一类A环羟基全取代呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物及其制备方法和用途

本发明涉及天然药物，具体涉及开口箭根茎中一类a环羟基全取代呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物及其分离制备方法和制药用途。

背景技术：

1、开口箭(tupistra chinensis baker)系百合科(liliaceae)铃兰族开口箭属(tupistra)植物，又名开喉箭、竹根七、万年青。开口箭为多年生草本，除去须、根，以干燥根茎入药，性寒、味甘微苦。医学古书记载开口箭具有清热解毒、散淤止痛的功效，常用于主治咽喉肿痛、白喉、跌打损伤、毒蛇及狂犬咬伤等。现代药理研究亦表明开口箭具有良好的抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化、抗心肌肥厚等多种药理活性。研究发现，开口箭中最主要的化学成分为甾体皂苷类，也是开口箭中主要的活性成分，甾体皂苷类化合物按苷元的母核结构又分为螺甾烷醇型甾体皂苷、异甾烷醇型甾体皂苷、呋甾烷醇型甾体皂苷及变形螺甾烷醇型甾体皂苷。

技术实现思路

1、本发明提供了从开口箭中分离得到的一类呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物及其制备方法。

2、本发明提供的一类呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物，均是从开口箭根茎中提取分离得到的，所述呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物(1-3)的结构式如下：

3、

4、上述甾体皂苷类化合物的制备方法，包括以下步骤：

5、s1、称取干燥的开口箭根茎，切片后粉碎，加入甲醇，于65±3℃下回流3次，每次1-2小时，合并3次回流后的提取液，抽滤后将滤液减压浓缩，得到甲醇粗提物浸膏；

6、s2、甲醇粗提物浸膏加水溶解，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，弃去石油醚、乙酸乙酯萃取部分，余下的萃取液减压浓缩后，得到正丁醇萃取部分和水相萃取部分；

7、s3、水相萃取部分利用d101大孔吸附树脂柱层析，以乙醇-水为流动相进行梯度洗脱，经薄层g板色谱法检测后，合并相似组分，得到8个组分fr.a-fr.h；

8、s4、对fr.c组分进行反相ods柱层析，以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱，tlc检测合并相似组分后，得到5个组分fr.c1-fr.c5；

9、s5、对组分fr.c4进行高效液相色谱分离，等度洗脱，得到5个组分fr.c4a-fr.c4e；

10、s6、对组分fr.c4d进行高效液相色谱纯化，等度洗脱，得到化合物1；

11、对组分fr.c4e进行高效液相色谱纯化，等度洗脱，得到化合物2；

12、对组分fr.c5进行高效液相色谱纯化，等度洗脱，得到化合物3；

13、进一步地，步骤s1中，甲醇与开口箭的液固比为3:1-6:1(ml:g)；

14、进一步地，步骤s2中，萃取溶剂石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的体积各自分别为甲醇浸膏水溶液体积的1-2倍；

15、进一步地，步骤s3中，对水相萃取部分梯度洗脱的条件为：按乙醇与水的体积比为0:1、1:9、2:8、3:7、1:1、6:4、7:3、9:1、1:0的比例进行梯度洗脱；

16、进一步地，步骤s4中，对fr.c组分梯度洗脱的条件为：按甲醇与水的体积比为0:1、1:9、2:8、3:7、1:1、7:3、9:1、1:0的比例进行梯度洗脱；

17、进一步地，步骤s5中，对组分fr.c4等度洗脱的条件为：按乙腈与甲酸水溶液(甲酸水溶液中：甲酸的体积含量为1‰，余量为水)的体积比为14:86的比例，以3ml/min的流速进行等度洗脱；

18、进一步地，步骤s6中，对组分fr.c4d等度洗脱的条件为：按乙腈与甲酸水溶液(甲酸的体积含量为1‰，余量为水)的体积比为21:79的比例，以3ml/min的流速进行等度洗脱；

19、进一步地，步骤s6中，对组分fr.c4e等度洗脱的条件为：按乙腈与水的体积比为23:77的比例，以3ml/min的流速进行等度洗脱；

20、进一步地，步骤s6中，对组分fr.c5等度洗脱的条件为：按乙腈与甲酸水溶液(甲酸的体积含量为1‰，余量为水)的体积比为26:74的比例，以3ml/min的流速进行等度洗脱。

21、本发明提供的技术方案具有以下有益效果：

22、本发明通过对药用植物开口箭的甲醇回流粗提物进行分离纯化，得到了3种新化合物，结合运用多种现代波谱技术，确定其为呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物；本发明涉及从开口箭中提取新呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物的方法相对简单且具有较好的实用价值，同时为继续从开口箭中发现此类成分起到借鉴作用，对开口箭的综合开发和应用有着重要的意义。

技术特征：

1.一类呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物，具有化合物1或2或3所示的结构：

2.根据权利要求1所述的呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物，其特征在于，所述化合物1-3的结构式依次为：

3.一种权利要求1或2所述的化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，甲醇与开口箭根茎的液固比为3:1-6:1，ml:g；

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的体积各自分别为甲醇浸膏水溶液体积的1-2倍。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s3中，对水相萃取部分梯度洗脱的条件为：以乙醇-水为洗脱剂，按乙醇与水的体积比为0:1、1:9、2:8、3:7、1:1、6:4、7:3、9:1、1:0进行梯度洗脱，利用tlc检测合并相似组分，其中，按氯仿：甲醇：水的体积比为7:3:1配制混合溶剂，混合后静置分层，取下层作为展开剂；

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s6中，对组分fr.c4d等度洗脱的条件为：ods色谱柱，按乙腈与甲酸水溶液的体积比为21:79的比例，以3ml/min的流速进行等度洗脱；其中，甲酸水溶液中甲酸的体积含量为1‰，余量为水；

8.权利要求1或2所述的呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物在制备抑制inos和/或cox-2的药物中的应用。

9.权利要求1或2所述的呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物在制备抗炎药物中的应用。

10.权利要求1或2所述的呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术总结
本发明涉及天然药物技术领域，具体涉及开口箭根茎中一类A环羟基全取代呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物及其分离制备方法和用途。本发明通过对药用植物开口箭的甲醇回流粗提物进行分离纯化，得到3种新的呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物。分子对接实验证明这些化合物的苷元与iNOS和COX‑2具有较好的结合活性，可能成为iNOS和COX‑2的潜在抑制剂。本发明的方法相对简单且具有较好的实用价值，同时为继续从开口箭中发现此类成分起到借鉴作用，对开口箭的综合开发和应用有着重要的意义。

技术研发人员：杨光忠,王强,陈玉,李雪妮,徐婧
受保护的技术使用者：中南民族大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/29