
11.根据权利要求10所述的应用,其特征在于,所述纳米颗粒疫苗包括非洲猪瘟纳米颗粒疫苗。
12.一种纳米颗粒疫苗,包含权利要求5~8任意一项所述的免疫原性复合物或者权利要求9所述制备方法制备得到的免疫原性复合物。
13.成套试剂盒,其特征在于,包含权利要求12所述的纳米颗粒疫苗以及用于接种所述纳米颗粒疫苗的容器。