一种低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物的制备方法

本发明属于食品，具体涉及一种低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物的制备方法。

背景技术：

1、中国海蜇资源十分丰富，营养和药用价值都很高。海蜇胶原蛋白肽是介于胶原蛋白和氨基酸的中间产物，分子量常为100-10000da，更易于被人体吸收。海洋胶原肽具有抗氧化性、抑制ace、抑制酪氨酸酶、促进钙吸收以及促进伤口愈合等多种生物活性，具有广阔的应用前景。但目前对于海蜇胶原蛋白肽的研究较少，其研究可为其在功能食品、医药、化妆品等方面的应用提供基础。

2、钙是在人体中含量最多的无机矿物质元素之一，约占人体重的1.5％-2.2％，其中99％的钙存在于牙齿和骨骼中，其余1％的钙大多呈离子状态存在于细胞外液和血液中，以保持骨钙和血钙的稳定水平。中国居民营养调查表明，居民膳食钙的摄入量为389mg/d，仅为每日推荐摄入量的50％。钙缺失会导致佝偻病、骨质疏松，甚至诱发高血压、肾结石和结肠癌等疾病。因此开发高效的补钙制剂尤为重要。

3、目前发现大量的蛋白酶解肽具有钙结合活性，根据原料将钙螯合肽分为动物源钙螯合肽、植物源钙螯合肽和水产源钙螯合肽。水生生物的加工副产物含有丰富的蛋白质，这些蛋白质的水解物显示出金属螯合能力，肽钙螯合物是钙离子与多肽结合形成的具有环状结构的络合物，其稳定常数比氨基酸钙螯合物大，钙离子可以螯合物的形式被完整地转运吸收并有效释放。以海蜇为原料制备低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物为研究，相关的文献报道较少。

技术实现思路

1、针对以上背景技术，达到上述目的，本发明提供了一种低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物的制备方法。

2、本发明采用的技术方案是：

3、一种低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物的制备方法，包括如下步骤：

4、1)将新鲜海蜇预处理后匀浆，进行两次酶解反应，获得酶解产物；

5、2)对酶解产物进行分离处理，取得分子量在3kda以下的肽；

6、3)将3kda以下的肽和钙离子混合，进行螯合反应，将螯合反应所得产物采用无水乙醇沉淀，离心，收集沉淀后干燥，获得低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物。

7、进一步的，上述的制备方法，步骤1)中，所述预处理的步骤包括：先将新鲜海蜇用水进行清洗浸泡24h，然后用丙酮浸泡24h，再用磷酸氢二钠浸泡24h进行脱盐脱脂。

8、进一步的，上述的制备方法，步骤1)中，所述两次酶解反应所用的酶分别为4％风味蛋白酶和3％胰蛋白酶在43℃下依次提取4h后，离心取得上清液。

9、进一步的，上述的制备方法，步骤2)中，所述分离处理的步骤包括：利用分子量为3kda的超滤膜对酶解产物进行分离，收集滤液，将滤液冷冻干燥后即制得分子量在3kda以下的肽。

10、进一步的，上述的制备方法，步骤3)中，所述钙离子来自于无水氯化钙。

11、更进一步的，上述的制备方法，步骤3)中，所述螯合反应为：将分子量在3kda以下的肽配制为25-35mg/ml，调节ph8.8-9.2，按照质量比1:3-3:1加入无水氯化钙，在40-60℃下磁力搅拌螯合20min。

12、进一步的，上述的制备方法，步骤3)中，所述无水乙醇沉淀具体为：加入螯合反应所得产物的3倍体积的无水乙醇沉淀3-4h。

13、进一步的，上述的制备方法，步骤3)中，所述离心条件为：10000r/min离心10-15min。

14、本发明的有益效果是：本发明为海蜇胶原蛋白肽在功能食品、医药、化妆品等方面的应用提供基础，还提高了海蜇资源的附加值，丰富营养食品补充剂市场，进一步增加了其经济价值；并且本发明制备方法的操作过程简单，不需要复杂的设备，提高了生产效率。也能为多肽螯合钙的发展提供一定的研究基础和理论依据。

技术特征：

1.一种低分子量海蜇胶原蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述预处理的步骤包括：先将新鲜海蜇用水进行清洗浸泡24h，然后用丙酮浸泡24h，再用磷酸氢二钠浸泡24h进行脱盐脱脂。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述两次酶解反应所用的酶分别为4％风味蛋白酶和3％胰蛋白酶在43℃下依次提取4h后，离心取得上清液。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述分离处理的步骤包括：利用分子量为3kda的超滤膜对酶解产物进行分离，收集滤液，将滤液冷冻干燥后即制得分子量在3kda以下的肽。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述钙离子来自于无水氯化钙。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述螯合反应为：将分子量在3kda以下的肽配制为25-35mg/ml，调节ph8.8-9.2，按照质量比1:3-3:1加入无水氯化钙，在40-60℃下磁力搅拌螯合20min。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述无水乙醇沉淀具体为：加入螯合反应所得产物的3倍体积的无水乙醇沉淀3-4h。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述离心条件为：10000r/min离心10-15min。

技术总结
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种低分子量海蜇胶原蛋白肽‑钙螯合物的制备方法。该制备方法包括：(1)将新鲜海蜇预处理后匀浆进行两次酶解反应，获得酶解产物；(2)对酶解产物进行分离处理，获得分子量在3KDa以下的肽；(3)将分子量在3KDa以下的肽和钙离子混合，进行螯合反应，制备得到低分子量海蜇胶原蛋白肽‑钙螯合物。采用该方法制备的低分子量海蜇胶原蛋白肽‑钙螯合物螯合率高，提高了海蜇资源的附加值，可丰富营养食品补充剂市场，进一步增加经济价值，并且本发明制备方法的操作过程简单，不需要复杂的设备，提高了生产效率。

技术研发人员：李玮轩,高佳佳,胡风庆,张韧恒,宁崇
受保护的技术使用者：辽宁大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/6