一种磁珠孵育方法及磁珠孵育设备与流程

本发明涉及生物和医疗，尤其涉及一种磁珠孵育方法及磁珠孵育设备。

背景技术：

1、目前，从外周血中提取pbmc，并对提取的pbmc进行人工磁珠孵育，让目标细胞(pbmc)与磁珠或者抗体结合，把目标细胞与磁珠的复合物或者目标细胞与抗体和磁珠的复合物作为终产品，人工磁珠孵育的量少，通常是通过试管方式进行孵育，因此，现有的人工磁珠孵育方法在操作过程中存在污染风险、孵育效果不佳、细胞活性较低、回收率不高的问题，故亟待开发一种安全精准、孵育效果良好的免疫磁珠孵育方法。

技术实现思路

1、本发明提供一种磁珠孵育方法，用以解决现有技术存在污染风险高，回收率低以及孵育效果差的问题。

2、本发明提供一种磁珠孵育方法，包括：

3、在离心容器按照第一转速转动的情况下，通过泵将第一预定量的样本液泵送至所述离心容器中；

4、控制所述离心容器按照第一转速转动第一预定时间，以使所述离心容器中的上清液与目标细胞分离；

5、利用重悬液置换所述离心容器中的上清液；

6、对所述离心容器中的重悬液进行排量，以调整所述离心容器中的细胞量；

7、通过所述泵将磁珠混悬液和磁珠孵育缓冲液泵送至所述离心容器中，以得到细胞-磁珠结合体。

8、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，所述通过泵将第一预定量的样本液泵送至所述离心容器中的步骤，包括：

9、控制第四控制阀以及第十四控制阀打开；

10、控制所述泵反向转动，以将第一预定量的所述样本液泵送至所述离心容器中。

11、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，在所述控制所述离心容器按照第一转速转动第一预定时间的步骤之前，还包括：

12、控制第一控制阀、第四控制阀以及第八控制阀打开；

13、控制所述泵正向转动，以将第二预定量的所述缓冲液泵送至样本袋中；

14、控制第四控制阀以及第十四控制阀打开；

15、控制所述泵反向转动，以将所述样本袋中的缓冲液泵送至所述离心容器中。

16、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，所述利用重悬液置换所述离心容器中的上清液的步骤，包括：

17、控制第二控制阀、第九控制阀以及第十四控制阀打开；

18、在所述离心容器按照第二转速转动的情况下，控制所述泵反向转动，以将第三预定量的重悬液泵送至所述离心容器中；

19、控制第十二控制阀和第十三控制阀打开；

20、控制所述泵正向转动，以将所述离心容器中的上清液泵送至废液袋中；

21、重复执行上述步骤至少一次。

22、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，所述对所述离心容器中的重悬液进行排量的步骤，包括：

23、通过取样装置从所述离心容器中抽取取样液体；

24、通过图像处理识别方法或者细胞计数设备对取样液体中的细胞进行计数，以得到计数结果；

25、控制第十二控制阀和第十三控制阀打开；

26、根据所述计数结果控制所述泵正向转动第二预定时间，以抽取所述离心容器中的部分重悬液。

27、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，在所述通过取样装置从所述离心容器中抽取取样液体的步骤之前，还包括：

28、控制第一控制阀、第九控制阀以及第十四控制阀打开；

29、控制所述泵反向转动，以将第四预定量的缓冲液泵送至所述离心容器中；

30、控制所述离心容器正向转动；

31、控制所述离心容器正向与反向交替转动。

32、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，所述通过所述泵将磁珠孵育缓冲液泵送至所述离心容器中的步骤包括：

33、通过所述泵将磁珠混悬液泵送至所述离心容器中；

34、控制所述离心容器静止第三预定时间；

35、在所述离心容器按照第一转速转动的情况下，通过所述泵将磁珠孵育缓冲液泵送至所述离心容器中；

36、重复执行上述步骤至少一次。

37、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，在所述通过所述泵将磁珠孵育缓冲液泵送至所述离心容器中的步骤之后，还包括：

38、控制第三控制阀、第九控制阀以及第十三控制阀打开；

39、控制所述泵正向转动，以将所述离心容器中的细胞-磁珠结合体泵送至液袋中。

40、根据本发明实施例提供的一种磁珠孵育方法，在所述控制所述泵正向转动的步骤之后，还包括：

41、控制第一控制阀、第九控制阀以及第十四控制阀打开；

42、控制所述泵反向转动，以将第四预定量的缓冲液泵送至所述离心容器中，对所述离心容器进行冲洗；

43、控制所述离心容器转动；

44、控制第三控制阀、所述第九控制阀以及所述第十四控制阀打开；

45、控制所述泵正向转动，以将所述离心容器中的液体泵送至所述液袋中。

46、本发明还提供一种磁珠孵育设备，所述磁珠孵育设备用于上述任一项所述的磁珠孵育方法，包括：

47、泵；

48、泵送管路，夹持于所述泵上；

49、第一连接管路，所述第一连接管路的第一端与所述泵送管路的第一端连通，所述第一连接管路的第二端与所述泵送管路的第二端连通，所述第一连接管路的第一端设置有第八控制阀和第九控制阀；

50、第一输入管路，与所述第八控制阀和所述第九控制阀之间的所述第一连接管路连通，所述第一输入管路设置有第一控制阀；

51、第二输入管路，与所述第八控制阀和所述第九控制阀之间的所述第一连接管路连通，所述第二输入管路设置有第二控制阀；

52、第三输入管路，与所述第八控制阀和所述第九控制阀之间的所述第一连接管路连通，所述第三输入管路设置有第三控制阀；

53、第四输入管路，与所述第一连接管路的第一端连通，所述第四输入管路设置有第四控制阀；

54、离心容器，所述离心容器的输出口通过第一管路与所述泵送管路的第二端连通，所述第一管路设置有第十三控制阀；所述离心容器的输入口通过第二管路与所述泵送管路的第二端连通，所述第二管路设置有第十四控制阀。

55、本发明实施例提供的磁珠孵育方法，通过在磁珠孵育过程中使用离心容器，能够使目标细胞处于一个合适的运动状态，保证目标细胞的质量，以及在后续与抗体/磁珠混悬液结合中起到一个助推作用，让结合更有效，提高了回收率和提取效率；由于整个磁珠孵育过程都在密封设备中进行，极大降低了污染风险。

技术特征：

1.一种磁珠孵育方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的磁珠孵育方法，其特征在于，所述通过泵将第一预定量的样本液泵送至所述离心容器中的步骤，包括：

3.根据权利要求1所述的磁珠孵育方法，其特征在于，在所述控制所述离心容器按照第一转速转动第一预定时间的步骤之前，还包括：

4.根据权利要求1至3任意一项所述的磁珠孵育方法，其特征在于，所述利用重悬液置换所述离心容器中的上清液的步骤，包括：

5.根据权利要求1至3任意一项所述的磁珠孵育方法，其特征在于，所述对所述离心容器中的重悬液进行排量的步骤，包括：

6.根据权利要求5所述的磁珠孵育方法，其特征在于，在所述通过取样装置从所述离心容器中抽取取样液体的步骤之前，还包括：

7.根据权利要求1至3任意一项所述的磁珠孵育方法，其特征在于，所述通过所述泵将磁珠混悬液和磁珠孵育缓冲液泵送至所述离心容器中的步骤包括：

8.根据权利要求1至3任意一项所述的磁珠孵育方法，其特征在于，在所述通过所述泵将磁珠孵育缓冲液泵送至所述离心容器中的步骤之后，还包括：

9.根据权利要求8所述的磁珠孵育方法，其特征在于，在所述控制所述泵正向转动的步骤之后，还包括：

10.一种磁珠孵育设备，所述磁珠孵育设备用于权利要求1至9任一项所述的磁珠孵育方法，其特征在于，包括：

技术总结
本发明提供一种磁珠孵育方法及磁珠孵育设备，涉及生物和医疗技术领域，磁珠孵育方法包括在离心容器按照第一转速转动的情况下，通过泵将第一预定量的样本液泵送至离心容器中；控制离心容器按照第一转速转动第一预定时间，以使离心容器中的上清液与目标细胞分离；利用重悬液置换离心容器中的上清液；对离心容器中的重悬液进行排量，以调整离心容器中的细胞量。通过在磁珠孵育过程中使用离心容器，能够使目标细胞处于一个合适的运动状态，保证目标细胞的质量，以及在后续与抗体/磁珠混悬液结合中起到一个助推作用，让结合更有效，提高了回收率和提取效率；由于整个磁珠孵育过程都在密封设备中进行，极大降低了污染风险。

技术研发人员：郭霄亮,陈洁莹,梁祖穆,欧映廷,邓温平,杜颖,商院芳
受保护的技术使用者：深圳赛桥生物创新技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/24