本发明涉及人多能干细胞，特别涉及一种使用化学重编辑方法高效快速获得人多能干细胞。
背景技术：
1、目前，多能干细胞(pluripotent stem cell，ps)是当前干细胞研究的热点和焦点。它可以分化成体内所有的细胞，进而形成身体的所有组织和器官。因此，多能干细胞的研究不仅具有重要的理论意义，而且在器官再生、修复和疾病治疗方面极具应用价值。
2、多能干细胞的体外诱导通常是利用一系列诱导因子导入到成熟体细胞中，并重编辑为具有类似胚胎干细胞特征的一种多能干细胞。但是此类方法的诱导过程极为缓慢，成功率极低，不利于产业上的应用。而利用小分子实现重编辑的技术也早就被邓宏魁课题组报道，其是利用vpa、chir99021、repsox、forskolin、tranylcypromine和dznep小分子实现将体细胞重编辑为诱导多能干细胞。之后，各种相关的化学重编辑方法也被逐渐发现和应用。然而，目前的化学重编辑方法技术的重编辑效率还是偏低，诱导时间漫长，一般是需要持续约40天完成。
3、因此，有必要聚焦于体细胞去分化相关的信号通路，通过精细化调控细胞信号通路实现高效率重编辑。
技术实现思路
1、针对现有技术所存在的技术问题，本发明提供了一种化学重编辑方法快速获得人多能干细胞，该方法是通过小分子化合物抑制剂协同调控细胞增殖分化相关联的细胞信号通路，如：jak-stat信号通路、notch信号通路、pi3k/akt/mtor信号通路和hippo信号通路，促进细胞进行重编辑，有利于体外高效率诱导多能干细胞。
2、本发明的目的之一在于一种化学重编辑方法快速获得人多能干细胞，其特征在于，所述方法是在dmem基础培养基中添加小分子化合物抑制剂，所述小分子化合物抑制剂包括0.05-0.5μm ruxolitinib、0.5-3.5μm ki-16425、5-20μm cd3254、1-5μm amg319、1-10μm fli-06。
3、优选地，所述人多能干细胞的快速获取方法包括如下步骤：
4、1)提供人成体细胞；
5、2)将所述人成体细胞接种于上述含有小分子化合物抑制剂的基础培养基中，连续培养7天，每间隔1天更换新鲜培养基；
6、3)离心收集步骤2)培养后的细胞，并应用流式细胞仪和rt-pcr用于分选和鉴定诱导细胞中oct4、sox2、rex1、nanog中的基因表达情况；
7、4)根据流式细胞仪和rt-pcr检测结果用于鉴定得到的人多能干细胞。
8、优选地，步骤1)中的人成体细胞包括但不限于成纤维细胞；
9、进一步优选地，本发明重编辑方法得到的约80-95％的细胞外形与人胚胎干细胞类似的拱状克隆；
10、进一步优选地，本发明重编辑方法获得的人多能干细胞的基因表达水平与人胚胎干细胞的表达水平接近。
11、本发明的另一目的在于提供了一种化学重编辑促进剂，其特征在于，所述促进剂包括0.05-0.5μm ruxolitinib、0.5-3.5μm ki-16425、5-20μm cd3254、1-5μm amg319、1-10μm fli-06。
12、优选地，所述促进剂包括0.05μm ruxolitinib、0.5μm ki-16425、5μmcd3254、1μmamg319、1μm fli-06。
13、优选地，所述促进剂包括0.1μm ruxolitinib、0.15μm ki-16425、10μmcd3254、2μmamg319、4μm fli-06。
14、优选地，所述促进剂包括0.5μm ruxolitinib、3.5μm ki-16425、20μmcd3254、5μmamg319、10μm fli-06。
15、本发明的另一目的在于提供了一种化学重编辑促进剂在诱导制备人多能干细胞试剂或试剂盒中的用途，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括0.05-0.5μm ruxolitinib、0.5-3.5μm ki-16425、5-20μm cd3254、1-5μm amg319、1-10μm fli-06。
16、进一步地，本发明还提供了一种诱导成体细胞为多能干细胞试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括0.05-0.5μm ruxolitinib、0.5-3.5μmki-16425、5-20μmcd3254、1-5μm amg319、1-10μm fli-06。
17、本发明的优点如下：本发明提供了一种利用小分子化合物抑制剂协同调控细胞增殖分化相关联的细胞信号通路，促进细胞进行重编辑的方法，该方法可快速高效率在体外诱导得到大量人多能干细胞，重编辑效率远高于现有技术中目前已知的重编辑方法，具备良好的商业化应用前景。
1.一种化学重编辑方法快速获得人多能干细胞，其特征在于，所述方法是在基础培养基中添加小分子化合物抑制剂，所述小分子化合物抑制剂包括0.05-0.5μm ruxolitinib、0.5-3.5μm ki-16425、5-20μm cd3254、1-5μmamg319、1-10μm fli-06。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人多能干细胞的快速获取方法包括如下步骤：
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中的人成体细胞包括但不限于成纤维细胞。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中的基础培养基选自dmem、rpmi1640和mem中的一种或多种。
5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法的重编辑效率为80-95％。
6.一种化学重编辑促进剂，其特征在于，所述促进剂包括0.05-0.5μmruxolitinib、0.5-3.5μm ki-16425、5-20μm cd3254、1-5μm amg319、1-10μmfli-06。
7.如权利要求6所述的化学重编辑促进剂，其特征在于，所述促进剂包括0.05μmruxolitinib、0.5μm ki-16425、5μm cd3254、1μm amg319、1μmfli-06。
8.如权利要求6所述的化学重编辑促进剂，其特征在于，所述促进剂包括0.1μmruxolitinib、0.15μm ki-16425、10μm cd3254、2μm amg319、4μm fli-06。
9.如权利要求6所述的化学重编辑促进剂，其特征在于，所述促进剂包括0.5μmruxolitinib、3.5μm ki-16425、20μm cd3254、5μm amg319、10μm fli-06。
10.一种化学重编辑促进剂在诱导制备人多能干细胞试剂或试剂盒中的用途，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括0.05-0.5μm ruxolitinib、0.5-3.5μmki-16425、5-20μmcd3254、1-5μm amg319、1-10μm fli-06。