一种白腐菌菌种及其在降解林木废弃物中的应用

本发明属于微生物，具体涉及一种白腐菌菌种及其在降解林木废弃物中的应用。

背景技术：

1、林木废弃物大多采用焚烧、填埋以及粉碎粗回收等非资源化的处理方式，这种传统处理方式造成了林木资源严重浪费，且对环境也造成严重的污染。因此如何处理和高效利用林木废弃物是目前我国面对的严峻问题。

2、木腐菌(wood-decay fungi)分解木材时可引起木材的糟烂和解体，根据腐朽类型，木腐真菌主要分为白腐菌(white rot fungi)、褐腐菌(brown rot fungi)和软腐菌(soft rot fungi)。其中，白腐真菌为最主要的木材腐朽菌，约占已知种类的90％左右。

技术实现思路

1、本部分目的在于概述本发明实施例的基本情况以及一些较佳实施例的简要介绍。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

2、本发明的主要目的是克服现有的不足，提供一株能够分泌木质素降解酶和纤维素降解酶的白腐菌菌株，该菌株能更高效地对现有林木废弃物的木质纤维素进行降解。

3、本发明提供一种白腐菌菌株phlebia formosana smf410-5-1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no：m 20231538，保藏日期为：2023年08月25日，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学。

4、白腐菌菌株(phlebia formosana)smf410-5-1的来源：该菌分离自2020年4月10日从中国江苏省南京市南京林业大学(e118°48′34″，n32°4′41″)校内采集的松木腐朽茎干，经鉴定该菌株为白腐菌phlebia formosana。

5、白腐菌的筛选过程如下：

6、(1)漆酶初筛：将采集自南京林业大学(e118°48′34″，n32°4′41″)校内松木腐朽茎干，通过分离、纯化得到该木腐菌菌株。将该菌转接于pda固体培养基上活化，待菌丝长至平板三分之二时，用6mm的打孔器将菌落制成菌饼，将菌饼接入pda-愈创木酚培养基上，培养六天，观察其在培养基上红棕色变色圈大小；

7、(2)木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶初筛：将步骤(1)中已活化菌株接种于pda-苯胺蓝培养基上，培养六天，观察其在培养基上产生的褪色圈大小；

8、(3)纤维素酶初筛：将步骤(1)中已活化菌株接种于羧甲基纤维素钠培养基上，培养六天，用刚果红溶液染色，氯化钠溶液固定后，观察其在培养基上产生的透明圈大小；

9、(4)经步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)初筛后，将菌株smf410-5-1保藏。

10、(5)酶活测定：用6mm的打孔器将活化后的菌株制成菌饼，将菌饼接于500ml锥形瓶装入200ml的pd液体培养基中，每个锥形瓶均接入6个菌饼，放于标准振荡培养箱28℃，160r/min培养16d。

11、(6)菌株鉴定：采用真菌核糖体基因组内转录间隔区(its)和核糖体大亚基(lsu)基因对菌株进行鉴定，鉴定菌株为白腐菌phlebia formosana，菌株编号为smf410-5-1。

12、步骤(1)中所述pda-愈创木酚培养基是在pda培养基中加入终浓度0.5g/l愈创木酚制成。步骤(2)中所述的pda-苯胺蓝培养基是在pda培养基中加入终浓度0.1g/l苯胺蓝制成。步骤(3)中所述羧甲基纤维素钠培养基包括有0.25g/l磷酸氢二钾，0.1g/l七水合硫酸镁，5g/l羧甲基纤维素钠，0.5g/l硫酸铵，15g/l琼脂粉或20g/l琼脂条。

13、本发明还提供一种如前所述的木腐菌菌株在降解林木废弃物中的应用。

14、本发明还提供一种用于降解林木废弃物的菌剂，包含如前所述的木腐菌菌株。

15、本发明的有益效果：本发明筛选的白腐菌能够分泌多种酶类，对林木废弃物中难分解的木质素进行分解，更加高效地促进林木废弃物的降解；本发明提供的白腐菌，还可制成菌剂，生产成本低，工艺简单，操作方便；对林木废弃物的降解过程没有污染性物质释放，是降解林废弃物绿色环保的有效方法。这些优点使得该木腐菌在林木废弃物的降解方面具有很高的经济价值和良好的应用前景。

技术特征：

1.一种白腐菌菌种，其特征在于：所述白腐菌菌种的保藏编号为：cctcc m 20231538；其拉丁文分类名称为：phlebia formosana。

2.权利要求1所述的白腐菌菌种在降解林木废弃物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述林木包括杨木、松木、杉木。

4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述白腐菌菌种能够分泌漆酶、木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和纤维素酶。

5.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述白腐菌菌种能够降解木质素、纤维素和半纤维素。

6.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：将所述白腐菌菌种接种于培养基中，恒温培养后得到活化后的白腐菌菌种。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：将4℃保存的所述白腐菌菌种接种于固体pda培养基中，放入25℃的恒温培养箱中黑暗培养，得到活化后的白腐菌菌种。

技术总结
本发明公开了一种白腐菌菌种及其在降解林木废弃物中的应用，本发明筛选的白腐菌能够分泌多种酶类，对林木废弃物中难分解的木质素进行作用，更加高效地促进林木废弃物的分解；本发明提供的白腐菌，还可制成菌剂，生产成本低，工艺简单，操作方便，对林木废弃物的降解过程没有污染性物质释放到空气中，绿色环保的降解林废弃物，降低生产和使用成本，在林木废弃物的降解方面具有很高的经济价值和良好的应用前景。

技术研发人员：黄麟,秦浩龙,杨济云,任艺
受保护的技术使用者：南京林业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24