新型化合物、方法及应用

本发明涉医药领域，特别涉及新型化合物、方法及应用。

背景技术：

1、卵巢癌是妇科恶性肿瘤之一。治疗方法包括外科手术和放化疗。当前临床应用的抗肿瘤药物的突出问题是有效率低、选择性差(毒性大)和对耐药性肿瘤的不敏感。另外，复发和转移也是肿瘤治疗的难点。因此，迫切需要寻找新的抗肿瘤药物。

2、天然产物，主要来源于动物、植物、微生物的代谢产物，对人类身体健康一直扮演者重要的角色。据最新天然产物化学杂志报道，1981-2014年间，高达75％的抗肿瘤药物直接源于天然产物或是基于天然产物的结构改造的类似物。天然产物具有药效特权结构单元，可用于生命科学研究的分子探针。因此，如何有效的探索和利用大自然赋予我们的药效基团是生命科学的重要难题。另外基因组及蛋白组学的研究产生了大量可用作药物筛选的靶标，以此为基础的高通量筛选仍然对于新化合物的数量和来源提出了更高的要求，近些年来由于抗生素的滥用，出现了新的耐药性问题，人们寻找新的天然产物更为迫切。

3、有机化学的在合成和结构改造复杂的天然产物起到功不可没的作用，但是快速、有效、简捷的构建起天然产物文库仍然是通过有机合成的手段是难以实现的，且有机试剂及催化剂毒性大。发展绿色环保的生物技术方法来产生天然产物类似物进而构建其类似物的文库具有重要的学术和应用价值，主要包括前体导向生物合成，突变生物合成，组合生物合成和酶学转化。

技术实现思路

1、本发明主要采用基因敲除生物技术，灭活生物合成途径等发现天然产物的类似物，并考察新型化合物的生物活性和抗肿瘤作用。

2、为了实现根据本发明的上述目的和其他优点，本发明的第一个方面，提供了一种新型化合物，所述化合物的结构式为：

3、

4、本发明的第二个方面，提供了新型化合物的制备方法，包括以下步骤：

5、s1、突变株构建，在streptomyces rugosporus ll-42d005的菌种内选择编码基因pyrk1进行中断；

6、s2、突变株发酵；

7、s3、提取，收集发酵液，离心后，取上清液调整ph，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩乙酸乙酯，得到提取物；

8、s4、分离得到新型化合物。

9、优选的，首先将s.rugosporus ll-42d005保种的菌液接种入种子培养基中，培养1-3天，取部分培养后的菌液转接到发酵培养基中，培养5-15天。

10、优选的，所述种子培养基为：葡萄糖1-2％，可溶性淀粉2-4％，酵母提交物1-2％，n-z amine a 1-2％，碳酸钙0.1-0.3％，混合于水中，调整ph7.2。

11、优选的，所述发酵培养基为：葡萄糖3-5％，蛋白胨1-3％，酵母提交物1-3％，柠檬酸铁铵0.1-0.5％，碳酸钙混合于水中，调整ph为6.5。

12、优选的，步骤s4的分离方法包括：凝胶柱色谱lh-20，甲醇洗脱、hplc检测目标产物；反相硅胶柱色谱ods，semi-phplc，得到新型化合物。

13、优选的，所述化合物的结构式为：

14、

15、本发明的第三个方面，提供了本发明所述的新型化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

16、优选的，所述肿瘤包括卵巢癌。

17、优选的，所述化合物的结构式为：

18、

19、本发明与现有技术相比，其有益效果是：本发明提供的一种具有潜在抗肿瘤药用价值的新化合物及其从streptomyces rugosporus ll-42d005相关基因pyrk1发酵制备，提取分离的方法，该化合物对于肿瘤细胞的细胞毒活性效果以及该化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术特征：

1.一种新型化合物，其特征在于，所述化合物的结构式为：

2.权利要求1所述的新型化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的新型化合物的制备方法，其特征在于，首先将s.rugosporus ll-42d005保种的菌液接种入种子培养基中，培养1-3天，取部分培养后的菌液转接到发酵培养基中，培养5-15天。

4.如权利要求3所述的新型化合物的制备方法，其特征在于，所述种子培养基为：葡萄糖1-2％，可溶性淀粉2-4％，酵母提交物1-2％，n-zamine a 1-2％，碳酸钙0.1-0.3％，混合于水中，调整ph 7.2。

5.如权利要求3所述的新型化合物的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基为：葡萄糖3-5％，蛋白胨1-3％，酵母提交物1-3％，柠檬酸铁铵0.1-0.5％，碳酸钙混合于水中，调整ph为6.5。

6.如权利要求2所述的新型化合物的制备方法，其特征在于，步骤s4的分离方法包括：凝胶柱色谱lh-20，甲醇洗脱、hplc检测目标产物；反相硅胶柱色谱ods，semi-phplc，得到新型化合物。

7.权利要求1-6任意一项所述的新型化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括卵巢癌。

技术总结
本发明公开了一种新型化合物、方法及应用，方法包括以下步骤：S1、突变株构建，在Streptomyces rugosporus LL‑42D005的菌种内选择编码基因pyrK1进行中断；S2、突变株发酵；S3、提取，收集发酵，离心后，取上清液调整PH，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩乙酸乙酯，得到提取物；S4、分离得到新型化合物；本发明采用基因敲除生物技术，灭活生物合成途径等发现天然产物的类似物，并考察新型化合物的生物活性和抗肿瘤作用。

技术研发人员：夏正祥,刘文,唐中艳,吴竹华
受保护的技术使用者：同济大学附属口腔医院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19