蔷薇属U6启动子及其应用

本发明涉及一种蔷薇属u6启动子及其应用，属于植物基因工程领域。

背景技术：

1、蔷薇属(rosa l.)隶属于蔷薇科(rosaceae)，世界各地约有200种。蔷薇属植物花期长，花色丰富，果实美丽，通常具有芳香，在全球范围内被广泛栽植和培育。

2、随着分子生物学技术的进步和植物遗传转化体系的完善，通过基因工程手段进行植物品质性状的定向改良已逐渐成为现实。利用基因编辑对植物进行定向诱变的技术发展迅速，crispr/cas9是包括植物和作物在内的许多生物体基因组编辑的简单而有效的工具，已经在水稻、玉米、小麦和番茄等作物中得到验证和应用。

3、u6启动子被广泛用于crispr/cas系统中sgrna引导序列的启动表达，以保证引导序列的结构特征。u6启动子具有种属特异性，使用转化物种本身或接近物种的u6启动子能取得更高的启动效率。然而，蔷薇属物种中克隆的u6启动子十分有限，这阻碍了基因编辑技术在蔷薇属植物中的应用。

4、为解决上述问题，本发明筛选获得了13个适用于构建蔷薇属植物crispr/cas系统的u6启动子，并通过鉴定筛选到一个活性较强的启动子。该启动子可为蔷薇属植物基因编辑技术的应用提供重要的启动子资源。

技术实现思路

1、本发明的目的之一在于提供一种蔷薇属u6启动子。

2、本发明的目的之二在于提供了包含上述启动子的基因表达盒、表达载体和宿主细胞。

3、本发明的目的之三在于公开上述启动子、基因表达盒、表达载体和宿主细胞在蔷薇属植物基因编辑技术领域中的应用。

4、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

5、本发明提供一种启动子，其特征在于，所述启动子的核酸序列如seq id no:8所示。

6、本发明还提供一种基因表达盒，其特征在于，所述表达盒含有上述的启动子。

7、本发明还提供一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有上述的表达盒。

8、本发明还提供一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有上述的表达载体。

9、在一些实施方案中，上述宿主细胞为原核生物细胞。

10、在一些实施方案中，上述宿主细胞为大肠杆菌或农杆菌细胞。

11、本发明还提供上述的启动子、基因表达盒、表达载体、宿主细胞在蔷薇属植物基因编辑中的应用。

12、与现有的技术相比，本发明的有益效果是：本发明获得一系列蔷薇属u6启动子，通过活性鉴定筛选到一个活性较强的启动子，该启动子序列并未收录在公开的数据库中，可用于蔷薇属植物基因编辑技术领域。

1.启动子，其特征在于，所述启动子的核酸序列如seq id no:8所示。

2.基因表达盒，其特征在于，所述表达盒含有权利要求1所述的启动子。

3.表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求2所述的表达盒。

4.宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求3所述的表达载体。

5.根据权利要求4所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为原核生物细胞。

6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌或农杆菌细胞。

7.权利要求1所述的启动子，权利要求2所述的基因表达盒，权利要3所述的表达载体，权利要求4-6所述的宿主细胞在蔷薇属植物基因编辑中的应用。