三阴性乳腺癌生物标志物及其应用

本发明涉及生物医药，尤其涉及三阴性乳腺癌生物标志物及其应用。

背景技术：

1、乳腺癌是威胁全世界女性生命健康安全的重要因素。而三阴性乳腺癌(tnbc)是所有乳腺癌亚型治疗中最棘手的一种，死亡率最高且最容易复发。tnbc因其特殊的分子遗传背景(雌激素受体er、孕激素受体pr及人表皮生长因子受体2her2均为阴性)对激素和靶向治疗都不敏感，临床上治疗的方法几乎只有化疗。尽管三阴性乳腺癌对化疗具有一定的敏感性，但患者经过常规化疗治疗后预后仍然较差。研究统计发现，iii-iv期三阴性乳腺癌患者五年生存率仅为13％。并且还有一部分患者在化疗治疗过程中因出现多药耐药的情况导致治疗失败。因此，深入探究三阴性乳腺癌的发病机制，挖掘新的诊断标志物和新的药物靶点对临床上预防和治疗tnbc至关重要。

2、盲肌样蛋白(mbnl)是一类rna结合蛋白，能够调控rna成熟和表达过程的多个步骤，包括靶基因pre-mrna的剪接、降解、rna输出、稳定性维持、修饰和翻译等，在转录后层面广泛参与调控多种基因的表达和功能。盲肌样蛋白家族包含mbnl1、mbnl2、mbnl3三个成员，其中mbnl1是目前研究最多的家族成员。mbnl1已被证实在多种肿瘤组织中异常表达，有望成为新的肿瘤诊断标志物并且靶向mbnl1能够达到肿瘤治疗的作用。而作为与mbnl1具有相同结合位点的同家族成员mbnl3虽然在肿瘤中的相关研究不多，尤其是mbnl3在三阴性乳腺癌中的功能尚未见相关报道。

3、klhl31是kelch-like(klhl)蛋白家族中的一员。迄今为止，已被鉴定出的klhl家族成员有42个，该家族成员均含有一个btb/poz结构域、一个back结构域以及五至六个重复的kelch基序，而且它们在进化上高度保守。研究发现，具有btb结构域的蛋白在细胞中可以通过与cullin3蛋白相互作用形成e3泛素连接酶，催化特定底物蛋白质发生泛素化修饰，参与泛素-蛋白酶水解途径(upp)，选择性降解细胞内多种具有生物活性的蛋白质，在翻译后基因表达调控中发挥着至关重要的作用。近年来，随着高通量测序技术的发展，klhl蛋白家族成员越来越多的功能被发现，且被证实在肿瘤的发生发展中具有重要的生物学功能，但是klhl31在乳腺癌特别是三阴性乳腺癌中的功能尚未见相关报道。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提出了mbnl3和klhl31三阴性乳腺癌生物标志物及其应用。

2、本发明的技术方案是这样实现的：第一，本发明提供了生物标志物在制备诊断或预测三阴性乳腺癌的产品中的应用，所述生物标志物为mbnl3和klhl31。

3、在以上技术方案的基础上，优选的，所述诊断或预测三阴性乳腺癌的产品通过使用免疫法、northern杂交方法、印迹杂交、qrtpcr、基因芯片、原位杂交阵列杂交、核酶保护分析技术、二代测序方法或单分子测序方法来检测所述mbnl3和klhl31生物标志物的水平以诊断或预测乳腺癌。

4、在以上技术方案的基础上，优选的，检测样本选自血液或组织。

5、在以上技术方案的基础上，优选的，所述mbnl3和klhl31在三阴性乳腺癌患者血清中表达水平同时上调。

6、第二，本发明提供了检测mbnl3和klhl31表达水平的试剂在制备诊断或预测三阴性乳腺癌的产品中的应用。

7、在以上技术方案的基础上，优选的，所述产品为制剂、芯片或试剂盒。

8、第三，本发明提供了mbnl3和klhl31的抑制剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。

9、在以上技术方案的基础上，优选的，所述抑制剂包括抑制mbnl3和klhl31基因的功能、下调mbnl3和klhl31基因mrna水平、减少mbnl3和klhl31基因mrna有效作用时间的物质。

10、第四，本发明提供了一种治疗三阴性乳腺癌的药物，所述药物包括mbnl3和klhl31的抑制剂。

11、在以上技术方案的基础上，优选的，所述抑制剂是针对mbnl3和klhl31的sirna

12、本发明的三阴性乳腺癌生物标志物及其应用相对于现有技术具有以下有益效果：

13、(1)本发明的mbnl3和klhl31能够显著促进三阴性乳腺癌细胞的增殖，并且两者联合处理后发挥的促进增殖的功能更加显著，本发明为三阴性乳腺癌的诊断、预测和治疗提供了新的靶点。

14、(2)本发明揭示了mbnl3和klhl31调控三阴性乳腺癌细胞增殖的分子作用机制，mbnl3通过与抑癌基因pten mrna的3`-utr结合降低其mrna的稳定性，在转录后层面上抑制pten的表达。而klhl31则是通过与pten蛋白直接结合，介导pten蛋白的泛素化降解，在翻译后层面上抑制petn的表达。mbnl3和klhl31分别通过转录后层面和翻译后层面调控pten的表达，发挥促进三阴性乳腺癌细胞增殖的作用。由此可见，抑制mbnl3和klhl31的组合药物或基因疗法可用于对三阴性乳腺癌的诊断和治疗。

技术特征：

1.生物标志物在制备诊断或预测三阴性乳腺癌的产品中的应用，其特征在于：所述生物标志物为mbnl3和klhl31。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述诊断或预测三阴性乳腺癌的产品通过使用免疫法、northern杂交方法、印迹杂交、qrtpcr、基因芯片、原位杂交阵列杂交、核酶保护分析技术、二代测序方法或单分子测序方法来检测所述mbnl3和klhl31生物标志物的水平以诊断或预测乳腺癌。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：检测样本选自血液或组织。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述mbnl3和klhl31在三阴性乳腺癌患者血清中表达水平同时上调。

5.检测mbnl3和klhl31表达水平的试剂在制备诊断或预测三阴性乳腺癌的产品中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述产品为制剂、芯片或试剂盒。

7.mbnl3和klhl31的抑制剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于：所述抑制剂包括抑制mbnl3和klhl31基因的功能、下调mbnl3和klhl31基因mrna水平、减少mbnl3和klhl31基因mrna有效作用时间的物质。

9.一种治疗三阴性乳腺癌的药物，其特征在于：所述药物包括mbnl3和klhl31的抑制剂。

10.如权利要求9所述的药物，其特征在于：所述抑制剂是针对mbnl3和klhl31的sirna。

技术总结
本发明涉及生物医药技术领域，提出了三阴性乳腺癌生物标志物及其应用，公开了生物标志物在制备诊断或预测三阴性乳腺癌的产品中的应用，所述生物标志物为MBNL3和KLHL31。本发明的MBNL3和KLHL31能够显著促进三阴性乳腺癌细胞的增殖，并且两者联合处理后发挥的促进增殖的功能更加显著，为三阴性乳腺癌的诊断、预测和治疗提供了新的靶点。

技术研发人员：徐尧,罗颖
受保护的技术使用者：武汉科技大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15