一种β-葡聚糖酶及其应用的制作方法

本说明书涉及生物，特别涉及一种β-葡聚糖酶及其应用。

背景技术：

1、β-葡聚糖是d-葡萄糖分子通过β-糖苷键结合而成的高聚化合物，其广泛存在于植物和微生物中。受其来源的不同，其β-糖苷键类型、主链及侧链分布有所差异。例如燕麦中所含有的β-葡聚糖是由d-葡萄糖分子通过β-(1,3)糖苷键和β-(1,4)糖苷键链接而成。当前市售的燕麦β-葡聚糖的平均相对分子质量为130000-180000道尔顿。之前众多研究表明，β-葡聚糖具有重要的生理功能。比如中低分子量的β-葡聚糖可以促进caspase蛋白酶家族中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-14(caspase-14)的表达，而caspase-14具有皮肤特异性，在皮肤角质层形成中发挥的重要的作用。而自然界中中低分子量的β-葡聚糖含量极其微少，直接从燕麦等植物中提取面临诸多问题。而应用化学水解法制备中低分子量β-葡聚糖，虽然效率较高，但存在能耗高、环境污染等问题。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本申请利用基因挖矿技术，从加氏乳杆菌bcs-7中发掘到一内切葡聚糖酶，进而将其用于酶解燕麦β-葡聚糖制备得到小分子燕麦β-葡聚糖。

2、本申请提供一种β-葡聚糖酶，所述β-葡聚糖酶的氨基酸序列如seq id no.2所示。

3、本申请还提供一种分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码上述的β-葡聚糖酶。

4、本申请还提供一种构建体，所述构建体含有上述的分离的多核苷酸。

5、本申请还提供一种细胞，所述细胞包括上述的构建体，或所述细胞基因组整合有上述的构建体。

6、本申请还提供一种制备β-葡聚糖酶的方法，所述方法包括培养上述的细胞表达β-葡聚糖酶。

7、本申请还提供一种水解β-葡聚糖的方法，使用上述的β-葡聚糖酶与β-葡聚糖进行酶解反应。

8、本申请还提供上述的β-葡聚糖酶在水解β-葡聚糖为葡萄糖和低聚糖中的应用。

9、本说明书提出的β-葡聚糖酶，可能带来的有益效果包括但不限于：使用本申请的β-葡聚糖酶水解不同来源的β-葡聚糖后，可以一次性得到葡萄糖和小于1000道尔顿以下的低聚糖(纤维二糖、纤维三糖或纤维四糖)，无需或减少分离大分子量低聚糖的次数，简化生产工艺，便于工业生产。

技术特征：

1.一种β-葡聚糖酶，其特征在于，所述β-葡聚糖酶的氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.如权利要求1所述的β-葡聚糖酶，其特征在于，所述β-葡聚糖酶来源于lactobacillusgasseri；

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述分离的多核苷酸编码如权利要求1或2所述的β-葡聚糖酶。

4.一种构建体，其特征在于，所述构建体含有如权利要求3所述的分离的多核苷酸。

5.一种细胞，所述细胞包括如权利要求4所述的构建体，或所述细胞基因组整合有如权利要求4所述的构建体。

6.一种制备β-葡聚糖酶的方法，所述方法包括培养如权利要求5所述的细胞表达β-葡聚糖酶。

7.一种水解β-葡聚糖的方法，其特征在于，使用权利要求1或2所述的β-葡聚糖酶与β-葡聚糖进行酶解反应。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述β-葡聚糖溶于乙酸-乙酸钠缓冲液中；

9.如权利要求1或2所述的β-葡聚糖酶在水解β-葡聚糖为葡萄糖和低聚糖中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述低聚糖的分子量小于1000道尔顿；

技术总结
本申请公开了一种β‑葡聚糖酶，所述β‑葡聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本申请还公开了一种水解β‑葡聚糖的方法，其特征在于，使用上述的β‑葡聚糖酶与β‑葡聚糖进行酶解反应。本申请还公开了上述的β‑葡聚糖酶在水解β‑葡聚糖为葡萄糖和低聚糖中的应用。本申请所提供的β‑葡聚糖酶可用于水解不同来源的β‑葡聚糖，进而应用于化妆品、医药、食品和饲料等领域。

技术研发人员：张宝琪,朱伟胜,魏嘉士
受保护的技术使用者：百开盛（上海）生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16