一种促进化脓隐秘杆菌生长的细菌培养基

本发明属于微生物培养基，具体涉及一种用于培养化脓隐秘杆菌快速生长的细菌培养基。

背景技术：

1、化脓隐秘杆菌是引起家畜乳房炎、子宫内膜炎、肺炎等感染性疾病的重要病原菌之一，给养殖业带来了较大的损失。据报道我国90％以上的奶牛子宫内膜炎由病原微生物引起，经鉴定其中23.5％的微生物是化脓隐秘杆菌。因此，深入研究和探索化脓隐秘杆菌与宿主的互作关系，不仅对防治奶牛子宫内膜炎具有指导意义，而且可为控制病原菌的传播提供重要理论依据。

2、作为一种兼性厌氧菌，化脓隐秘杆菌的生长增殖速度较慢，需要营养丰富的培养基。化脓隐秘杆菌的最适生长温度为37℃，血液和血清可促进其生长。产生的菌落透明，周围有溶血，大小为1mm。虽然含血液或血清的培养基能够培养化脓隐秘杆菌，但其生长速度较慢，很难在短时间内获得足够的细菌数量。而且由于培养基中添加大量血液/血清，给单纯的化脓隐秘杆菌扩繁培养带来了不确定因素，如引入细菌、病毒、支原体或衣原体等动物源性污染。

技术实现思路

1、本发明提供一种克服上述问题的无血液/血清的化脓隐秘杆菌的培养基，能够使化脓隐秘杆菌生长更快，在该细胞培养基上培养24小时即可产生可见菌落，培养40小时产生的菌落数显著高于其它含血液/血清的细菌培养基，且无外源性污染。

2、本发明首先提供一种用于培养化脓隐秘杆菌快速生长的培养基，所述的培养基是在基础培养基中添加有奶牛子宫内膜间质细胞破碎液；

3、所述的奶牛子宫内膜间质细胞破碎液，是将奶牛子宫内膜间质细胞超声破碎后获得的上清液；

4、更进一步的，所述的奶牛子宫内膜间质细胞破碎液在培养基中的添加的体积百分比浓度为0.1～0.5％；即以1000ml体积的溶液为例，在999ml的培养基中加入1ml细胞破碎液。

5、所述的基础培养基，其中包含有质量体积百分比浓度为0.5％的胰蛋白胨、0.25％的酵母提取物和0.5％的氯化钠；

6、本发明再一个方面还提供一种培养化脓隐秘杆菌的方法，是使用上述的培养基来进行培养；

7、所述的方法，是将化脓隐秘杆菌冻干菌种用含脑心浸液肉汤完全溶解复苏后，再接种到添加有奶牛子宫内膜间质细胞破碎液的培养基中进行培养，培养温度为37℃，振荡频率200～250r/min，培养24～48h。

8、本发明提供的培养基和培养方法，具有如下优点：

9、1)本发明提供的培养基，使化脓隐秘杆菌的生长状态良好，极大的促进了化脓隐秘杆菌的生长速度，能在短时间内获得足够多的化脓隐秘杆菌。

10、2)本发明提供的培养基排除了动物血清/血液引入细菌、病毒、支原体或衣原体污染的可能。

11、3)本发明提供的培养基配方简单、成本低，更利于化脓隐秘杆菌扩繁培养。

技术特征：

1.一种用于培养化脓隐秘杆菌快速生长的培养基，其特征在于，所述的培养基是在基础培养基中添加有奶牛子宫内膜间质细胞破碎液。

2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的奶牛子宫内膜间质细胞破碎液，是将奶牛子宫内膜间质细胞超声破碎后获得的上清液。

3.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的奶牛子宫内膜间质细胞破碎液在培养基中的添加的体积百分比浓度为0.1～0.5％。

4.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的基础培养基，其中包含有质量体积百分比浓度为0.5％的胰蛋白胨、0.25％的酵母提取物和0.5％的氯化钠。

5.一种培养化脓隐秘杆菌的方法，其特征在于，所述的方法是使用权利要求1-4任一项所述的培养基来培养化脓隐秘杆菌。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的方法是将化脓隐秘杆菌冻干菌种用含脑心浸液肉汤完全溶解复苏后，再接种到权利要求1-4任一项所述的培养基中进行培养。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的方法中培养温度为37℃，振荡频率200～250r/min，培养24～48h。

技术总结
本发明提供一种化脓隐秘杆菌的培养基，所述的培养基是在基础培养基中添加有奶牛子宫内膜间质细胞破碎液。本发明的培养基能够使化脓隐秘杆菌生长更快，在该细胞培养基上培养24小时即可产生可见菌落，培养40小时产生的菌落数显著高于其它含血液/血清的细菌培养基，且无外源性污染。

技术研发人员：付开强,闫雪莹,陈韩,郭月,仲佳兴,曹荣峰,朱士勇
受保护的技术使用者：青岛农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15