一种Qa-1b纳米抗体及其应用

本发明涉及生物工程，特别是涉及一种qa-1b纳米抗体及其应用。

背景技术：

1、骆驼科动物(羊驼、骆驼)和软骨鱼体内的一种天然缺失重链但仍然具有生物活性的特异性抗体称单域抗体，单域抗体的抗原结合位点(vhh)具有独立的抗原识别能力，独立表达的vhh又被称为纳米抗体。与传统的四联体抗体相比，纳米抗体的主要特点有：分子量小，结构简单，理化性质稳定等。纳米抗体的优良特性使其在多种方面具有优势：在抗体进入机体方面，纳米抗体能够穿过动物机体内的一些保护性屏障进入发病部位发挥作用，如血脑屏障、血睾屏障等；在抗原抗体结合方面，能够结合一些隐蔽的抗原表位，特别适用于比较难得到抗体的靶点，如gpcr、离子通道和酶活中心等；在降低生产成本方面，纳米抗体结构简单易于体外表达，同时体外表达不易产生包涵体，生产工艺简单。

2、人类白细胞抗原-e(human leukocyte antigene,hla-e)基因位于第6号染色体短臂(6p21.3)。约99％的人类个体中，有两个等位基因编码hla-e，即hla-e*01:01和hla-e*01:03。qa-1b是hla-e在小鼠中的同源蛋白。qa-1b(hla-e)在内皮细胞、t细胞、b细胞、单核细胞和巨噬细胞等表达水平较高。qa-1b(hla-e)的α链胞外区与β2微球蛋白以非共价键结合，形成完整的qa-1b(hla-e)复合物。qa-1b(hla-e)主要的配体是nkg2a/cd94或nkg2c/cd94复合体。nkg2a和nkg2c是nkg2家族中的成员，表达于nk细胞、nkt细胞和cd8+t细胞。qa-1b与nkg2a/cd94或nkg2c/cd94复合体结合可以抑制或激活nk细胞和t细胞。由于qa-1b的功能特点，qa-1b及其受体逐渐成为肿瘤免疫治疗的热门靶点。目前，还没有特异性结合qa-1b蛋白的纳米抗体的报道。

技术实现思路

1、纳米抗体固有的分子量小、理化特征稳定、亲和力高和结构简单易于重组表达制备，能够穿过血脑屏障，在疾病的诊断与治疗中有较大的应用前景。鉴于此，本发明的目的在于提供一种qa-1b纳米抗体及其应用，采用本发明提供的qa-1b纳米抗体能够特异性结合qa-1b蛋白，可用于免疫组织化学和western blotting法检测组织中qa-1b的表达。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供了一种qa-1b纳米抗体，所述qa-1b纳米抗体的氨基酸序列如seq idno.1所示。

4、优选的，所述qa-1b纳米抗体的核苷酸序列如seq id no.2所示。

5、本发明还提供了上述技术方案所述的qa-1b纳米抗体在制备结合qa-1b蛋白的药物中的应用。

6、本发明还提供了上述技术方案所述qa-1b纳米抗体在制备结合qa-1b蛋白的免疫组化试剂中的应用。

7、本发明还提供了上述技术方案所述qa-1b纳米抗体在抑制b16细胞增殖中的应用。

8、本发明的有益效果为：

9、本发明利用噬菌体展示技术进行淘筛，噬菌体展示技术能将表达的外源多肽或蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面，进而通过亲和富集法筛选表达有特异性蛋白质的噬菌体。本发明采用噬菌体展示实验技术研发的qa-1b纳米抗体能够特异性结合qa-1b蛋白。

技术特征：

1.一种qa-1b纳米抗体，其特征在于，所述qa-1b纳米抗体的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的qa-1b纳米抗体，其特征在于，所述qa-1b纳米抗体的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.权利要求1或2所述的qa-1b纳米抗体在制备结合qa-1b蛋白的药物中的应用。

4.权利要求1或2所述qa-1b纳米抗体在制备结合qa-1b蛋白的免疫组化试剂中的应用。

5.权利要求1或2所述qa-1b纳米抗体在抑制b16细胞增殖中的应用。

技术总结
本发明提供了一种Qa‑1b纳米抗体及其应用，属于生物工程技术领域。所述Qa‑1b纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。采用本发明提供的Qa‑1b纳米抗体能够特异性结合Qa‑1b蛋白，对Qa‑1b蛋白的灵敏度为4.458μg/ml。Qa‑1b纳米抗体的应用能够用于免疫组织化学和研究对B16细胞增殖的影响，为Qa‑1b基因功能的研究提供方法。

技术研发人员：范瑞文,金聪俐,贾琼,牛胜,田文霞
受保护的技术使用者：山西农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15