一种小麦条锈菌夏孢子保存的方法

本发明涉及专性寄生真菌的保存，特别是涉及一种小麦条锈菌夏孢子保存的方法。

背景技术：

1、由小麦条锈菌(puccinia striiformis f.sp.tritici)引起的小麦条锈病是全球小麦上最重要的病害之一，也是我国小麦上危害最重的病害之一。具有发生范围广、流行的频率高、病原菌毒性变异快和危害损失重等特点。小麦条锈菌是专性寄生菌，不能人工培养，只能在活体上寄生。用于研究时只能收集小麦叶片上产生的夏孢子，而夏孢子存活的时间一般较短，在干燥的室温环境下大约可存活1个月。因此，夏孢子的保存是小麦条锈病研究中的重要环节，以保证夏孢子具有较高的存活力和致病性。尤其是在小麦抗病遗传研究中，经常面临利用同一个病原菌小种在同一年内的不同时期对不同遗传群体或小麦品种进行抗性鉴定。目前，小麦条锈菌的保存有3种方法，第一种是将条锈菌在感病小麦上周年繁殖；第二种方法是将新鲜的夏孢子抽真空后封管然后液氮保存，该方法可以维持夏孢子活力5～8年；第三种方法是将干燥后的夏孢子真空封闭，然后在冷冻条件下(-20℃)保存，可以维持夏孢子活力3-4年。

2、上述三种方法各有其缺点或不足。方法一，由于条锈菌夏孢子的萌发最适宜温度范围是5-12℃，此方法需要在低温室内进行且每隔30d左右繁殖一次，耗费大量的人力、物力；方法二和三都需要特殊的抽真空和封管装置，且需要熟练的操作技能，一般实验室无法满足；此外，方法三在保存过程中需要定期补充液氮，费用昂贵。因此，需要建立一种简便有效、低成本的条锈菌保存方法来满足短期如1年内随时可以使用的夏孢子。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种小麦条锈菌夏孢子保存的方法，采用本发明的方法降低夏孢子保存的难度和费用，实现短期内夏孢子的“即时性”。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供了一种小麦条锈菌夏孢子保存的方法，步骤为：

4、1)将小麦条锈菌夏孢子与电子氟化液混合，得到菌悬浮保存液；

5、2)将所述步骤1)得到的菌悬浮保存液在4～6℃下保存。

6、优选的，所述步骤1)菌悬浮保存液中小麦条锈菌夏孢子的浓度为0.4mg/ml。

7、优选的，所述步骤1)小麦条锈菌夏孢子包括中国条锈病34号生理小种夏孢子。

8、本发明提供的方法保存的机理为：小麦条锈菌夏孢子浸没在电子氟化液中，通过隔绝空气保障夏孢子与水分的结合，避免夏孢子萌发。

9、有益效果：

10、采用本发明的方法降低夏孢子保存的难度和费用，实现短期内夏孢子的“即时性”。

技术特征：

1.一种小麦条锈菌夏孢子保存的方法，其特征在于，步骤为：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)菌悬浮保存液中小麦条锈菌夏孢子的浓度为0.4mg/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)小麦条锈菌夏孢子包括中国条锈病34号生理小种夏孢子。

技术总结
本发明提供了一种小麦条锈菌夏孢子保存的方法，涉及专性寄生真菌的保存技术领域。步骤为：将小麦条锈菌夏孢子与电子氟化液混合，得到菌悬浮保存液；将得到的菌悬浮保存液在4～6℃下保存。采用本发明的方法降低夏孢子保存的难度和费用，实现短期内夏孢子的“即时性”。

技术研发人员：王凤涛,蔺瑞明,冯晶,李翠红
受保护的技术使用者：中国农业科学院植物保护研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16