一种黄精多肽及其制备方法和用途与流程

本发明涉及多肽，具体是涉及一种黄精多肽及其制备方法和用途。

背景技术：

1、急性重症脑梗死是一种严重危及生命的神经系统疾病，其突发性发作和快速进展常导致患者严重的神经功能缺陷，甚至致残或危及生命。脑梗死的治疗一直是临床医学研究的重要课题之一，尤其是针对重症患者，更需要寻找有效的治疗策略，以尽早恢复脑血流和减轻脑组织的缺血和缺氧程度。静脉溶栓是急性脑梗死治疗的关键步骤之一，通过溶解血管内的血栓来恢复梗死脑区的血流。然而，静脉溶栓并不能解决所有问题，尤其是在脑梗死的后续治疗中，患者仍然面临着神经功能的丧失和血管损伤的挑战。因此，探索在静脉溶栓后进一步提高治疗效果的方法至关重要。

2、黄精作为传统中药材，在传统药用中被广泛使用。近年来，科学研究发现，黄精中的黄精多肽，具有多种功效，并对应产生多种应用，但目前尚未见报道黄精多肽在脑梗方面的用途。

技术实现思路

1、本发明目的是克服现有技术的不足，提供一种黄精多肽及其制备方法和用途。为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

2、第一方面，本发明提供了黄精多肽，所述黄精多肽的氨基酸序列为：ala-arg-asp-cys-gln-glu-gly-his-ile-leu-lys-met-phe-ser-thr-val。

3、第二方面，本发明提供了一种上述黄精多肽的制备方法，包括以下步骤：

4、将新鲜黄精洗净并切成小块，经细致粉碎过筛得到黄精粉末，使用真空低温干燥法将其干燥至含水量小于5％；

5、取黄精粉加入10倍重量的磷酸缓冲液，磷酸缓冲液的浓度为0.1mol/l，于4℃条件下浸泡24小时，然后使用超声波法破碎20min,过滤获取提取液；

6、将提取液调节至ph4.5，加入黄精粉质量1.0％的纤维素酶，在35℃下酶解1h；加入黄精粉质量4％的复合酶，在25℃且ph7.0条件下酶解2小时，然后在37℃且ph9.0条件下酶解3小时，然后施加高静水压500mpa且40℃的温度下反应1小时，所述复合酶为碱性蛋白酶、carboxypeptidasey和elastase，所述碱性蛋白酶、carboxypeptidasey和elastase的质量配比为：4:3:2；酶解结束后升温至90℃灭酶15分钟，得到黄精酶解液，将黄精酶解液置于冰水浴中冷却，以5000rpm离心15分钟，收集上清液；

7、使用3kda截留超滤膜对上清液进行超滤，浓缩得到小分子组分，对浓缩后的液体进行透析处理以去除低分子杂质，使用3kda截留超滤膜透析，获得纯化的黄精多肽；

8、将纯化的黄精多肽溶解成100mg/ml；使用c18反相柱进行hplc分离，流动相a为0.1％三氟乙酸水溶液，流动相b为乙腈；设定梯度洗脱条件：0～5min，5％b；5～20min，5％～30％b；20～30min，30％b～45％b；30～35min，45％b～50％b；35～40min，50％b，流速为0.5-0.8ml/min，柱温设置为30℃，监测波长为280nm；根据hplc波谱峰进行分数采集，收集目标波谱峰对应的部分；

9、对分离出的样品进行质谱分析，使用高分辨率质谱设备和lc-ms/ms技术，通过碎片谱图和质谱/质谱数据，确认收集到的样品的氨基酸序列符合目标序列ala-arg-asp-cys-gln-glu-gly-his-ile-leu-lys-met-phe-ser-thr-val，对通过质谱鉴定的目标肽段进行核磁共振分析，验证其分子结构的准确性。

10、第三方面，本发明还提供了上述黄精多肽在制备改善脑血管循环药物的应用。

11、第四方面，本发明还提供了上述黄精多肽在制备改善凝血功能药物的应用。

12、第五方面，本发明还提供了上述黄精多肽在制备促进神经功能修复药物的应用。

13、第六方面，本发明还提供了上述黄精多肽在制备脑梗死药物的应用。

14、第七方面，本发明提供了人工合成的黄精多肽，所述黄精多肽的氨基酸序列为：

15、ala-arg-asp-cys-gln-glu-gly-his-ile-leu-lys-met-phe-ser-thr-val。

16、本发明与现有技术不同之处在于本发明取得了如下技术效果：

17、本发明通过实验发现实验结果表明，氨基酸序列为：

18、ala-arg-asp-cys-gln-glu-gly-his-ile-leu-lys-met-phe-ser-thr-val的黄精多肽可进一步改善患者的脑血管循环和凝血功能，促进患者神经功能的修复和重建，同时，黄精多肽的加用不会增加患者相关不良反应情况的发生风险，安全性理想。

技术特征：

1.一种黄精多肽，其特征在于，所述黄精多肽的氨基酸序列为：

2.一种权利要求1所述的黄精多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.一种如权利要求1所述的黄精多肽在制备改善脑血管循环药物的应用。

4.一种如权利要求1所述的黄精多肽在制备改善凝血功能药物的应用。

5.一种如权利要求1所述的黄精多肽在制备促进神经功能修复药物的应用。

技术总结
本发明公开了一种黄精多肽，所述黄精多肽的氨基酸序列为：Ala‑Arg‑Asp‑Cys‑Gln‑Glu‑Gly‑His‑Ile‑Leu‑Lys‑Met‑Phe‑Ser‑Thr‑Val。本发明通过实验发现黄精多肽可进一步改善患者的脑血管循环和凝血功能，促进患者神经功能的修复和重建，同时，黄精多肽的加用不会增加患者相关不良反应情况的发生风险，安全性理想。

技术研发人员：石丰,宗树伟
受保护的技术使用者：吉林肽谷生物工程有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11