一种人壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽及制备方法与流程

本发明涉及生物医药，特别是涉及一种人壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽及制备方法。

背景技术：

1、壳多糖酶3样蛋白1(chi3l1)，又称为ykl-40蛋白，是由chi3l1基因编码的一种分泌型糖蛋白。有研究发现，人血清中chi3l1水平在酒精性肝硬化病人中升高，并且血清中chi3l1蛋白水平与丙肝病毒慢性感染和肝纤维化有关。

2、现有技术未发现有关于壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽的报道。

技术实现思路

1、本发明以抗人chi3l1兔抗为靶分子，将靶分子以链霉亲和素-生物素定向连接的方式固定于磁珠上，投入噬菌体随机展示双环肽库，通过优化的液相磁珠亲和淘选条件，获得了一种可特异性结合抗人chi3l1兔抗的多肽分子(抗原模拟表位肽)，其氨基酸序列为c-k-h-n-f-g-l-e-c-r-f-f-l-f-e-f-c（seq id no .1）。

2、上述多肽分子结构中，大写英文字母分别代表已知天然l-型氨基酸残基或其d-型异构体的一种，即c代表半胱氨酸残基，k代表赖酸残基，h代表组氨酸残基，n代表天冬酰胺残基，f代表苯丙氨酸残基，g代表甘氨酸残基，l代表亮氨酸残基，e代表谷氨酸残基，r代表精氨酸残基。

3、本发明还涉及编码上述氨基酸序列的核苷酸，该核苷酸的序列为: tgt aag cataat ttt ggt ctg gag tgt cgg ttt ttt ttg ttt gag ttt tgt（seq id no .2）。

4、本发明提及多肽分子可通过噬菌体扩增、化学合成的方式进行大量制备。噬菌体扩增是指将展示有多肽分子的噬菌体，通过生物扩增的方式，大量繁殖生产展示有多肽分子的噬菌体粒子。化学合成是指依据公布的多肽氨基酸序列，通过化学合成多肽的方式进行多肽合成。

5、本发明的有益效果是：本发明所提及的多肽分子（抗原模拟表位肽）可作为天然的人chi3l1、通过基因工程技术制备的重组人脂联素蛋白的替代物应用于免疫分析体系，避免了传统的人chi3l1所面临的复杂的提取、纯化过程；也避免了传统的重组chi3l1制备过程中所面临的基因序列优化、表达载体构建、原核/真核表达条件优化等复杂的制备过程，具有制备简单、快速、高效等优势。

技术特征：

1.一种人壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽，其特征在于，氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述的氨基酸序列的核苷酸。

3.如权利要求2所述的核苷酸的序列如seq id no .2所示。

4.权利要求1所述的人壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽的制备方法，其特征在于，通过噬菌体扩增、化学合成的方式进行制备；所述噬菌体扩增是指将展示有抗原模拟表位肽的噬菌体，通过生物扩增的方式，繁殖生产展示有人壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽的噬菌体粒子；所述化学合成指依据抗原模拟表位肽的氨基酸序列，通过化学合成多肽的方式进行多肽合成。

技术总结
本发明属于生物技术领域，涉及一种人壳多糖酶3样蛋白1的抗原模拟表位肽及制备方法，该抗原模拟表位肽的氨基酸序列为C‑K‑H‑N‑F‑G‑L‑E‑C‑R‑F‑F‑L‑F‑E‑F‑C。本发明采用抗CHI3L1兔多克隆抗体为配体，投入噬菌体展示双环肽库，以优化的液相亲和淘选方式，快速淘选获得可特异性结合抗人CHI3L1抗体的多肽分子抗原模拟表位肽，该抗原模拟表位肽具备了与抗人CHI3L1抗体的免疫反应性，可作为人CHI3L1、通过基因工程技术制备的重组脂联素蛋白的替代物应用于免疫分析体系，具有制备简单、快速、高效等优势，为人CHI3L1抗原的替代提供了新的路径，具有较好的应用价值。

技术研发人员：万蒙,何庆华
受保护的技术使用者：江西乐成欣生生物技术研究有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15