一种猪β-干扰素抗菌肽IFN7及其应用的制作方法

本发明涉及生物，尤其涉及一种猪β-干扰素抗菌肽ifn7及其应用。

背景技术：

1、大肠杆菌是世界范围内哺乳猪和断奶猪死亡的重要原因之一，是多种猪疾病的病原菌，可引起仔猪黄痢、白痢、水肿病，并可引起败血症、神经症状等。一般而言，在流行期间，由于缺乏被动保护，0~4日龄仔猪常发生大肠杆菌引起的新生仔猪腹泻。猪链球菌病是由不同群的链球菌引起的一种急性高热性人畜共患传染病。人类感染该病后，主要表现为败血症、脑膜炎、关节炎及化脓性淋巴结炎。猪感染后流行特点是仔猪以败血型和脑膜炎型为主，中、大猪以关节炎型为主，一年四季均可发病，传播迅速，死亡率高。

2、对猪大肠杆菌和链球菌病的治疗以抗生素为主，但近年来对猪源大肠杆菌和链球菌的抗药性严重，临床分离菌株多抗性较强，原有的抗生素药物已经无法达到杀灭致病菌的效果。因此寻找化学药物替代品也成为目前研究的一大热点。抗菌肽(amps)是指动物体内经诱导而产生的一类具有抗菌活性的碱性多肽物质，这类活性多肽多数具有强碱性、热稳定性以及广谱抗菌等特点。因此，抗菌肽被认为是抗生素的潜在替代品，在生物医药、饲料添加剂、食品防腐剂等领域有良好的应用前景。

3、干扰素是一类糖蛋白，它具有高度的种属特异性，负责保护宿主细胞免受病毒和细菌感染。有研究发现干扰素在抑菌过程中容易受到其它因素影响，从而导致抑菌活性不高。

4、因此，提供一种能有效抑制大肠杆菌和链球菌感染，同时具有良好稳定性的干扰素抗菌肽，具有重要的研究意义。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了提供了一种猪β-干扰素抗菌肽ifn7及其应用，解决了上述背景技术中的问题。

2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：提供猪β-干扰素抗菌肽ifn7。其氨基酸序列为yylsilqylk，如seqidno：1所示。

3、以猪β-干扰素为目标寻找其序列中的抗菌肽存在可行的理论依据。因此，我们以猪β-干扰素为蛋白模版，分别采用糜蛋白酶和胰蛋白酶进行模拟酶解，获得多肽片段序列。然后利用apd3在线服务器根据抗菌肽的电荷性和疏水性对猪β-干扰素蛋白序列筛选，然后通过swiss-model服务器对猪β-干扰素抗菌肽结构进行预测，发现了对大肠杆菌和乙型链球菌具有很强抗菌作用的抗菌肽序列yylsilqylk，命名为ifn7。

4、抗菌肽ifn7的分子量为1303.56 da，所带电荷为+1，总疏水性比为40％。

5、抗菌肽ifn7可以从以下作用对细菌造成破坏：一方面，抗菌肽ifn7破坏细菌细胞膜，改变细菌细胞膜的通透性，并抑制细胞膜生成，导致细菌死亡；另一方面，抗菌肽ifn7与细菌基因组dna相结合，抑制细菌dna的合成，从而导致细菌死亡。

6、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：提供一种猪β-干扰素抗菌肽ifn7在制备抗菌药物中的应用，该抗菌药物用于抑制和/或杀灭大肠杆菌和乙型链球菌中的一种或多种。

7、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是：提供一种抗菌药物，其有效成分包括猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

8、在本发明一较佳实施例中，所述抗菌药物的有效成分为猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

9、在本发明一较佳实施例中，所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭大肠杆菌和乙型链球菌中的一种或多种。

10、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之四是：提供一种饲料添加剂，其有效成分包括猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

11、在本发明一较佳实施例中，所述饲料添加剂的有效成分为猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

12、在本发明一较佳实施例中，所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭大肠杆菌和乙型链球菌中的一种或多种。

13、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之五是：提供一种食品防腐剂，其有效成分为猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

14、在本发明一较佳实施例中，所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭大肠杆菌和乙型链球菌中的一种或多种。

15、本发明的抗菌肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成，例如固相合成，并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化，例如高效液相色谱法。

16、实施本发明，具有如下有益效果：

17、本发明以猪β-干扰素为研究对象，并通过筛选，发现一个全新氨基酸序列的多肽ifn7。研究ifn7对大肠杆菌和乙型链球菌的抑菌活性。实验结果表明，该肽对大肠杆菌和乙型链球菌具有强烈的抑制作用，它的抑菌机理是首先破坏细菌细胞膜结构，改变细胞膜的通透性，导致胞内物质发生渗漏，然后与细菌基因组dna相结合，抑制细菌dna的合成，从而导致细菌死亡。本发明抗菌肽ifn7可用于制备抗菌药物、饲料添加剂及食品防腐剂。

技术特征：

1. 一种猪β-干扰素抗菌肽ifn7，其氨基酸序列如seq id no：1所示。

2.如权利要求1所述的猪β-干扰素抗菌肽ifn7在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭大肠杆菌、乙型链球菌中的一种或多种。

3. 一种抗菌药物，其特征在于：其有效成分包括猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

4. 如权利要求3所述的抗菌药物，其特征在于：其有效成分为猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

5. 一种饲料添加剂，其特征在于：其有效成分包括猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

6. 如权利要求5所述的饲料添加剂，其特征在于：其有效成分为猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

7.如权利要求5或6任一项所述的饲料添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭大肠杆菌、乙型链球菌中的一种或多种。

8. 一种食品防腐剂，其特征在于：其有效成分为猪β-干扰素抗菌肽ifn7，所述抗菌肽ifn7的氨基酸序列为seq id no：1。

9.如权利要求8所述的一种食品防腐剂，其特征在于：所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭大肠杆菌、乙型链球菌中的一种或多种。

技术总结
本发明公开了一种猪β‑干扰素抗菌肽IFN7，其氨基酸序列为YYLSILQYLK，抗菌肽IFN7的分子量为1303.56Da。实验证明，本发明抗菌肽IFN7对大肠杆菌、乙型链球菌能够产生了较强的抑制作用，可以用于制备治疗或预防由大肠杆菌、乙型链球菌引起疾病的药物、饲料添加剂，也可用于制备食品防腐剂。

技术研发人员：汪忠艳,吴革华
受保护的技术使用者：广州爱保农生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15