一种NK细胞中表达IL-15的mRNA序列的制作方法

本发明属于细胞，涉及表达il-15的mrna序列，具体涉及nk细胞中表达il-15的mrna序列。

背景技术：

1、自然杀伤细胞(natural killer，nk)是主要的天然免疫成员，在防御疾病包括恶性肿瘤的第一防线中发挥重要作用。与获得性免疫系统的细胞(例如t细胞)相比，nk细胞无需预先刺激或致敏即可启动细胞毒活性，从而提供即时的自然反应。nk细胞对肿瘤的杀伤优势表现在直接溶解和分泌细胞因子两个方面，其杀伤肿瘤既可通过穿孔素又可通过fas配基。nk细胞可以产生tnf-α、ifn-γ和il-1，这些细胞因子在nk细胞抗癌反应以及调动t淋巴细胞中有十分重要地位。由于nk细胞具有快速的杀伤作用和广泛的靶细胞，提示nk细胞可以用于治疗恶性肿瘤。研究证明，过继转输体外活化、扩增自体或同种异体nk细胞对治疗多种白血病和实体瘤有效。

2、然而，nk细胞在人体内的寿命时间比较短，大概有半个月左右。il-15因子在nk细胞中的表达可以延长nk细胞的存活时间，增强nk细胞的细胞毒活性。然而，il-15的mrna序列在nk细胞中表达不高。

3、目前，亟需一种在nk细胞中表达很好的il-15mrna序列。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种nk细胞中表达il-15的mrna序列，其使得il-15蛋白在nk细胞中更有效的表达。

2、本发明提供的一种nk细胞，所述nk细胞中生成由il-15的mrna序列表达的蛋白。

3、进一步地，所述il-15的mrna序列选自seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5与seq id no.6所示序列中的任一。

4、进一步地，所述il-15基因的mrna序列优选为如seq id no.6所示。

5、本发明提供的一种nk细胞的制备方法，所述制备方法包括步骤：得到纯化后的mrna，培养nk细胞，将mrna电转入nk细胞。

6、进一步地，所述il-15的mrna序列选自seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5与seq id no.6所示序列中的任一，所述il-15基因的mrna序列优选为如seq id no.6所示。

7、进一步地，所述制备方法用于非治疗疾病目的。

8、本发明提供的任意所述nk细胞在延长nk细胞存活时间中的应用。

9、本发明的有益技术效果：

10、本发明通过优化il-15信号肽序列以及il-15mrna 3'utr的选择序列，即将il-15mrna的序列优化，因此能够在nk细胞中很好的表达；可以进一步延长nk细胞在人体内的寿命时间，增强nk细胞的细胞毒活性。

技术特征：

1.一种nk细胞，其特征在于，所述nk细胞中生成由il-15的mrna序列表达的蛋白。

2.根据权利要求1所述的nk细胞，其特征在于，所述il-15的mrna序列选自seq idno.1、seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5与seq id no.6所示序列中的任一。

3.根据权利要求2所述的nk细胞，其特征在于，所述il-15基因的mrna序列优选为如seqid no.6所示。

4.根据权利要求1-3中任一所述的nk细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括步骤：得到纯化后的mrna，培养nk细胞，将mrna电转入nk细胞。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述il-15的mrna序列选自seq idno.1、seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5与seq id no.6所示序列中的任一，所述il-15基因的mrna序列优选为如seq id no.6所示。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法用于非治疗疾病目的。

7.如权利要求1-4中任意所述的nk细胞在延长nk细胞存活时间中的应用。

技术总结
本发明提供了一种NK细胞中表达IL‑15的mRNA序列，属于细胞技术领域。所述NK细胞中生成由IL‑15的mRNA序列表达的蛋白。本发明通过优化IL‑15信号肽序列以及IL‑15mRNA 3'UTR的选择序列，即将IL‑15mRNA的序列优化，因此能够在NK细胞中很好的表达；可以进一步延长NK细胞在人体内的寿命时间，增强NK细胞的细胞毒活性。

技术研发人员：卢社莲,李营营
受保护的技术使用者：北京鼎成肽源生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15