一种改进的ELISA测试方法与流程

本发明实施例涉及生物测试，尤其涉及一种改进的elisa测试方法。

背景技术：

1、酶联免疫吸附测定（enzymelinked immunosorbent assay，elisa）技术，基于抗原-抗体的特异性和等比例行，是酶免疫测定技术，基本方法是将已知的抗原或抗体吸附（包被）在固相载体（聚苯乙烯微量反应板，也称酶标板）表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，加入相应的酶底物发生颜色反应，通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，通过颜色反应的深浅检测样本中相应抗体或抗原含量的检测技术。

2、elisa用到了免疫学原理和化学反应显色，待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液，将抗原或抗体结合到固相载体表面，从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量检测，也是检测抗原或抗体的最敏感技术之一。

3、然而，现有elisa检测缺点如下：重复性不好；受自身抗体、嗜异性抗体等干扰，易出现假阳性；不论仪器和手工操作，干扰因素较多。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中的问题，本发明提供一种改进的elisa测试方法，以提高检测精度，降低干扰因素。

2、本发明实施例提供了一种改进的elisa测试方法，包括：

3、采用酶联免疫吸附elisa测试方法配置测试样本液；

4、将所述测试样本液放入数字pcr设备，以通过数字pcr设备对所述测试样本液进行检测。

5、可选的，在采用酶联免疫吸附测试方法合成测试样本液之后，还包括：

6、将配置好的测试样本液加入数字pcr设备的测试管中，并将测试管盖上密封盖。

7、可选的，通过数字pcr设备对所述测试样本液进行检测，包括：

8、将测试样本液放入数字pcr设备中并装入测试芯片，以使测试样本液生成在数字pcr设备中生成油包水的小液滴；

9、通过荧光识别系统对所述小液滴中的荧光信号进行检测，以测得测试样本液中目标物数量。

10、本发明通过采用elisa和dpcr结合的技术检测，采用elisa配置好测试样本液，将测试样本液直接通过dpcr的液滴生成设备就可以进行检测，降低了检测成本，提高了检测精度，解决了elisa检测方案的重复性差和测试样本容易受到环境污染的问题。尤其当样本液提取量少的情况下，通过数字pcr技术生成数量50倍于elisa的微孔测试法的液滴，大大提高了检测精度；本发明中的液滴生成和检测同步完成，在短时间内可以实现对大量液滴的检测，检测速度和效率大大提高，降低了检测成本，有利于推广。此外，相较于直接采用dpcr进行检测的方案，采用elisa配置好测试样本液的步骤也简化了传统dpcr直接进行检测的步骤。

技术特征：

1.一种改进的elisa测试方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在采用酶联免疫吸附测试方法合成测试样本液之后，还包括：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，通过数字pcr设备对所述测试样本液进行检测，包括：

技术总结
本发明公开了一种改进的ELISA测试方法。其中，该方法包括：采用酶联免疫吸附测试方法配置测试样本液；将所述测试样本液放入数字PCR设备，以通过数字PCR设备对所述测试样本液进行检测。本发明通过采用ELISA和dPCR结合的技术检测，采用ELISA配置好测试样本液，将测试样本液直接通过dPCR的液滴生成设备进行检测，降低了检测成本，提高了检测精度，解决了ELISA检测方案的重复性差和测试样本容易受到环境污染的问题。

技术研发人员：陈谦,刘泓,赵俊岭,张路
受保护的技术使用者：苏州索真生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13