本发明涉及转染领域，特别涉及一种针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法。
背景技术：
1、细胞转染是一种将外源性dna、rna或蛋白质等分子导入到靶细胞内的过程，是生命科学研究中常用的基础技术之一。目前市面上针对哺乳动物细胞的瞬时转染有以下几种技术：钙磷共沉淀法(calcium phosphate transfection)：将dna与钙盐混合后添加到细胞培养基中，钙离子与dna形成复合物，进入细胞后释放dna，这种方法易于操作、成本低廉，但转染效率和稳定性较低，有毒性和细胞损伤的风险；磷脂体介导转染法(lipofection)：利用磷脂体载体将dna导入到细胞内，这种方法操作简单、转染效率高，但对于不同类型的细胞有一定的限制。离子束转染法(ion transfection)：利用高能离子束将dna导入细胞内，可以达到较高的转染效率，但设备昂贵，操作复杂，对细胞的伤害较大。电穿孔法(electroporation)：利用高压电场将dna导入到细胞内，可以达到高效的转染效果，但需要特殊的设备和技术，对于一些细胞类型和特定的实验条件有一定的限制；病毒介导转染法(virus-mediated transfection)：利用适当的病毒作为载体将dna导入到细胞内，这种方法效率高、稳定性好，但需要对病毒进行较严格的安全性检测和处理。也就是说，市面上的现有瞬时转染技术无法兼备成本和转染效率两个方面的因素。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，通过在细胞液中加入表达活性剂的方式，有效提高哺乳动物细胞expi293/expicho-s/cho-k1的瞬时表达量。
2、为实现以上目的，本技术方案提供了一种针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，包括以下步骤：
3、制作哺乳动物细胞的重组质粒dna；
4、将pei、重组质粒dna和瞬时转染培养基共同进行混合得到混合培养基，其中所述瞬时转染培养基内至少含有tween20和/或tween80；
5、将哺乳动物细胞培养在所述混合培养基中实现转染，所述哺乳动物细胞包括但不限于expi293/expicho-s/cho-k1。
6、相较于现有技术，本技术方案具有以下特点和有益效果：本方案针对哺乳动物细胞的瞬时转染技术，在瞬时转染培养基中添加有tween20和/或tween80，且严格控制tween20和/或tween80的浓度范围，通过增加膜通过性的方式来增加细胞转染的表达量，经过实验验证本方案的细胞转染的表达量可高达600～800mg/l。
1.一种针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，将重组基因片段克隆至质粒载体中，并加入对应哺乳动物细胞所需的调控元件得到重组质粒dna。
3.根据权利要求2所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，重组基因片段为重组蛋白或抗体蛋白，所述质粒载体选择为ptt5或者pcdna3.4。
4.根据权利要求1所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，所述瞬时转染培养基含有dmem/f12、离子、抗生素、tween20和/或tween80。
5.根据权利要求1所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，tween20的浓度范围为0.01％-0.1％。
6.根据权利要求1所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，tween20的浓度为0.02％或0.05％。
7.根据权利要求1所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，tween80的浓度范围为0.01％-0.1％。
8.根据权利要求1所述的针对哺乳动物细胞的高效瞬时转染的方法，其特征在于，tween80的浓度为0.02％或0.05％。