一种合子草皂苷K及其制备方法和用途

本发明属于药物，具体涉及一种合子草皂苷k及其制备方法和用途。

背景技术：

1、合子草(actinostemma lobatummaxim)，葫芦科(cucurbitaceae)合子草属一年生草本植物，始载于《本草拾遗》。其生长在路旁，山地草丛中或水边，经过历代医学研究，合子草主要是以全草及种子入药，具有清热解毒，利尿消肿，清热祛湿的功效，临床上以主治肾炎水肿、腹水肿胀、毒蛇咬伤及疳积初起等病症为主。

2、20世纪80年代初，日本学者藤丙稔大等人以葫芦科植物为研究对象，进行活性成分筛选过程中，从多种植物的全草和种子中共分离出19种皂苷单体化合物，主要为四环三萜类的皂苷类化合物，其中包括6种达玛烷型和2种巴卡烷型的合子草皂苷(actinostemmosides)，其结构与人参皂苷类似。

3、对于《合子草的化学成分研究》_刘芹中的合子草皂苷中的合子草皂苷a-g,然而现有文献均未指出其在制备降血糖药物的应用，并且也没有现有文献公开其对α-葡萄糖苷酶抑制活性的应用，并且也没有现有文献公开合子草皂苷k的化合物结构和制备降血糖药物以及对α-葡萄糖苷酶抑制活性方面的应用。

技术实现思路

1、针对问题，一方面，本发明提供了式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐：

2、

3、其中，r1选自羟基，r2选自氢、羟基，r3选自o-β-dglc基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基、甲基，r4选自甲基、o-β-dglc基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基，r5选自羟甲基、氢、ch2o-β-dglc基，r6选自甲基、羟甲基，r7选自甲基、羟甲基,r8选自羟基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基。

4、式ⅰ所示化合物参见表1所示，包括合子草皂苷a-d,g-h,j。

5、

6、进一步地，所述化合物如式ⅱ所示：

7、

8、其中，r2选自氢、羟基，r3选自o-β-dglc基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基，r7选自羟甲基、甲基。

9、进一步地，所述化合物如式ⅲ所示：

10、

11、本发明的另一方面提供一种组合物，包括上述两项或两项以上所述的化合物或其药学上可以接受的盐。

12、本发明的另一方面提供一种提取物，包括上述两项或两项以上所述的化合物或其药学上可以接受的盐。

13、本发明的另一方面还提供了一种化合物或其药学上可以接受的盐的制备方法：

14、s1:取合子草干燥全草4.2kg用70％乙醇溶液浸渍2d，用10倍量的70％乙醇溶液浸提2次，每次12h，合并两次提取液，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到醇提物固体浸膏。将浸膏在适量纯化水中溶解，用乙酸乙酯萃取3次(乙酸乙酯与水的体积比为1:1)，将萃取后剩下的水溶性部分合并，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取浸膏300g和水层浸膏785g。

15、s2:取水层浸膏，加入适量的甲醇溶液溶解。称取ods(120-50目)约200g放于蒸发皿中，将蒸发皿置于水浴锅上加热，边加热边向ods中加入样品溶液，拌样。称取ods(120-50目)(约水部位样品重量的3倍量)干法装柱(8.5*65cm),加入一定量甲醇试剂冲柱并多次冲柱除去气泡。将拌样ods加入层析柱中，分三次上样，用甲醇-水梯度体系依此进行洗脱。梯度体系为甲醇:水＝20:80、60:40、100％甲醇。将洗脱出来的馏分减压浓缩并用薄层色谱展开，合并具有相似班点及相同比移值的洗脱样品，将洗脱样品通过超高效液相-质谱联用色谱仪(uplc-ms)分析检测，合并具有相同吸收峰的洗脱样品，得到的馏分分别为fr.1、fr.2和fr.3。

16、s3:fr.2经sephadexlh-20凝胶柱色谱分离，二氯甲烷:甲醇＝1:1洗脱，薄层色谱(tlc)点板合样为4个部分，分别为fr.2.1,fr.2.2,fr.2.3和fr.2.4；fr.2.2经半制备hplc梯度洗脱(c18，乙腈-水，26:74-56:44，30min，10ml/min)得到3个部分，分别为fr.2.2.1，fr.2.2.2和fr.2.2.3；fr.2.2.2经半制备hplc分离(c18，乙腈-水，28:72，10ml/min)得到6个部分，分别为fr.2.2.2.1，fr.2.2.2.2，fr.2.2.2.3，fr.2.2.2.4，fr.2.2.2.5和fr.2.2.2.6；fr.2.2.2.4经半制备hplc分离(c18，乙腈-水，19:81，10ml/min)得到3个部分，分别为fr.2.2.2.4.1，fr.2.2.2.4.2和fr.2.2.2.4.3；fr.2.2.2.4.1经半制备hplc分离纯化(c18，乙腈-水，18:82，10ml/min)，过滤，重结晶，得到合子草皂苷k(tr＝48.2min，41.2mg)。

17、本发明的另一方面提供式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，优选的是，所述降血糖的药物为α-葡萄糖苷酶抑制剂，

18、

19、其中，r1选自羟基，r2选自氢、羟基，r3选自o-β-dglc基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基、甲基，r4选自甲基、o-β-dglc基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基，r5选自羟甲基、氢、ch2o-β-dglc基，r6选自甲基、羟甲基，r7选自甲基、羟甲基,r8选自羟基、o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基。

20、进一步地，式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其中r1选自羟基，r2选自氢，r3选自o-β-dglc基，r4选自甲基，r5选自羟甲基，r6选自甲基，r7选自甲基,r8选自羟基。

21、进一步地，式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其中r1选自羟基，r2选自羟基，r3选自o-β-dglc基，r4选自甲基，r5选自羟甲基，r6选自甲基，r7选自甲基,r8选自羟基。

22、进一步地，式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其中r1选自羟基，r2选自氢，r3选自o-β-dglc-(2-1)-α-l-rha基，r4选自甲基，r5选自羟甲基，r6选自甲基，r7选自羟甲基,r8选自羟基。

23、本发明的有益效果在于，本发明的获得了具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的一个新化合物，为未见文献报道的一种新的化合物，并确定了该化合物的结构，该化合物具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性，可以制成适合于临床使用的降血糖药物，也可作为先到化合物，对其构效关系进行进一步研究，合成一系列的降血糖药物和药物组合，更可以作为合子草药材及其制剂质量控制的指标成分，实现合子草药材及其制剂质量的稳定和可控，突破目前合子草研究开发的瓶颈。

技术特征：

1.式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐：

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可以接受的盐，其特征在于，所述化合物如式ⅱ所示：

3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可以接受的盐，所述化合物如式ⅲ所示：

4.一种组合物，包括权利要求1-3中两种或两种以上化合物或其药学上可以接受的盐。

5.一种提取物，包括权利要求1-4两项或两项以上所述的化合物或其药学上可以接受的盐。

6.一种提取物，其特征在于，所述提取物的制备方法包括：

7.式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，

8.根据权利要求7所述的式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其特征在于，其中r1选自羟基，r2选自氢，r3选自o-β-d glc基，r4选自甲基，r5选自羟甲基，r6选自甲基，r7选自甲基,r8选自羟基。

9.根据权利要求7所述的式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其特征在于，其中r1选自羟基，r2选自羟基，r3选自o-β-d glc基，r4选自甲基，r5选自羟甲基，r6选自甲基，r7选自甲基,r8选自羟基。

10.根据权利要求7所述的式ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其特征在于，其中r1选自羟基，r2选自氢，r3选自o-β-d glc-(2-1)-α-l-rha基，r4选自甲基，r5选自羟甲基，r6选自甲基，r7选自羟甲基,r8选自羟基。

技术总结
本发明提供了一种式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐：其中，R1选自羟基，R2选自氢、羟基，R3选自O‑β‑DGlc基、O‑β‑DGlc‑(2‑1)‑α‑L‑Rha基、甲基，R4选自甲基、O‑β‑DGlc基、O‑β‑DGlc‑(2‑1)‑α‑L‑Rha基，R5选自羟甲基、氢、CH2O‑β‑DGlc基，R6选自甲基、羟甲基，R7选自甲基、羟甲基,R8选自羟基、O‑β‑DGlc‑(2‑1)‑α‑L‑Rha基。本发明的有益效果在于，本发明的获得了具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的未见文献报道的一种新的化合物，并确定了该化合物的结构，该化合物具有良好的α‑葡萄糖苷酶抑制活性，可以制成适合于临床使用的降血糖药物，也可作为先导化合物，对其构效关系进行进一步研究，合成一系列的降血糖药物和药物组合，更可以作为合子草药材及其制剂质量控制的指标成分，突破目前合子草研究开发的瓶颈。

技术研发人员：李伟,房琳琳,唐云,梁雪慈
受保护的技术使用者：井冈山大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15