本发明属于分子生物学领域,具体涉及番茄cnr10基因在番茄株高调控中的应用。
背景技术:
1、株高作为农作物最重要的农艺性状之一,会影响作物结构、土地利用、营养和生产管理等等,是育种家改良作物的重要目标。矮化株型有助于提高作物抵抗外界胁迫能力,并有提高种植密度、增加产量、利于机械化采收等众多优点。因此,对与番茄株高相关的基因进行研究,对于培育理想型株番茄品种具有重要的理论意义和实际应用价值。
技术实现思路
1、本发明通过超表达番茄crn10基因发现,与野生型植株相比,转基因番茄植株节间距缩短,顶端发育受阻,出现矮化表型。
2、本发明的目的之一在于保护番茄cnr10基因在番茄株高调控中的应用,所述番茄cnr10基因为能够编码下述(a)或(b)蛋白质的核苷酸序列:(a)由seq id no:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸序列且具有同样酶活性的由(a)衍生的蛋白质。
3、进一步,所述番茄cnr10基因编码区的核苷酸选自下述(a)或(b)中的任一种:(a)核苷酸序列如seq id no:1所示的dna序列;(b)与(a)中的dna序列具有90%以上同源性,且编码上述的蛋白质的核苷酸序列。
4、本发明的目的之二在于保护检测上述番茄cnr10基因的引物在筛选、培育矮化番茄植株中的应用。
5、本发明的目的之三在于保护含有上述番茄cnr10基因的生物材料,所述生物材料包括表达载体、工程菌、转基因植物细胞系、转基因植株组织、转基因植株器官。
6、进一步,所述工程菌为大肠杆菌、农杆菌。
7、本发明的目的还在于保护一种培育矮化番茄植株的方法,所述方法是超表达上述的番茄cnr10基因。
8、进一步,所述方法包括以下步骤:(1)构建cnr10基因的超量表达载体;(2)将所述超量表达载体转入农杆菌后浸染番茄外植体;(3)对浸染后的番茄外植物筛选后长出愈伤组织,经进一步培育得到植株矮化的番茄植株。
9、进一步,所述超量表达载体的骨架载体为phellsgate8载体。
10、进一步,所述超量表达载体的构建方法如下:以番茄组织的总rna反转录而成的cdna为模板,采用扩增引物扩增cnr 10基因的orf区域,获得目的基因片段;将上述目的基因片段连接至线性化的phellsgate8载体上,转化后得到所述的超量表达载体。
11、进一步,所述扩增引物的序列为:catttggagaggacacgctcgagactatgaacccctcagctcaac;tctcattaaagcaggactctagactc caaattaatcatcacaatcac。
12、与现有技术相比,本发明的核心优势在于:通过超表达cnr10基因,发现了该基因与番茄植株的株高相关,超表达植株节间距缩短,顶端发育受阻,在视觉上表现为番茄植株矮化的表型,对于培育理想型株番茄品种具有重要的理论意义和实际应用价值。
1.番茄cnr10基因在番茄株高调控中的应用,其特征在于,所述番茄cnr10基因为能够编码下述(a)或(b)蛋白质的核苷酸序列:
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述番茄cnr10基因编码区的核苷酸选自下述(a)或(b)中的任一种:
3.检测权利要求1中所述番茄cnr10基因的引物在筛选、培育矮化番茄植株中的应用。
4.含有权利要求1中所述番茄cnr10基因的生物材料,其特征在于,所述生物材料包括表达载体、工程菌、转基因植物细胞系、转基因植株组织、转基因植株器官。
5.根据权利要求4所述的生物材料,其特征在于,所述工程菌为大肠杆菌、农杆菌。
6.一种培育矮化番茄植株的方法,其特征在于,所述方法是超表达权利要求1中所述的番茄cnr10基因。
7.根据权利要求6所述的培育矮化番茄植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
8.根据权利要求7所述的培育矮化番茄植株的方法,其特征在于,所述超量表达载体的骨架载体为phellsgate8载体。
9.根据权利要求8所述的培育矮化番茄植株的方法,其特征在于,所述超量表达载体的构建方法如下:
10.根据权利要求9所述的培育矮化番茄植株的方法,其特征在于,所述扩增引物的序列为:catttggagaggacacgctcgagactatgaacccc tcagctcaac;tctcattaaagcaggactctagactccaaattaatcat cacaatcac。