本发明涉及生物医学,尤其涉及一种前列腺癌标志物在制备前列腺癌早期诊断和预后评估试剂中的应用。
背景技术:
1、前列腺癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于肺癌。据国际癌症研究机构(international agency for research on cancer,iarc)统计,2020年全球前列腺癌新发病例超过140万,死亡病例达37万余例,位居男性肿瘤死亡率第5位。然而,前列腺癌的发病较为隐匿,早期患者多无明显症状,导致大多数患者初诊时已为中晚期前列腺癌,患者预后不佳。目前,临床上最常运用的是通过检测血清前列腺癌特异性抗原(prostatic specific antigen,psa)的水平对前列腺癌进行筛查和术后随访。但psa也存在很大的局限性,尤其对于t-psa为4~10ug/l的灰区前列腺癌,其敏感性和特异性很低。因此,急需寻找一种灵敏度高、特异性强的分子标记物,用于前列腺癌的早期诊断和患者术后病情评估。
2、通读转录本是由相邻基因转录通读产生,包含两个甚至多个基因的mrna序列。转录组测序和生物信息学分析提示真核生物细胞中可能存在相当数量的通读转录本,人类的基因转录通读约占转录组的5%。通读转录本在正常及病变组织中有不同程度的表达,异常的基因通读可能是肿瘤等疾病发生、发展过程中的重要调控环节。因此,通读转录本可作为生物标志物,提高肿瘤诊断的特异性和敏感性,并为临床治疗提供新的思路,有望成为潜在的治疗靶点。
3、高通量基因测序显示前列腺癌中也存在多种基因通读转录本,但其表达水平及作用多不明确。鉴于此,我们提供一种前列腺癌标志物在制备前列腺癌早期诊断和预后评估试剂中的应用。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的不足,适应现实需要,提供一种前列腺癌标志物在制备前列腺癌早期诊断及预后评估试剂中的应用,通过检测bcl2l2-pabpn1通读转录本的表达,实现对前列腺癌的早期诊断和患者术后病情的准确评估。
2、为了实现本发明的目的,本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题:
3、一种前列腺癌标志物在制备前列腺癌早期诊断和预后评估试剂中的应用,所述前列腺癌标志物由14号染色体的bcl2l2基因与其下游相邻基因pabpn1转录通读产生,包括bcl2l2-pabpn1-201/202(以下简写bp1)和bcl2l2-pabpn1-203(以下简写bp2)通读转录本。
4、本发明发现bp1/bp2通读转录本在前列腺癌细胞株中高表达。进一步对比其在良性前列腺增生和前列腺癌石蜡包埋组织中的原位表达情况发现,bp1/bp2通读转录本阳性信号主要定位于细胞质,其在前列腺癌组织中的表达明显高于良性前列腺增生组织;并且,bp1/bp2通读转录本的表达水平与基线psa水平、gleason评分、who/isup预后分级分组和临床t分期呈正相关,其高表达是前列腺癌患者无进展生存时间和疾病特异生存时间的不良预后因素。因此,将bp1/bp2通读转录本作为前列腺癌的标志物,可实现对前列腺癌的早期诊断和患者术后病情的准确评估。
5、优选地,所述试剂为能够特异性检测bp1/bp2通读转录本表达水平的试剂。
6、优选地,所述试剂包括检测bp1通读转录本表达的特异性引物1和检测探针1。
7、优选地,所述特异性引物1的上游引物序列为5’-tgggggctgggagctggaagcta-3’;
8、所述特异性引物1的下游引物序列为5’-agatggaacgggcatcagcctcc-3’;
9、所述检测探针1的序列为5’-agctttgatagcttccagctcctcaagatctggggaacttgca-bio-3’。
10、优选地,所述试剂包括检测bp2通读转录本表达的特异性引物2和检测探针2。
11、优选地,所述特异性引物2的上游引物序列为:5’-cttcacccaggtctccgatg-3’;
12、所述特异性引物2的下游引物序列为:5’-cagcagagtcacagtcgctta-3’;
13、所述检测探针2的序列为5’-tttgatagcttccagctcccagcccccactgctgtggat-bio-3’。
14、与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
15、本发明提供了一种用于前列腺癌辅助诊断的生物标志物bp1/bp2通读转录本,首次公开了bp1/bp2与前列腺癌患者预后的关系。本发明通过荧光定量pcr和原位杂交证实bp1/bp2通读转录本在前列腺癌细胞株及患者肿瘤组织样本中均为高表达,且其表达水平与患者基线psa水平、gleason评分、who/isup预后分级分组和临床t分期呈正相关,是前列腺癌患者无进展生存和疾病特异生存的不良预后因素。因此,可将bp1/bp2通读转录本作为生物标志物,用来提高前列腺癌诊断的特异性和敏感性,并对患者预后进行有效评估。
1.一种前列腺癌标志物在制备前列腺癌早期诊断及预后评估试剂中的应用,其特征在于:所述前列腺癌标志物由14号染色体的bcl2l2基因与其下游相邻基因pabpn1转录通读产生,包括bcl2l2-pabpn1-201/202(简写为bp1)和bcl2l2-pabpn1-203(简写为bp2)通读转录本。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述试剂为能够特异性检测bp1/bp2通读转录本表达水平的试剂。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述试剂包括检测bp1通读转录本表达的特异性引物1和检测探针1。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于:
5.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述试剂包括检测bp2通读转录本表达的特异性引物2和检测探针2。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于: